Terapia komórkami macierzystymi i aktywacja czynnika wzrostu jajnika in vitro (SEGOVA)

Celem niniejszej pracy jest wykazanie, w jaki sposób integracyjny program odmładzania jajników o nazwie SEGOVA wpływa na przywrócenie stabilności hormonalnej i zwiększenie liczby pęcherzyków jajnikowych u pacjentek z niewydolnością jajników. Rekrutacja pacjentów i gromadzenie danych odbywałyby się w trzech ośrodkach: Szpitalu Specjalnym Jevremova Belgrad, Szpitalu św. Jakuba na Malcie i Szpitalu Remedica Skopje w Macedonii. 50-100 niepłodnych kobiet z niewydolnością jajników zostanie uwzględnionych w okresie od lipca 2019 r. do grudnia 2021 r. Pacjenci byliby kodowani przy wejściu do programu, a wszystkie dane osobowe byłyby chronione. Informacje o leczeniu i tle medycznym będą przechowywane zarówno na papierowych, jak i elektronicznych formularzach opisów przypadków. Wynik zabiegu zostanie zachowany w bazie danych badań z zaślepieniem lekarza klinicznego, który będzie prowadził obserwację po zabiegu tych pacjentów. W przypadku wystąpienia komplikacji, prawdopodobnie związanych z leczeniem, przypadek zostanie odślepiony.

Pierwszego dnia zabiegu autologiczne osocze bogatopłytkowe (PRP) uzyskuje się z 100-120 ml krwi pełnej. Po rozdzieleniu otrzymuje się 4 ml PRP. Stężenie płytek krwi jest zoptymalizowane przy 6-8x linii podstawowej i 2-3x linii podstawowej leukocytów. Do aktywacji PRP stosuje się autologiczną trombinę w stosunku 1:10.

W tym samym dniu wykonywana jest laparoskopowa korowa resekcja jajnika w standardowej technice. Próbkę kory jajnika rozdrabnia się na płytce Petriego. Objętość aktywowanego PRP (4 ml) miesza się z fragmentami jajników i inkubuje przez następne 48 godzin w temperaturze 37°C i 5% CO2. Po 48h pobiera się szpik kostny z kości piszczelowej w znieczuleniu ogólnym w celu uzyskania szpiku kostnego. Po odwirowaniu otrzymuje się koncentrat aspiratu szpiku kostnego (BMAC) z komórkami jądrzastymi (3 +/- 1,5 ml).

Na koniec, po upływie 48 godzin od inkubacji tkanki kory jajnika, rozdrobniona tkanka jajnika z 4 ml PRP zostanie wstrzyknięta wraz z 3 +/- 1,5 ml BMAC w obszar podkorowy obu jajników jako iniekcja przezpochwowa pod kontrolą USG.

Po zabiegu, podczas rocznej obserwacji, mierzone byłyby poziomy hormonu folikulotropowego (FSH), hormonu luteinizującego (LH), estradiolu (E2), progesteronu (PG) i hormonu antymullerowskiego (AMH) oraz liczba pęcherzyków byłyby monitorowane w celu uzyskania wglądu w czynność jajników. W celu zbadania zmian w poziomach hormonów, porównania poziomów wykrytych przed interwencją oraz 3, 6 i 12 miesięcy po interwencji zostałyby przeprowadzone przy użyciu testu rang Wilcoxona. Statystyki opisowe zostaną dostarczone dla każdej zmiennej jako średnia lub mediana, częstość, procent, tabela lub wykres.

U pacjentek z komórkami jajowymi pobranymi po zabiegu SEGOVA zostanie wykonany standardowy protokół zapłodnienia in vitro, a zapłodnienia, rozszczepienia i kliniczne wskaźniki ciąż będą monitorowane.