Posizionamento di impianti dentali in aggiunta a cellule staminali mesenchimali derivate da midollo osseo alveolare autologo (aBM-MSC) (Implant_bone)

Scopi e obiettivi:

Il presente studio descrive un nuovo metodo per preservare l'osso crestale in impianti dentali a due stadi utilizzando aBMMSC autologhi, privi di reagenti di origine animale, prodotti in camere bianche arricchiti con colla di fibrina autologa e seminati in scaffold di collagene disponibili in commercio (vello di collagene) che sono stabilizzati sulla piattaforma dell'impianto dopo il posizionamento chirurgico dell'impianto.

Obiettivo primario:

Questo studio mira a valutare l'efficacia di un nuovo metodo basato sull'istotecnologia nella conservazione dell'osso crestale negli impianti dentali a due stadi, rispetto al posizionamento chirurgico convenzionale dell'impianto seguendo le linee guida del produttore senza l'uso aggiuntivo di materiali di innesto.

In secondo luogo, saranno determinate anche le modifiche nei tessuti molli perimplantari tra il posizionamento dell'impianto e l'esposizione e saranno confrontate tra gli approcci terapeutici sperimentali e quelli chirurgici convenzionali.

Disegno dello studio:

Le biopsie saranno prelevate dal midollo osseo alveolare dell'osso alveolare in anestesia locale in ogni paziente appartenente al Gruppo Sperimentale (Gruppo-A). In breve, dopo un accurato risciacquo orale con clorexidina 0,12% per 1 minuto, verrà eseguita un'osteotomia utilizzando una fresa trephine nell'osso alveolare di un sito edentulo intraorale diverso dal sito implantare e verrà prelevato un nucleo osseo di 2x8 mm o 3 cc circa. raccolto. L'area e la biopsia saranno abbondantemente irrigate con soluzione fisiologica e quindi i lembi verranno suturati per ottenere la chiusura primaria nel sito donatore. Il campione osseo verrà quindi immediatamente inserito in provette sterili e sarà trasportato a Biohellenika, Salonicco, Grecia (http://www.biohellenika.gr) per l'isolamento e l'espansione delle cellule staminali secondo un rigoroso protocollo di espansione di grado clinico (Bakopoulou et al. . 2013; Bakopoulou et al. in preparazione). Poiché le MSC saranno isolate ed espanse in vitro in camere bianche conformi alle buone pratiche di laboratorio (BPL) (strutture Biohellenika) che soddisfano le linee guida di qualità stabilite dall'Unione Europea e non verranno utilizzati reagenti di origine animale durante gli esperimenti per il trapianto autologo, le cellule sono considerati sicuri per le applicazioni di terapia cellulare clinica umana. Nelle strutture Biohellenika, verranno raccolti 40 ml di sangue venoso da ciascun soggetto del gruppo A poco dopo il prelievo della biopsia, in modo che il siero autologo venga utilizzato per l'isolamento e l'espansione della coltura delle cellule staminali autologhe. Inoltre, la colla di fibrina autologa verrà utilizzata per caricare le BM-MSC su un tessuto di collagene disponibile in commercio. Il giorno del posizionamento chirurgico degli impianti e alla poltrona, il materiale di innesto (BM-MSC arricchito con colla di fibrina) verrà consegnato in una siringa da insulina contenente 10x10E6 cellule/200μl di fibrina e verrà caricato delicatamente sul vello di collagene e attivato con l'aggiunta di CaCl2. Successivamente, il biocomplesso verrà suturato sul lembo linguale mediante suture bioriassorbibili (5-0 Coated VicrylTM (polyglactin 910), reverse cutting 3/8 circle - 16mm, Ethicon, Johnson & Johnson, New Brunswick, NJ, USA) e sarà così delicatamente stabilizzato sopra la testa della piattaforma dell'impianto coprendo parzialmente l'osso buccale. La manipolazione dell'impalcatura sarà eseguita con cura per evitare di danneggiare le cellule vitali.

Nel gruppo di controllo (Gruppo B), gli impianti verranno posizionati crestale seguendo le linee guida del produttore senza l'uso aggiuntivo di materiali di innesto. Un sistema di impianti sarà costantemente utilizzato durante lo studio in entrambi i gruppi (Osseotite, Certain, parete parallela, Biomet 3i, Palm Beach Gardens, USA).

Cure postoperatorie Il dolore postoperatorio sarà controllato con ibuprofene (600 mg) alla fine della procedura chirurgica e 12 ore dopo in caso di dolore. Amoxicillina (500mg/8 ore per 5 giorni) sarà prescritta ad entrambi i Gruppi. Tutti i pazienti verranno istruiti a utilizzare la clorexidina allo 0,12% due volte al giorno ed evitare di spazzolare e masticare con forza nell'area trattata per due settimane. Durante questo periodo di 2 settimane, i pazienti saranno seguiti su base settimanale per registrare la guarigione senza incidenti, dopodiché i pazienti interromperanno il risciacquo con soluzione di clorexidina e riprenderanno l'igiene orale. Successivamente, i soggetti saranno visti a tre o quattro mesi per esporre i loro impianti.

I soggetti saranno valutati al basale (T0: posizionamento chirurgico dell'impianto) e T1 (esposizione dell'impianto a 3-4 mesi). Le registrazioni cliniche saranno determinate da un singolo esaminatore calibrato utilizzando una sonda parodontale manuale (Hu-Friedy XP-23/QW, Hu-Friedy, Chicago, IL, USA) con un endo-stop attaccato su di essa e tutte le misurazioni saranno digitalizzate utilizzando un calibro elettronico. Un calibro metallico personalizzato misurerà lo spessore dell'osso sugli aspetti buccali/linguali dell'impianto. A T0 e T1, le registrazioni cliniche valuteranno:

1. Spessore della mucosa nella parte superiore della cresta alveolare e 2 e 4 mm apicalmente, sugli aspetti buccali e linguali della cresta.
2. Larghezza della mucosa cheratinizzata vestibolarmente e lingualmente rispetto al sito implantare.
3. Spessore dell'osso vestibolare e linguale a 0, 3 e 6 mm dalla spalla dell'impianto.
4. Livello dell'osso marginale vestibolare e linguale, rispetto alla spalla dell'impianto.

Verranno raccolte radiografie digitali standardizzate a T0 e T1 per determinare linearmente i cambiamenti (in mm) nell'altezza dell'osso alveolare tra la spalla dell'impianto e la cresta alveolare utilizzando il software VixWin™ Platinum|Gendex.

I gruppi saranno ulteriormente divisi in due sottogruppi in base allo spessore della mucosa del sito chirurgico a T0 [mucosa sottile (≤2,5 mm) per i gruppi-AI/-BI; mucosa spessa (> 2,5 mm) per i gruppi-AII/-BII] e tutti i parametri saranno determinati e confrontati sulla base dell'approccio chirurgico e dello spessore della mucosa nel sito chirurgico.

Un modello misto lineare per misure ripetute sarà utilizzato per l'analisi dei dati per determinare i cambiamenti nelle dimensioni dei tessuti molli e duri perimplantari, intorno a due stadi-impianti posizionati convenzionalmente o in combinazione con il biocomplesso.