GnRH-a og graviditetsrate i in vitro fertilisering (IVF) sykluser.

Denne prospektive, randomiserte studien med kontrollgruppe ble utført ved Institutt for obstetrikk og gynekologi, Ioannina University School of Medicine (Ioannina, Hellas). Studiepopulasjonen besto av 120 infertile kvinner (mer enn ett år med seksuelle forsøk), i alderen 29-38 år, med laparoskopisk dokumentert endometriose henvist til In Vitro Fertilization (IVF) enhet ved avdelingen for infertilitetsbehandling i løpet av en 7-års periode (mai 2004 til september 2010). I tillegg brukte vi i den nåværende studien 60 kvinner med tubal infertilitet, dokumentert ved laparoskopi, uten tidligere ovariekirurgi, hydrosalpinx og/eller endometriose som kontrollgruppe. Denne gruppen ble brukt for å se om endometriose påvirker kvinnenes fruktbarhet. Deltakerens påmelding ble gjort av tre følgende forfattere A.K., K.Z. og M.P. Under laparoskopi dokumenterte endoskopisten utvidelsen av sykdommen, fordelingen av endometriotiske lesjoner inn i peritonealhulen og tilstedeværelse/fravær av aktive endometriotiske lesjoner (røde vaskulariserte områder). Alle synlige aktive endometriotiske lesjoner ble kauterisert med bipolar diatermi. Kvinner med sonografiske tegn på ovarieendometriom > 2 cm i gjennomsnittlig diameter, med follikulært stimulerende hormonnivå (FSH) i tidlig follikulær fase > 12 mIU/ml ble ekskludert fra studien. Tilfeller av mannlig faktor infertilitet definert som en konsentrasjon av bevegelige sædceller mindre enn 10 x 106/ml og sædceller med normal morfologi mindre enn 4 % (Kruger, strenge kriterier) ble også ekskludert fra studien.

Alle kvinner som bestemte seg for å gjennomgå et IVF-embryooverføringsforsøk (ET) ble randomisert i to grupper etter administrering eller ikke av GnRH-a-behandling, post-laparoskopi. Randomiseringen utføres ved å gå inn på et sentralt internettbasert randomiseringsprogram. Den tilfeldige tildelingssekvensen og tildelingen av deltakerne til intervensjoner ble gjort av førsteforfatteren av studien (A.K.). Den første gruppen (gruppe A) besto av 60 kvinner som fikk et depotpreparat av en GnRH-a, 3,75 mg s.c. (leuprolid, Daronda depot, 3.75, Abbott, Hellas) hver 28. dag for tre injeksjoner. Etterforskerne foretrakk å forhåndsbehandle studiepasienter med en langtidsvirkende GnRH-a i en periode på 3 måneder fordi det allerede har rapportert at graviditetsratene etter IVF-ET er like hos pasienter med endometriose som er forhåndsbehandlet med en GnRH- a i 10 til 90 dager eller mer enn 90 dager (Caruso 1997; Surrey et al., 2002). I denne gruppen ble laparoskopier utført 4 til 6 måneder før en eventuell syklusstart for infertilitet. Den andre gruppen (gruppe B) bestod av 60 infertile kvinner med endometriose som ikke fikk langtidsvirkende GnRH-a. Alle kvinner var sammenlignbare med hensyn til gjennomsnittsalder, BMI og varighet av infertilitet.

Alle kvinner i kontroll og gruppe B gjennomgikk kontrollert ovariehyperstimulering (COH) etter nedregulering med en GnRH-a (leuprolid, 20 IE/dag, Daronda, 2,8, Abbott, Hellas) i en lang protokoll med en mid-luteal start. Administrering av rekombinant follikkelstimulerende hormon (rFSH, Gonal-F, Serono, Genève, Sveits) ble startet etter minst 14 dager med leuprolidbehandling og når serumøstradiol (E2) hadde vært mindre enn 100 pmol/l og når tykkelsen av endometrium var mindre enn 5 mm. Nedregulering hos kvinner i gruppe A ble igangsatt 30 til 45 dager etter den tredje GnRH-a-injeksjonen. En startdose på 150 IE follikkelstimulerende hormon (rFSH, Gonal-F, Serono, Genève, Sveits) ble justert individuelt fra dag 6 i syklusen i henhold til østradiol (E2)-verdier og ultralydfollikulære målinger. En ovulatorisk dose av humant koriongonadotropin (HGG) (Pregnyl, Organon, Oss, Nederland) 5 000-10 000 IE ble administrert I.M. når gjennomsnittlig diameter på to til fire follikler var større enn 16 mm og plasma østradiolkonsentrasjonen var høyere enn 1500 pmol/l.

Alle kvinner ble gitt til lutealfasestøtte med naturlig mikronisert progesteron (Ultrogestan, Faran, Athen, Hellas), 600 mg daglig vaginalt i tre delte doser, fra dagen etter embryooverføring.

Follikulærvæskeprøver, oocyttinnsamling og IVF Follikulærvæske (FF)-prøver ble samlet under oocytthenting. Fra hver pasient ble det tatt prøver av follikulærvæske fra den første til tre modne folliklene, med en diameter på 18-20 mm. Tumornekrosefaktor (TNF)-a, interleukin (IL)-1β, IL-6, IL-8 og IL-1-ra ble målt i FF for alle kvinner (sekundære utfallsmål). For å forhindre eventuelle cytokinendringer ble det kun brukt blodfrie prøver. IVF ble utført i alle tilfeller. Befruktningsratene ble estimert for hver kvinne 24 timer etter oocyttuthenting (primært utfallsmål).

Embryogradering og -overføring Embryokvaliteten og den kliniske graviditetsraten var også primære utfallsmål. Embryoutvikling ble evaluert 2 dager etter oocytthenting. Antall blastomerer og andelen av embryovolum okkupert av fragmenter ble brukt for evalueringen. Embryoer med < 10 %, < 10-20 %, < 20-30 % og >30 % fragmenter ble estimert til henholdsvis grad 1,2,3 og 4. Tre embryoer med det høyeste blastomertallet og den beste morfologien ble overført i hver syklus. De resterende embryoene av høy kvalitet ble kryokonservert samme dag.

Graviditet ble diagnostisert ved kvantitativ β-hCG, to uker etter embryooverføring. Klinisk graviditet ble bekreftet ved å observere fosterets hjerteaktivitet på transvaginal ultralyd fire uker etter en positiv graviditetstest. Den kliniske graviditetsraten og kvaliteten på embryoene ble estimert hos alle kvinner. Graviditetsraten ble definert som tilstedeværelsen av sonografisk visualisert hjerteaktivitet per påbegynt syklus.