Terapia com células-tronco e ativação in vitro do fator de crescimento ovariano (SEGOVA)

O presente estudo busca demonstrar como o programa integrativo de rejuvenescimento ovariano denominado SEGOVA influencia na restauração da estabilidade hormonal e aumento do número de folículos em pacientes com falência ovariana. O recrutamento de pacientes e a coleta de dados seriam realizados em três locais: The Special Hospital Jevremova Belgrado, Saint James Hospital Malta e Remedica Skopje Hospital, Macedônia. 50-100 mulheres inférteis com insuficiência ovariana serão incluídas no período entre julho de 2019 e dezembro de 2021. Os pacientes seriam codificados ao entrar no programa e todas as informações pessoais seriam protegidas. As informações sobre o tratamento médico e os antecedentes serão mantidas em formulários de relatório de caso em papel e eletrônico. O resultado do procedimento será mantido no banco de dados da pesquisa com o cegamento do médico clínico que realizará o acompanhamento pós-procedimento desses pacientes. Em caso de complicação, possivelmente relacionada ao tratamento, o caso será revelado.

No primeiro dia do procedimento, o plasma rico em plaquetas (PRP) autólogo é obtido a partir de 100-120 mL de sangue total. Após separação obtém-se 4 mL de PRP. A concentração de plaquetas é otimizada na linha de base 6-8x e na linha de base de leucócitos 2-3x. Já que a ativação de PRP autólogo trombina usa-se na proporção 1:10.

No mesmo dia, a ressecção laparoscópica cortical do ovário é realizada na técnica padrão. A amostra do córtex ovariano é picada em uma placa de Petri. O volume de PRP ativado (4 mL) é misturado com fragmentos ovarianos e incubado pelas próximas 48 horas a 37 ℃ e 5% de CO2. Após 48h, a amostra de medula óssea da tíbia sob anestesia geral é realizada para obter a medula óssea. Após centrifugação obtém-se o Concentrado de Aspirado de Medula Óssea (BMAC) com células nucleadas (3 +/- 1,5 mL).

Finalmente, após 48h da incubação do tecido do córtex ovariano, o tecido fragmentado do ovário com 4 mL de PRP será injetado juntamente com 3 +/- 1,5 mL de BMAC na região subcortical de ambos os ovários como injeção guiada por ultra-som transvaginal.

Após o procedimento, durante um ano de acompanhamento, seriam medidos os níveis hormonais de hormônio folículo estimulante (FSH), hormônio luteinizante (LH), estradiol (E2), progesterona (PG) e hormônio antimulleriano (AMH) e o número de folículos seriam monitorados para fornecer informações sobre a função ovariana. Para investigar as mudanças nos níveis hormonais, as comparações dos níveis detectados antes da intervenção e 3, 6 e 12 meses pós-intervenção seriam realizadas usando o teste de classificação de Wilcoxon. Estatísticas descritivas serão fornecidas para cada variável como número médio ou mediano, frequência, porcentagem, tabela ou gráfico.

Em pacientes com oócitos recuperados após o procedimento SEGOVA, o protocolo padrão de Fertilização In Vitro será realizado e as taxas de fertilização, clivagem e gravidez clínica serão monitoradas.