Thérapie par cellules souches et activation du facteur de croissance ovarienne in vitro (SEGOVA)

La présente étude vise à démontrer comment le programme de rajeunissement ovarien intégratif appelé SEGOVA influence la restauration de la stabilité hormonale et l'augmentation du nombre de follicules chez les patientes souffrant d'insuffisance ovarienne. Le recrutement des patients et la collecte des données seraient effectués sur trois sites : l'hôpital spécial Jevremova de Belgrade, l'hôpital Saint James de Malte et l'hôpital Remedica de Skopje, en Macédoine. 50 à 100 femmes infertiles souffrant d'insuffisance ovarienne seront incluses dans la période entre juillet 2019 et décembre 2021. Les patients seraient codés lors de leur entrée dans le programme et toutes les informations personnelles seraient protégées. Les informations sur le traitement médical et les antécédents seront conservées sur des formulaires papier et électroniques. Le résultat de la procédure sera conservé dans la base de données de recherche en aveugle pour le médecin clinicien qui effectuera le suivi post-opératoire de ces patients. En cas de complication, éventuellement liée au traitement, le cas sera levé en aveugle.

Le premier jour de la procédure, du plasma autologue riche en plaquettes (PRP) est obtenu à partir de 100 à 120 ml de sang total. Après séparation 4 mL de PRP sont obtenus. La concentration de plaquettes est optimisée sur une ligne de base 6-8x et une ligne de base 2-3x leucocytes. Pour l'activation du PRP, la thrombine autologue est utilisée dans un rapport de 1:10.

Le même jour, la résection corticale laparoscopique de l'ovaire est réalisée selon la technique standard. L'échantillon de cortex ovarien est haché dans une boîte de Pétri. Le volume de PRP activé (4 ml) est mélangé avec des fragments ovariens et incubé pendant les 48 heures suivantes à 37 ℃ et 5% de CO2. Après 48h, le prélèvement de moelle osseuse du tibia sous anesthésie générale est réalisé pour obtenir de la moelle osseuse. Après centrifugation, le Bone Marrow Aspirate Concentrate (BMAC) avec des cellules nucléées est obtenu (3 +/- 1,5 mL).

Enfin, une fois les 48 heures écoulées depuis l'incubation du tissu du cortex ovarien, du tissu fragmenté de l'ovaire avec 4 ml de PRP sera injecté avec 3 +/- 1,5 ml de BMAC dans la région sous-corticale des deux ovaires sous forme d'injection transvaginale guidée par ultrasons.

Après la procédure, pendant un an de suivi, les niveaux hormonaux de l'hormone folliculo-stimulante (FSH), de l'hormone lutéinisante (LH), de l'estradiol (E2), de la progestérone (PG) et de l'hormone anti-mullérienne (AMH) seraient mesurés et le nombre de follicules seraient surveillés pour donner un aperçu de la fonction ovarienne. Des statistiques descriptives seront fournies pour chaque variable sous forme de nombre moyen ou médian, de fréquence, de pourcentage, de tableau ou de graphique.

Chez les patientes dont les ovocytes ont été récupérés après la procédure SEGOVA, un protocole standard de fécondation in vitro sera effectué et les taux de fécondation, de clivage et de grossesse clinique seront surveillés.