GnRH-a i wskaźnik ciąż w cyklach zapłodnienia in vitro (IVF).

To prospektywne, randomizowane badanie z grupą kontrolną przeprowadzono na Oddziale Położnictwa i Ginekologii Ioannina University School of Medicine (Ioannina, Grecja). Badaną populację stanowiło 120 niepłodnych kobiet (powyżej roku prób seksualnych), w wieku 29-38 lat, z endometriozą udokumentowaną laparoskopowo, skierowanych do Oddziału Zapłodnienia In Vitro (IVF) Oddziału w celu leczenia niepłodności w okresie 7 lat (od maja 2004 do września 2010). Ponadto w obecnym badaniu wykorzystaliśmy 60 kobiet z niepłodnością jajowodów, udokumentowaną laparoskopowo, bez wcześniejszej operacji jajników, hydrosalpinx i / lub endometriozy jako grupę kontrolną. Ta grupa została wykorzystana do sprawdzenia, czy endometrioza wpływa na płodność kobiet. Wpisu uczestnika dokonało trzech następujących autorów: A.K., K.Z. i M.P. Podczas laparoskopii endoskopista udokumentował zasięg choroby, rozmieszczenie zmian endometrialnych w jamie otrzewnej oraz obecność/brak aktywnych zmian endometrialnych (czerwone obszary unaczynione). Wszystkie widoczne aktywne zmiany endometrialne kauteryzowano diatermią bipolarną. Z badania wykluczono kobiety z ultrasonograficznym potwierdzeniem endometriozy jajnika o średnicy > 2 cm i stężeniem hormonu folikulotropowego (FSH) w surowicy we wczesnej fazie folikularnej > 12 mIU/ml. Z badania wykluczono również przypadki męskiego czynnika niepłodności, definiowanego jako stężenie plemników ruchliwych poniżej 10 x 106/ml oraz plemników o prawidłowej morfologii poniżej 4% (Kruger, kryteria ścisłe).

Wszystkie kobiety, które zdecydowały się na próbę IVF-Embryo Transfer (ET) zostały losowo przydzielone do dwóch grup w zależności od podania lub nie leczenia GnRH-a, po laparoskopii. Randomizację przeprowadza się przez dostęp do centralnego internetowego programu do randomizacji. Losowej kolejności przydziału i przydziału uczestników do interwencji dokonał pierwszy autor badania (A.K.). Pierwsza grupa (Grupa A) składała się z 60 kobiet, które otrzymywały preparat depot GnRH-a, 3,75 mg s.c (leuprolid, Daronda depot, 3,75, Abbott, Hellas) co 28 dni przez trzy wstrzyknięcia. Badacze woleli wstępnie leczyć pacjentki z długo działającym GnRH-a przez okres 3 miesięcy, ponieważ doniesiono już, że wskaźniki ciąż po IVF-ET są podobne u pacjentek z endometriozą, które są wstępnie leczone GnRH-a. a przez 10 do 90 dni lub dłużej niż 90 dni (Caruso 1997; Surrey i in., 2002). W tej grupie laparoskopie wykonywano 4 do 6 miesięcy przed jakąkolwiek inicjacją cyklu z powodu niepłodności. Druga grupa (Grupa B) składała się z 60 niepłodnych kobiet z endometriozą, które nie otrzymywały długo działającego GnRH-a. Wszystkie kobiety były porównywalne pod względem średniego wieku, BMI i czasu trwania niepłodności.

Wszystkie kobiety z grupy kontrolnej i grupy B przeszły kontrolowaną hiperstymulację jajników (COH) po obniżeniu poziomu GnRH-a (leuprolid, 20 IU/dzień, Daronda, 2,8, Abbott, Hellas) w długim protokole z środkową fazą lutealną początek. Podawanie rekombinowanego hormonu folikulotropowego (rFSH, Gonal-F, Serono, Genewa, Szwajcaria) rozpoczęto po co najmniej 14 dniach leczenia leuprolidem i gdy stężenie estradiolu (E2) w surowicy było mniejsze niż 100 pmol/l i gdy grubość endometrium było mniejsze niż 5 mm. Regulacja w dół u kobiet z grupy A została zapoczątkowana 30 do 45 dni po trzecim wstrzyknięciu GnRH-a. Dawkę początkową 150 j.m. hormonu folikulotropowego (rFSH, Gonal-F, Serono, Genewa, Szwajcaria) dobierano indywidualnie od 6. dnia cyklu na podstawie wartości estradiolu (E2) i ultrasonograficznych pomiarów pęcherzyków. Dawkę owulacyjną ludzkiej gonadotropiny kosmówkowej (HGG) (Pregnyl, Organon, Oss, Holandia) 5 000-10 000 IU podano domięśniowo, gdy średnia średnica dwóch do czterech pęcherzyków była większa niż 16 mm, a stężenie estradiolu w osoczu było wyższe niż 1500 pmol/l.

Wszystkim kobietom zapewniono wsparcie fazy lutealnej naturalnym mikronizowanym progesteronem (Ultrogestan, Faran, Ateny, Grecja), 600 mg dziennie dopochwowo w trzech dawkach podzielonych, począwszy od następnego dnia po transferze zarodków.

Pobieranie próbek płynu pęcherzykowego, zbieranie oocytów i IVF Próbki płynu pęcherzykowego (FF) pobierano podczas pobierania oocytów. Od każdego pacjenta pobrano płyn pęcherzykowy od pierwszego do trzech dojrzałych pęcherzyków o średnicy 18-20 mm. Czynnik martwicy nowotworu (TNF)-a, interleukinę (IL)-1β, IL-6, IL-8 i IL-1-ra zmierzono w FF wszystkich kobiet (miary wyników drugorzędowych). Aby zapobiec jakimkolwiek zmianom cytokin, zastosowano tylko próbki wolne od krwi. We wszystkich przypadkach wykonano IVF. Wskaźniki zapłodnienia oszacowano dla każdej kobiety 24 godziny po pobraniu komórki jajowej (pierwotna miara wyniku).

Klasyfikacja i transfer zarodków Jakość zarodków i wskaźnik ciąż klinicznych były również głównymi miarami wyniku. Rozwój zarodka oceniano 2 dni po pobraniu komórki jajowej. Do oceny wykorzystano liczbę blastomerów oraz proporcję objętości zarodka zajmowaną przez fragmenty. Zarodki z fragmentami < 10%, < 10-20%, < 20-30% i > 30% oceniono odpowiednio na stopień 1, 2, 3 i 4. W każdym cyklu przenoszono trzy zarodki o najwyższej liczbie blastomerów i najlepszej morfologii. Pozostałe zarodki wysokiej jakości zostały zamrożone tego samego dnia.

Ciążę rozpoznano na podstawie ilościowego oznaczenia β-hCG, dwa tygodnie po transferze zarodków. Ciąża kliniczna została potwierdzona przez obserwację czynności serca płodu w USG przezpochwowym cztery tygodnie po pozytywnym teście ciążowym. U wszystkich kobiet oceniono odsetek ciąż klinicznych oraz jakość zarodków. Wskaźnik ciąż zdefiniowano jako obecność ultrasonograficznie wizualizowanej aktywności serca na zainicjowany cykl.