Vacinação com células dendríticas em pacientes com síndrome de Lynch ou câncer colorretal com MSI

Justificativa deste estudo:

Células dendríticas (DC) geradas ex vivo e carregadas com antígeno tumoral são atualmente usadas em protocolos de vacinação clínica em pacientes com câncer. As vacinas DC são seguras, com efeitos colaterais mínimos. Avaliando mais de 200 pacientes tratados nos últimos dez anos, descobrimos que as respostas clínicas medidas em vários pacientes coincidem diretamente com as respostas específicas das células T citotóxicas. A maioria dos estudos investigou os efeitos terapêuticos das vacinas DC em pacientes com câncer em estágio avançado com metástase. Nestes pacientes (fortemente) pré-tratados, o sistema imunológico está comprometido. Com base em nossas observações de que uma resposta imune específica é indicativa de um bom resultado clínico, acreditamos que todo o potencial dessas células imunoestimuladoras deve ser explorado em pacientes de alto risco com baixa carga tumoral ou em estado pré-canceroso.

Um bom modelo clínico são os portadores de uma mutação germinativa em um dos genes de reparo de incompatibilidade de DNA (MMR), como pacientes com síndrome de Lynch (também conhecido como câncer colorretal hereditário sem polipose ou HNPCC). Essas pessoas têm um risco vitalício de 60-80% para câncer colorretal que se desenvolveu dentro de alguns anos a partir de um adenoma pré-canceroso. Acredita-se que o sistema imunológico seja de grande importância potencial, pois o câncer colorretal na síndrome de Lynch é caracterizado por uma forte infiltração de linfócitos, mesmo no estágio de adenomas. Em lesões cancerígenas afetadas, a disfunção MMR resulta em mutações frameshift em sequências curtas e repetitivas de DNA chamadas de microssatélites. Nas regiões codificantes, essas mutações destroem a função do gene e demonstraram levar à produção de neopeptídeos. Esses neopeptídeos são: 1) específicos do tumor, porque as mutações frameshift ocorrem apenas nas células tumorais e seus progenitores pré-malignos, 2) são muito semelhantes entre os pacientes, uma vez que os mesmos genes são afetados pelo defeito de reparo incompatível e 3) imunogênicos, uma vez que as células T citotóxicas (CTL) e células T auxiliares podem ser induzidas in vitro a partir do sangue de pacientes com síndrome de Lynch. Mecanismos semelhantes ocorrem no câncer de cólon esporádico com disfunção MMR, que representa cerca de 10-15% de todos os colorretais 2.

Objetivos.

Neste estudo iniciado pelo Radboud University Nijmegen Medical Center (RUNMC), nosso primeiro objetivo é investigar a toxicidade (segurança e viabilidade) da vacinação com DC derivada de frameshift carregada com neoantígenos de pacientes com CRC com um CRC positivo para MSI e pessoas que são conhecidas por serem portadora de uma mutação germinativa do gene MMR sem sinais de doença ainda.

Os objetivos secundários do estudo são demonstrar que as DC carregadas com peptídeo podem induzir ou aumentar uma resposta imune ao antígeno CEA associado ao tumor e neoantígenos derivados de frameshift específicos na população do estudo. E queremos estudar as respostas patológicas e clínicas, por ex. sobrevida livre de doença, determinada de acordo com o protocolo padrão.

Design de estudo:

Este estudo é um estudo aberto de fase I/II.

População do estudo:

Serão vacinados dois grupos de adultos:

Grupo I) Pacientes com CRC, que são portadores de uma mutação germinativa do gene MMR e pacientes com CRC positivo para MSI e ainda com status de mutação do gene MMR desconhecido ou negativo.

Grupo II) pessoas que são conhecidas por serem portadoras de uma mutação germinativa do gene MMR sem sinais de doença ainda. Todos os participantes precisam ser positivos para HLA-A2.1.

Desfechos principais do estudo:

O primeiro objetivo deste estudo é a toxicidade (segurança e viabilidade) da vacinação com DC carregadas com neoantígenos derivadas de frameshift. Isso será medido pelo registro dos eventos adversos de acordo com o Common Terminology Criteria for Adverse Events versão 3.0.

Os objetivos secundários do estudo são demonstrar que as DC carregadas com peptídeo podem induzir ou aumentar uma resposta imune ao antígeno CEA associado ao tumor e neoantígenos derivados de frameshift específicos na população do estudo. As respostas imunes serão avaliadas como:

• resposta proliferativa e humoral a KLH
• produção de citocinas de PBMC estimuladas por KLH
• Respostas de células T antígeno-específicas tumorais no sangue periférico
• Respostas de células T específicas do antígeno tumoral em biópsias de DTH
• produção de citocinas de células T em biópsias de DTH
• citotoxicidade de células T em biópsias de DTH
• caracterização imuno-histoquímica de linfócitos infiltrantes de DTH

As respostas patológicas e clínicas, e. sobrevida livre de doença, será determinada de acordo com o protocolo padrão.