Terapie kmenovými buňkami a aktivace ovariálního růstového faktoru in vitro (SEGOVA)

Současná studie se snaží prokázat, jak program integrativního omlazení vaječníků zvaný SEGOVA ovlivňuje obnovu hormonální stability a zvýšení počtu folikulů u pacientek se selháním vaječníků. Nábor pacientů a sběr dat by se prováděl na třech místech: Zvláštní nemocnice Jevremova Bělehrad, nemocnice Saint James na Maltě a nemocnice Remedica Skopje v Makedonii. V období od července 2019 do prosince 2021 bude zahrnuto 50–100 neplodných žen se selháním vaječníků. Pacienti by byli při vstupu do programu kódováni a všechny osobní údaje by byly chráněny. Informace o lékařském ošetření a pozadí budou uchovávány na papírových i elektronických formulářích kazuistiky. Výsledek postupu bude uchováván ve výzkumné databázi se zaslepením klinického lékaře, který bude u těchto pacientů provádět následné sledování. V případě komplikace, možná související s léčbou, bude případ odslepen.

První den procedury se ze 100-120 ml plné krve získá autologní plazma bohatá na krevní destičky (PRP). Po separaci se získají 4 ml PRP. Koncentrace krevních destiček je optimalizována na 6-8násobek výchozí hodnoty a 2-3násobek výchozí hodnoty leukocytů. K aktivaci PRP se používá autologní trombin v poměru 1:10.

Ve stejný den je standardní technikou provedena laparoskopická kortikální resekce ovaria. Vzorek ovariální kůry se rozemele v Petriho misce. Objem aktivovaného PRP (4 ml) se smíchá s ovariálními fragmenty a inkubuje se dalších 48 hodin při 37 °C a 5 % CO2. Po 48 hodinách se provede odběr kostní dřeně z tibie v celkové anestezii k získání kostní dřeně. Po odstředění se získá koncentrát aspirátu kostní dřeně (BMAC) s jadernými buňkami (3 +/- 1,5 ml).

Nakonec, po uplynutí 48 hodin od inkubace tkáně kůry vaječníků, bude fragmentovaná tkáň vaječníku se 4 ml PRP injikována spolu s 3 +/- 1,5 ml BMAC do subkortikální oblasti obou vaječníků jako transvaginální ultrazvuková injekce.

Po zákroku, během jednoho roku sledování, budou měřeny hormonální hladiny folikuly stimulujícího hormonu (FSH), luteinizačního hormonu (LH), estradiolu (E2), progesteronu (PG) a antimulleriánského hormonu (AMH) a počty folikulů by byly monitorovány, aby poskytly přehled o funkci vaječníků. Ke zkoumání změn hladin hormonů by bylo provedeno srovnání hladin detekovaných před intervencí a 3, 6 a 12 měsíců po intervenci pomocí Wilcoxonova rank testu. Pro každou proměnnou bude poskytnuta popisná statistika jako střední nebo střední číslo, četnost, procento, tabulka nebo graf.

U pacientek s oocyty získanými po proceduře SEGOVA bude proveden standardní protokol o oplodnění in vitro a bude sledována míra oplodnění, štěpení a klinického těhotenství.