Terapia con cellule staminali e attivazione in vitro del fattore di crescita ovarico (SEGOVA)

L'attuale studio cerca di dimostrare come il programma integrativo di ringiovanimento ovarico chiamato SEGOVA influenzi il ripristino della stabilità ormonale e l'aumento del numero di follicoli nelle pazienti con insufficienza ovarica. Il reclutamento dei pazienti e la raccolta dei dati verrebbero eseguiti in tre siti: l'ospedale speciale Jevremova di Belgrado, il Saint James Hospital di Malta e l'ospedale Remedica di Skopje, in Macedonia. Un 50-100 di donne infertili con insufficienza ovarica saranno incluse nel periodo compreso tra luglio 2019 e dicembre 2021. I pazienti verrebbero codificati quando entrano nel programma e tutte le informazioni personali sarebbero protette. Le informazioni sul trattamento medico e sul background saranno conservate su entrambi i moduli cartacei ed elettronici per la segnalazione dei casi. Il risultato della procedura sarà mantenuto nel database di ricerca con accecamento al medico clinico che eseguirà il follow-up post procedura di quei pazienti. In caso di complicanze, possibilmente correlate al trattamento, il caso verrà aperto.

Il primo giorno della procedura, il plasma autologo ricco di piastrine (PRP) viene ottenuto da 100-120 mL di sangue intero. Dopo la separazione si ottengono 4 mL di PRP. La concentrazione delle piastrine è ottimizzata su 6-8 volte al basale e 2-3 volte al basale dei leucociti. Per l'attivazione del PRP si utilizza la trombina autologa in rapporto 1:10.

Nello stesso giorno viene eseguita la resezione corticale laparoscopica dell'ovaio con tecnica standard. Il campione di corteccia ovarica viene macinato in una capsula di Petri. Il volume di PRP attivato (4 mL) viene miscelato con frammenti ovarici e incubato per le successive 48 ore a 37 ℃ e 5% CO2. Dopo 48 ore, viene eseguito il prelievo di midollo osseo dalla tibia in anestesia generale per ottenere il midollo osseo. Dopo centrifugazione si ottiene il Bone Marrow Aspirate Concentrate (BMAC) con cellule nucleate (3 +/- 1,5 mL).

Infine, dopo 48 ore dall'incubazione del tessuto della corteccia ovarica, tessuto frammentato dell'ovaio con 4 mL di PRP sarà iniettato insieme a 3 +/- 1,5 mL di BMAC nella regione sottocorticale di entrambe le ovaie come iniezione transvaginale ecoguidata.

Dopo la procedura, durante un anno di follow-up, sarebbero stati misurati i livelli ormonali dell'ormone follicolo-stimolante (FSH), dell'ormone luteinizzante (LH), dell'estradiolo (E2), del progesterone (PG) e dell'ormone antimulleriano (AMH) e il numero dei follicoli sarebbe monitorato per fornire informazioni sulla funzione ovarica. Per indagare sui cambiamenti nei livelli ormonali, i confronti dei livelli rilevati prima dell'intervento e 3, 6 e 12 mesi dopo l'intervento, verrebbero eseguiti utilizzando il test di rango di Wilcoxon. Verranno fornite statistiche descrittive per ogni variabile come numero medio o mediano, frequenza, percentuale, tabella o grafico.

Nei pazienti con ovociti recuperati dopo la procedura SEGOVA, verrà eseguito il protocollo standard di fecondazione in vitro e verranno monitorati i tassi di fecondazione, scissione e gravidanza clinica.