Umístění zubního implantátu jako doplněk s autologními mezenchymálními kmenovými buňkami odvozenými z alveolární kostní dřeně (aBM-MSC) (Implant_bone)

Cíle a cíle:

Tato studie popisuje novou metodu konzervace hřebenové kosti u dvoustupňových zubních implantátů pomocí autologních aBMMSC, bez reagencií živočišného původu, vyrobených v čistých prostorách obohacených o autologní fibrinové lepidlo a nasazených do komerčně dostupných kolagenových lešení (kolagenové rouno), které jsou stabilizovány nad platformou implantátu po chirurgickém umístění implantátu.

Primární cíl:

Tato studie si klade za cíl posoudit účinnost nové metody založené na histotechnologii při uchování hřebenové kosti u dvoustupňových zubních implantátů ve srovnání s konvenčním chirurgickým umístěním implantátu podle pokynů výrobce bez doplňkového použití štěpovacích materiálů.

Sekundárně budou také stanoveny změny v periimplantátových měkkých tkáních mezi umístěním implantátu a expozicí a budou porovnány mezi experimentálním a konvenčním chirurgickým přístupem.

Studovat design:

Biopsie budou získány z alveolární kostní dřeně alveolární kosti v lokální anestezii u každého pacienta patřícího do experimentální skupiny (skupina-A). Stručně řečeno, po důkladném ústním výplachu chlorhexidinem 0,12 % po dobu 1 minuty se provede osteotomie pomocí trepanového vrtáku v alveolární kosti intraorálního bezzubého místa jiného než místo implantátu a kostního jádra o velikosti 2x8 mm nebo přibližně 3 cm3. sklizeno. Oblast a biopsie budou hojně propláchnuty fyziologickým roztokem a poté budou sešity chlopně, aby se dosáhlo primárního uzavření v místě dárce. Vzorek kosti bude poté okamžitě umístěn do sterilních zkumavek a bude přepraven do Biohellenika, Thessaloniki, Řecko (http://www.biohellenika.gr) k izolaci a expanzi kmenových buněk podle přísného protokolu expanze klinického stupně (Bakopoulou et al. 2013; Bakopoulou et al. v přípravě). Vzhledem k tomu, že MSC budou izolovány a expandovány in vitro v čistých prostorách vyhovujících správné laboratorní praxi (GLP) (zařízení Biohellenika), které splňují pokyny pro kvalitu stanovené Evropskou unií, a během experimentů pro autologní transplantaci nebudou použita žádná činidla získaná ze zvířat, buňky jsou považovány za bezpečné pro aplikace lidské klinické buněčné terapie. V zařízeních Biohellenika bude každému subjektu ve skupině A krátce po odběru biopsie odebráno 40 ml žilní krve, aby bylo autologní sérum použito k izolaci a kultivaci autologních kmenových buněk. Kromě toho bude k nanesení BM-MSC na komerčně dostupné kolagenové rouno použito autologní fibrinové lepidlo. V den chirurgického umístění implantátů a křesla bude štěpovací materiál (BM-MSC obohacený o fibrinové lepidlo) dodán v inzulínové stříkačce obsahující 10x10E6 buněk/200μl fibrinu a bude jemně naložen na kolagenové rouno a aktivován pomocí přidání CaCl2. Následně bude biokomplex přišit na lingvální lalok pomocí bioresorbovatelných stehů (5-0 Coated VicrylTM (polyglactin 910), reverzní řezání 3/8 kruh - 16mm, Ethicon, Johnson & Johnson, New Brunswick, NJ, USA) a bude tak jemně stabilizován nad hlavicí platformy implantátu částečně pokrývající bukální kost. Manipulace s lešením bude provedena opatrně, aby nedošlo k poškození životaschopných buněk.

V kontrolní skupině (skupina-B) budou implantáty umístěny krestálně podle pokynů výrobce bez dodatečného použití štěpovacích materiálů. V průběhu studie bude v obou skupinách konzistentně používán jeden systém implantátů (Osseotite, Certain, paralelní stěna, Biomet 3i, Palm Beach Gardens, USA).

Pooperační péče Pooperační bolest bude zmírněna pomocí Ibuprofenu (600 mg) na konci chirurgického zákroku a o 12 hodin později v případě bolesti. Amoxicilin (500 mg / 8 hodin po dobu 5 dnů) bude předepsán oběma skupinám. Všichni pacienti budou poučeni, aby používali 0,12 % chlorhexidinu dvakrát denně a po dobu dvou týdnů se vyvarovali tvrdého kartáčování a žvýkání v ošetřované oblasti. Během tohoto 2týdenního období budou pacienti každý týden sledováni, aby se zaznamenalo bezproblémové hojení, a poté pacienti přestanou vyplachovat roztokem chlorhexidinu a obnoví ústní hygienu. Poté budou subjekty po třech až čtyřech měsících pozorovány, aby jim byly vystaveny implantáty.

Subjekty budou hodnoceny na začátku (TO: umístění chirurgického implantátu) a T1 (expozice implantátu ve 3-4 měsících). Klinické záznamy určí jeden kalibrovaný vyšetřující lékař pomocí ruční periodontální sondy (Hu-Friedy XP-23/QW, Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) s nasazenou endostopou a všechna měření budou digitalizována pomocí elektronické posuvné měřítko. Přizpůsobené kovové posuvné měřítko změří tloušťku kosti v bukálních/lingválních aspektech implantátu. V T0 a T1 klinické záznamy vyhodnotí:

1. Tloušťka sliznice v horní části alveolárního hřebene a 2- a 4 mm apikálně, na bukální a lingvální stránce hřebene.
2. Šířka keratinizované sliznice bukálně a lingválně od místa implantace.
3. Tloušťka bukální a lingvální kosti ve vzdálenosti 0, 3 a 6 mm od ramene implantátu.
4. Úroveň bukální a lingvální marginální kosti ve vztahu k ramenu implantátu.

Standardizované digitální rentgenové snímky budou shromažďovány v T0 a T1 pro lineární stanovení změn (v mm) ve výšce alveolární kosti mezi ramenem implantátu a alveolárním hřebenem pomocí softwaru VixWin™ Platinum|Gendex.

Skupiny budou dále rozděleny do dvou podskupin na základě tloušťky sliznice v místě chirurgického zákroku v T0 [tenká sliznice (≤2,5 mm) pro skupiny-AI/-BI; tlustá sliznice (>2,5 mm) pro skupiny-AII/-BII] a všechny parametry budou stanoveny a porovnány na základě operačního přístupu a tloušťky sliznice v místě operace.

Lineární smíšený model pro opakovaná měření bude použit pro analýzy dat ke stanovení změn v rozměrech periimplantátových měkkých a tvrdých tkání kolem dvou stádií implantátů umístěných buď konvenčně, nebo v kombinaci s biokomplexem.