Očkování dendritických buněk u pacientů s Lynchovým syndromem nebo kolorektálním karcinomem s MSI

Odůvodnění této studie:

Dendritické buňky (DC) generované ex vivo a nabité nádorovým antigenem se v současnosti používají v protokolech klinického očkování u pacientů s rakovinou. DC vakcíny jsou bezpečné, s minimálními vedlejšími účinky. Vyhodnocením více než 200 pacientů léčených v posledních deseti letech jsme zjistili, že klinické odpovědi měřené u několika pacientů se přímo shodují se specifickými cytotoxickými odpověďmi T buněk. Většina studií zkoumala terapeutické účinky DC vakcín u pacientů s rakovinou v pozdním stádiu s metastázami. U těchto (těžce) předléčených pacientů je imunitní systém ohrožen. Na základě našich pozorování, že specifická imunitní odpověď je ukazatelem dobrého klinického výsledku, se domníváme, že u vysoce rizikových pacientů s nízkou nádorovou zátěží nebo v prekancerózním stavu je třeba využít plný potenciál těchto imunostimulačních buněk.

Dobrým klinickým modelem jsou nositelé zárodečné mutace v jednom z genů pro opravu chybného spojení DNA (MMR), jako jsou pacienti s Lynchovým syndromem (také známým jako hereditární nepolypózní kolorektální rakovina nebo HNPCC). Tyto osoby mají celoživotní riziko 60-80% kolorektálního karcinomu, který se vyvinul během několika let z prekancerózního adenomu. Předpokládá se, že imunitní systém má potenciálně velký význam, protože kolorektální karcinom u Lynchova syndromu je charakterizován silnou infiltrací lymfocytů, dokonce i ve stádiu adenomů. U postižených rakovinných lézí má dysfunkce MMR za následek posunové mutace v krátkých, opakujících se sekvencích DNA označovaných jako mikrosatelity. V kódujících oblastech tyto mutace ničí genovou funkci a bylo prokázáno, že vedou k produkci neopeptidů. Tyto neopeptidy jsou: 1) nádorově specifické, protože posunové mutace se vyskytují pouze v nádorových buňkách a jejich premaligních progenitorech, 2) jsou velmi podobné mezi pacienty, protože tytéž geny jsou postiženy defektem opravy mismatch a 3) imunogenní, protože cytotoxické T buňky (CTL) a pomocné T buňky mohly být indukovány in vitro z krve pacientů s Lynchovým syndromem. Podobné mechanismy se vyskytují u sporadického karcinomu tlustého střeva s dysfunkcí MMR, která představuje asi 10–15 % všech kolorektálních 2.

Cíle:

V této studii iniciované Radboud University Nijmegen Medical Center (RUNMC) je naším prvním cílem prozkoumat toxicitu (bezpečnost a proveditelnost) vakcinace s neoantigenem nabitými DC získanými z posunu rámce u pacientů s CRC s MSI-pozitivním CRC a osob, o kterých je známo, že jsou nosič zárodečné mutace genu MMR bez dosud známek onemocnění.

Sekundárními cíli studie je demonstrovat, že DC nabité peptidem mohou indukovat nebo zesílit imunitní odpověď na antigen CEA asociovaný s nádorem a specifické neoantigeny odvozené z posunu rámce ve studované populaci. A chceme studovat patologické a klinické odezvy, např. přežití bez onemocnění, stanovené podle standardního protokolu.

Studovat design:

Tato studie je otevřenou studií fáze I/II.

Studijní populace:

Budou očkovány dvě skupiny dospělých:

Skupina I) Pacienti s CRC, o kterých je známo, že jsou nositeli zárodečné mutace genu MMR a pacienti s MSI-pozitivním CRC a dosud neznámým nebo negativním stavem mutace genu MMR.

Skupina II) osoby, o kterých je známo, že jsou přenašeči zárodečné mutace genu MMR bez dosud známek onemocnění. Všichni účastníci musí být HLA-A2.1 pozitivní.

Hlavní cíle studie:

Prvním cílem této studie je toxicita (bezpečnost a proveditelnost) vakcinace s DC derivovanými z posunu neoantigenu. To bude měřeno záznamem nežádoucích příhod podle Společných terminologických kritérií pro nežádoucí příhody verze 3.0.

Sekundárními cíli studie je demonstrovat, že DC nabité peptidem mohou indukovat nebo zesílit imunitní odpověď na antigen CEA asociovaný s nádorem a specifické neoantigeny odvozené z posunu rámce ve studované populaci. Imunitní reakce budou hodnoceny jako:

• proliferativní a humorální odpověď na KLH
• produkce cytokinů KLH stimulovaných PBMC
• odpovědi T lymfocytů specifické pro nádorový antigen v periferní krvi
• odpovědi T lymfocytů specifické pro nádorový antigen v biopsiích z DTH
• produkce cytokinů T buněk v biopsiích z DTH
• cytotoxicita T buněk v biopsiích z DTH
• imunohistochemická charakterizace DTH infiltrujících lymfocytů

Patologické a klinické reakce, např. přežití bez onemocnění, bude stanoveno podle standardního protokolu.