Вакцинация дендритными клетками у пациентов с синдромом Линча или колоректальным раком с MSI

Обоснование этого исследования:

Созданные ex vivo и нагруженные опухолевым антигеном дендритные клетки (ДК) в настоящее время используются в протоколах клинической вакцинации онкологических больных. DC-вакцины безопасны, имеют минимальные побочные эффекты. Оценивая более 200 пациентов, получавших лечение за последние десять лет, мы обнаружили, что клинические ответы, измеренные у нескольких пациентов, прямо совпадают со специфическими ответами цитотоксических Т-клеток. В большинстве исследований изучались терапевтические эффекты DC-вакцин у больных раком на поздних стадиях с метастазами. У этих (сильно) предварительно леченных пациентов иммунная система находится под угрозой. Основываясь на наших наблюдениях о том, что специфический иммунный ответ свидетельствует о хорошем клиническом исходе, мы считаем, что весь потенциал этих иммуностимулирующих клеток необходимо использовать у пациентов с высоким риском с низкой опухолевой массой или в предраковом состоянии.

Хорошей клинической моделью являются носители зародышевой мутации в одном из генов репарации несоответствия ДНК (MMR), такие как пациенты с синдромом Линча (также известным как наследственный неполипозный колоректальный рак или HNPCC). Эти люди имеют пожизненный риск колоректального рака, развившегося в течение нескольких лет из предраковой аденомы, на уровне 60-80%. Считается, что иммунная система имеет потенциально большое значение, поскольку колоректальный рак при синдроме Линча характеризуется выраженной лимфоцитарной инфильтрацией даже на стадии аденомы. В пораженных раковых поражениях дисфункция MMR приводит к мутациям сдвига рамки считывания в коротких повторяющихся последовательностях ДНК, называемых микросателлитами. В кодирующих областях эти мутации нарушают функцию гена и, как было показано, приводят к продукции неопептидов. Эти неопептиды: 1) опухолеспецифичны, поскольку мутации со сдвигом рамки считывания возникают только в опухолевых клетках и их предраковых предшественниках, 2) очень похожи между пациентами, поскольку одни и те же гены затрагиваются дефектом репарации несоответствия, и 3) иммуногенны, поскольку цитотоксические Т-клетки (ЦТЛ) и хелперные Т-клетки могут быть индуцированы in vitro из крови пациентов с синдромом Линча. Подобные механизмы возникают при спорадическом раке толстой кишки с дисфункцией MMR, который составляет около 10-15% всех случаев колоректального рака 2.

Цели:

В этом исследовании, инициированном Медицинским центром Университета Радбауд в Неймегене (RUNMC), нашей первой целью является изучение токсичности (безопасности и осуществимости) вакцинации неоантиген-нагруженными ДК, полученными со сдвигом рамки считывания, у пациентов с КРР с MSI-положительным КРР и у лиц, о которых известно, что они носитель зародышевой мутации гена MMR без признаков заболевания.

Второстепенными целями исследования являются демонстрация того, что нагруженные пептидами ДК могут индуцировать или усиливать иммунный ответ на опухолеассоциированный антиген СЕА и специфические неоантигены, полученные со сдвигом рамки считывания, в исследуемой популяции. И мы хотим изучить патологические и клинические реакции, т.е. безрецидивная выживаемость, определяемая по стандартному протоколу.

Дизайн исследования:

Это исследование является открытым исследованием фазы I/II.

Исследуемая популяция:

Две группы взрослых будут вакцинированы:

Группа I) пациенты с КРР, о которых известно, что они являются носителями зародышевой мутации гена MMR, и пациенты с MSI-положительным КРР, но неизвестным или отрицательным статусом мутации гена MMR.

II группа) лица, заведомо являющиеся носителями зародышевой мутации гена MMR без признаков заболевания. Все участники должны быть HLA-A2.1 положительными.

Основные конечные точки исследования:

Первой целью этого исследования является токсичность (безопасность и осуществимость) вакцинации неоантиген-нагруженными ДК, полученными со сдвигом рамки считывания. Это будет измеряться путем регистрации нежелательных явлений в соответствии с Общими терминологическими критериями нежелательных явлений версии 3.0.

Второстепенными целями исследования являются демонстрация того, что нагруженные пептидами ДК могут индуцировать или усиливать иммунный ответ на опухолеассоциированный антиген СЕА и специфические неоантигены, полученные со сдвигом рамки считывания, в исследуемой популяции. Иммунный ответ будет оцениваться как:

• пролиферативный и гуморальный ответ на KLH
• продукция цитокинов KLH-стимулированными PBMC
• опухолевые антиген-специфические Т-клеточные ответы в периферической крови
• опухолевые антиген-специфические Т-клеточные ответы в биоптатах ГЗГ
• продукция цитокинов Т-клетками в биоптатах ГЗТ
• цитотоксичность Т-клеток в биоптатах ГЗТ
• иммуногистохимическая характеристика лимфоцитов, инфильтрирующих ГЗТ

Патологические и клинические реакции, т.е. безрецидивная выживаемость будет определяться в соответствии со стандартным протоколом.