GnRH-a a míra těhotenství v cyklech oplodnění in vitro (IVF).

Tato prospektivní, randomizovaná studie s kontrolní skupinou byla provedena na Porodnické a gynekologické klinice Lékařské fakulty Univerzity Ioannina (Ioannina, Řecko). Studovanou populaci tvořilo 120 neplodných žen (více než rok sexuálních pokusů), ve věku 29–38 let, s laparoskopicky dokumentovanou endometriózou postoupených na oddělení in vitro fertilizace (IVF) oddělení k léčbě neplodnosti po dobu 7 let. (květen 2004 až září 2010). Kromě toho jsme v současné studii použili jako kontrolní skupinu 60 žen s tubární neplodností, dokumentovanou laparoskopií, bez předchozí anamnézy ovariální operace, hydrosalpinxu a/nebo endometriózy. Tato skupina byla použita ke zjištění, zda endometrióza ovlivňuje plodnost žen. Zápis účastníka provedli tři následující autoři A.K., K.Z. a M.P. Při laparoskopii endoskopista dokumentoval rozšíření onemocnění, distribuci endometriotických lézí do peritoneální dutiny a přítomnost/nepřítomnost aktivních endometriotických lézí (červené vaskularizované oblasti). Všechny viditelné aktivní endometriotické léze byly kauterizovány bipolární diatermií. Ženy se sonografickým průkazem ovariálního endometriomu o středním průměru > 2 cm, s časnou folikulární fází sérových hladin folikulárně stimulujícího hormonu (FSH) > 12 mIU/ml byly ze studie vyloučeny. Ze studie byly také vyloučeny případy mužské faktorové neplodnosti definované jako koncentrace pohyblivých spermií nižší než 10 x 106 /ml a spermií s normální morfologií nižší než 4 % (Kruger, přísná kritéria).

Všechny ženy, které se rozhodly podstoupit pokus o IVF-Embryo Transfer (ET), byly randomizovány do dvou skupin podle toho, zda po laparoskopii byla nebo nebyla podávána léčba GnRH-a. Randomizace se provádí přístupem k centrálnímu internetovému randomizačnímu programu. Sekvence náhodného přidělování a přiřazení účastníků k intervencím byly provedeny prvním autorem studie (A.K.). První skupinu (skupinu A) tvořilo 60 žen, které dostávaly depotní přípravek GnRH-a, 3,75 mg s.c, (leuprolid, Daronda depot, 3,75, Abbott, Hellas) každých 28 dní ve třech injekcích. Vyšetřovatelé upřednostnili předběžnou léčbu pacientek ve studii dlouhodobě působícím GnRH-a po dobu 3 měsíců, protože již bylo uvedeno, že míra těhotenství po IVF-ET je podobná u pacientek s endometriózou, které byly předem léčeny GnRH- a po dobu 10 až 90 dnů nebo déle než 90 dnů (Caruso 1997; Surrey et al., 2002). V této skupině byly laparoskopie prováděny 4 až 6 měsíců před zahájením jakéhokoli cyklu pro neplodnost. Druhou skupinu (skupinu B) tvořilo 60 neplodných žen s endometriózou, které nedostávaly dlouhodobě působící GnRH-a. Všechny ženy byly srovnatelné, pokud jde o průměrný věk, BMI a délku trvání neplodnosti.

Všechny ženy z kontroly a skupiny B podstoupily řízenou ovariální hyperstimulaci (COH) po down-regulaci pomocí GnRH-a (leuprolid, 20 IU/den, Daronda, 2,8, Abbott, Hellas) v dlouhém protokolu se středním luteálním Start. Podávání rekombinantního folikuly stimulujícího hormonu (rFSH, Gonal-F, Serono, Ženeva, Švýcarsko) bylo zahájeno po nejméně 14 dnech léčby leuprolidem a když sérový estradiol (E2) byl nižší než 100 pmol/la tloušťka endometrium bylo menší než 5 mm. Down-regulace u žen skupiny A byla zahájena 30 až 45 dnů po třetí injekci GnRH-a. Počáteční dávka 150 IU folikuly stimulujícího hormonu (rFSH, Gonal-F, Serono, Ženeva, Švýcarsko) byla individuálně upravena od 6. dne cyklu podle hodnot estradiolu (E2) a ultrasonografických měření folikulů. Ovulační dávka lidského choriového gonadotropinu (HGG) (Pregnyl, Organon, Oss, Nizozemsko) 5 000-10 000 IU byla podána I.M., když průměrný průměr dvou až čtyř folikulů byl větší než 16 mm a koncentrace estradiolu v plazmě byla vyšší než 1500 pmol/l.

Všem ženám byla poskytnuta podpora luteální fáze přirozeným mikronizovaným progesteronem (Ultrogestan, Faran, Atény, Řecko), 600 mg denně vaginálně ve třech dílčích dávkách, počínaje dnem po transferu embryí.

Vzorky folikulární tekutiny, odběr oocytů a IVF Vzorky folikulární tekutiny (FF) byly odebrány během odběru oocytů. Od každého pacienta byl odebrán vzorek folikulární tekutiny z prvního až tří zralých folikulů o průměru 18-20 mm. Tumor Necrosis Factor (TNF)-a, interleukine (IL)-1β, IL-6, IL-8 a IL-1-ra byly měřeny ve FF všech žen (sekundární výsledná měření). Aby se zabránilo jakýmkoli změnám cytokinů, byly použity pouze vzorky bez krve. Ve všech případech bylo provedeno IVF. Míra oplodnění byla odhadnuta pro každou ženu 24 hodin po odebrání oocytů (primární výsledná míra).

Hodnocení a přenos embryí Kvalita embrya a míra klinického těhotenství byly také primárními výstupními měřítky. Vývoj embrya byl hodnocen 2 dny po odběru oocytů. Pro hodnocení byl použit počet blastomer a podíl objemu embrya obsazený fragmenty. Embrya s < 10 %, < 10-20 %, < 20-30 % a >30 % fragmentů byla odhadnuta jako 1., 2., 3. a 4. stupeň. V každém cyklu byla přenesena tři embrya s nejvyšším počtem blastomer a nejlepší morfologií. Zbývající vysoce kvalitní embrya byla kryokonzervována tentýž den.

Těhotenství bylo diagnostikováno kvantitativním β-hCG dva týdny po přenosu embryí. Klinické těhotenství bylo potvrzeno pozorováním srdeční aktivity plodu na transvaginálním ultrazvuku čtyři týdny po pozitivním těhotenském testu. U všech žen byla odhadnuta klinická míra těhotenství a kvalita embryí. Četnost těhotenství byla definována jako přítomnost sonograficky vizualizované srdeční aktivity na započatý cyklus.