Colocação de implantes dentários em conjunto com células-tronco mesenquimais derivadas da medula óssea alveolar autóloga (aBM-MSCs) (Implant_bone)

Metas e Objetivos:

O presente estudo descreve um novo método para preservar a crista óssea em implantes dentários de dois estágios usando aBMMSCs autólogos, livres de reagentes derivados de animais, produzidos em instalações de sala limpa enriquecidos com cola de fibrina autóloga e semeados em andaimes de colágeno comercialmente disponíveis (velo de colágeno) que são estabilizados sobre a plataforma do implante após a colocação cirúrgica do implante.

Objetivo primário:

Este estudo tem como objetivo avaliar a eficácia de um novo método baseado em histotecnologia na preservação da crista óssea em implantes dentários de dois estágios, em comparação com a colocação de implantes cirúrgicos convencionais seguindo as diretrizes do fabricante sem o uso adjuvante de materiais de enxerto.

Secundariamente, as alterações nos tecidos moles peri-implantares também serão determinadas entre a colocação e a exposição do implante e serão comparadas entre as abordagens de tratamento cirúrgico experimental e convencional.

Design de estudo:

As biópsias serão derivadas da medula óssea alveolar do osso alveolar sob anestesia local em cada paciente pertencente ao Grupo Experimental (Grupo-A). Resumidamente, após uma lavagem oral completa com clorexidina 0,12% por 1min, uma osteotomia usando uma broca trefina será realizada no osso alveolar de um local edêntulo intraoral diferente do local do implante e um núcleo ósseo de 2x8 mm ou 3cc aproximadamente será colhido. A área e a biópsia serão abundantemente irrigadas com solução salina e, em seguida, os retalhos serão suturados para obter o fechamento primário na área doadora. A amostra de osso será imediatamente colocada em tubos estéreis e transportada para Biohellenika, Thessaloniki, Grécia (http://www.biohellenika.gr) para isolamento e expansão de células-tronco de acordo com um rigoroso protocolo de expansão de grau clínico (Bakopoulou et al . 2013; Bakopoulou et al. em preparação). Uma vez que as MSCs serão isoladas e expandidas in vitro em salas limpas compatíveis com Boas Práticas de Laboratório (GLP) (instalações da Biohellenika), atendendo às diretrizes de qualidade definidas pela União Européia e nenhum reagente derivado de animal será usado durante os experimentos para transplante autólogo, as células são considerados seguros para aplicações de terapia celular clínica humana. Nas instalações da Biohellenika, serão coletados 40ml de sangue venoso de cada indivíduo do Grupo-A logo após a coleta da biópsia, para que o soro autólogo seja utilizado para o isolamento e expansão da cultura das células-tronco autólogas. Além disso, cola de fibrina autóloga será usada para carregar os BM-MSCs em um velo de colágeno disponível comercialmente. No dia da colocação cirúrgica dos implantes e na cadeira, o material de enxerto (BM-MSCs enriquecido com cola de fibrina) será entregue em uma seringa de insulina contendo 10x10E6 células/200μl de fibrina e será suavemente carregado no velo de colágeno e ativado com a adição de CaCl2. Posteriormente, o biocomplexo será suturado no retalho lingual com fios bioabsorvíveis (5-0 Coated VicrylTM (polyglactin 910), corte reverso 3/8 circle - 16mm, Ethicon, Johnson & Johnson, New Brunswick, NJ, USA) e será assim suavemente estabilizado sobre a cabeça da plataforma do implante cobrindo parcialmente o osso vestibular. O manuseio do andaime será feito com cuidado para evitar qualquer dano às células viáveis.

No Grupo Controle (Grupo-B), os implantes serão colocados no sentido crestal seguindo as orientações do fabricante sem uso adjuvante de materiais de enxertia. Um sistema de implantes será usado consistentemente ao longo do estudo em ambos os grupos (Osseotite, Certain, parede paralela, Biomet 3i, Palm Beach Gardens, EUA).

Cuidados pós-operatórios A dor pós-operatória será controlada com Ibuprofeno (600mg) ao final do procedimento cirúrgico e 12h depois se houver dor. Amoxicilina (500mg / 8 horas por 5 dias) será prescrita para ambos os Grupos. Todos os pacientes serão instruídos a usar clorexidina 0,12% duas vezes ao dia e evitar escovar e mastigar com força na área tratada por duas semanas. Durante este período de 2 semanas, os pacientes serão acompanhados semanalmente para registrar a cicatrização sem intercorrências e, depois disso, os pacientes interromperão o enxágue com solução de clorexidina e retomarão a higiene oral. Posteriormente, os indivíduos serão vistos em três a quatro meses para expor seus implantes.

Os indivíduos serão avaliados no início (T0: colocação do implante cirúrgico) e T1 (exposição do implante em 3-4 meses). Os registros clínicos serão determinados por um único examinador calibrado usando uma sonda periodontal manual (Hu-Friedy XP-23/QW, Hu-Friedy, Chicago, IL, EUA) com um endo-stop acoplado e todas as medições serão digitalizadas usando um paquímetro eletrônico. Um paquímetro metálico personalizado medirá a espessura do osso nas faces vestibular/lingual do implante. Em T0 e T1, os registros clínicos avaliarão:

1. Espessura da mucosa no topo do rebordo alveolar e 2 e 4 mm apicalmente, nas faces vestibular e lingual do rebordo.
2. Largura da mucosa queratinizada vestibular e lingualmente do local de implantação.
3. Espessura do osso vestibular e lingual a 0, 3 e 6 mm do ombro do implante.
4. Nível do osso marginal vestibular e lingual, em relação ao ombro do implante.

Radiografias digitais padronizadas serão coletadas em T0 e T1 para determinar linearmente as alterações (em mm) na altura do osso alveolar entre o ombro do implante e a crista alveolar usando o software VixWin™ Platinum|Gendex.

Os grupos serão divididos em dois subgrupos com base na espessura da mucosa do local cirúrgico em T0 [mucosa fina (≤2,5 mm) para os Grupos-AI/-BI; mucosa espessa (>2,5mm) para Grupos-AII/-BII] e todos os parâmetros serão determinados e comparados com base na abordagem cirúrgica e espessura da mucosa no local da cirurgia.

Um modelo linear misto para medidas repetidas será usado para análises de dados para determinar mudanças nas dimensões dos tecidos moles e duros peri-implantares, em torno de dois implantes-estágio colocados convencionalmente ou em combinação com o biocomplexo.