Base Molecular da Alergia Alimentar

Amostra de sangue para estudos mecanísticos:

O sangue será obtido por punção venosa. As amostras de sangue serão usadas para estimar a frequência e os produtos das células envolvidas na reação alérgica. Quantificaremos o número de linfócitos e seus subconjuntos, e o número de granulócitos (neutrófilos, basófilos e eosinófilos) e monócitos e analisaremos seus produtos (como citocinas, quimiocinas, prostanóides). Tal análise será realizada por meio de estudos de citofluxo, usando citometria de fluxo de 4 cores (BD FACSCalibur Flow XCytometry System) nas instalações centrais do Children's Hospital Flow Cytometry, ELISA, análise de mRNA e western blots usando quando indicado o Nucleic Acid/Protein Core. Caso o sangue não seja totalmente consumido nos exames citados, ele será armazenado em nitrogênio líquido para futuros exames semelhantes ou repetição dos já realizados em caso de problema técnico na primeira tentativa.

Amostra de sangue para estudo genético (opcional)

O Centro de Genômica Aplicada (CAG) fará análises genéticas. Todos os sujeitos (casos e controles) foram ou serão genotipados na plataforma Illumina HumanHap BeadArray SNP, e os dados foram armazenados seguindo um protocolo aprovado pelo IRB

O sequenciamento completo do exon (também conhecido como captura de exoma direcionada) é uma estratégia eficiente para sequenciar seletivamente as regiões codificantes do genoma como uma alternativa mais barata, mas ainda eficaz, ao sequenciamento completo do genoma. Os éxons são sequências de DNA curtas e funcionalmente importantes que representam as regiões nos genes que são traduzidas em proteínas e a região não traduzida flanqueando-as (UTR). Estima-se que as regiões codificadoras de proteínas do genoma humano constituam cerca de 85% das mutações causadoras de doenças.

A análise estatística será feita em conjunto com o centro de bioinformática do CAG e do Children's Hospital of Philadelphia (CHOP). Iremos comparar as variantes genéticas identificadas entre sequenciamento e genotipagem baseada em SNPs.

Teste EndoPat (opcional)

EndoPat é uma avaliação não invasiva da função endotelial. O paciente deve descansar confortavelmente por 10 minutos antes do teste. Usando um manguito de pressão arterial padrão, a artéria braquial é ocluída por um período de 5 minutos. Quando o manguito é liberado, o EndoPat mede as taxas de fluxo sanguíneo pré-oclusão e pós-oclusão. Este teste requer que os pacientes fiquem sentados por 15 minutos. Recomenda-se jejum de 3 a 8 horas antes do exame. Além disso, os seguintes medicamentos não devem ser usados ​​24 horas antes do teste: nitroglicerina, alfa-bloqueadores, beta-bloqueadores e bloqueadores dos canais de cálcio, inibidores da ECA, estatinas