Terapia con células madre y activación del factor de crecimiento ovárico in vitro (SEGOVA)

El estudio actual busca demostrar cómo el programa de rejuvenecimiento ovárico integrador llamado SEGOVA influye en la restauración de la estabilidad hormonal y el aumento en el número de folículos en pacientes con insuficiencia ovárica. El reclutamiento de pacientes y la recopilación de datos se realizaría en tres sitios: el Hospital Especial Jevremova Belgrado, el Hospital Saint James Malta y el Hospital Remedica Skopje, Macedonia. Se incluirá un 50-100 de mujeres infértiles con insuficiencia ovárica en el período comprendido entre julio de 2019 - diciembre de 2021. Los pacientes serían codificados al ingresar al programa, y ​​toda la información personal estaría protegida. La información sobre el tratamiento médico y los antecedentes se mantendrán en formularios de informes de casos en papel y electrónicos. El resultado del procedimiento se mantendrá en la base de datos de investigación con cegamiento al médico clínico que realizará el seguimiento posterior al procedimiento de esos pacientes. En caso de una complicación, posiblemente relacionada con el tratamiento, se abrirá el caso.

El primer día del procedimiento, se obtiene plasma rico en plaquetas (PRP) autólogo a partir de 100-120 ml de sangre entera. Tras la separación se obtienen 4 mL de PRP. La concentración de plaquetas se optimiza en una línea base de 6-8x y una línea base de leucocitos 2-3x. Para la activación de PRP se utiliza trombina autóloga en proporción 1:10.

El mismo día se realiza la resección cortical laparoscópica del ovario en técnica estándar. La muestra de corteza ovárica se tritura en una placa de Petri. El volumen de PRP activado (4 ml) se mezcla con fragmentos de ovario y se incuba durante las siguientes 48 h a 37 ℃ y 5 % de CO2. A las 48h se realiza la toma de muestra de médula ósea de tibia bajo anestesia general para obtener médula ósea. Después de la centrifugación se obtiene el Concentrado de Aspirado de Médula Ósea (BMAC) con células nucleadas (3 +/- 1,5 mL).

Finalmente, pasadas las 48h desde la incubación del tejido de la corteza ovárica, se inyectará tejido fragmentado del ovario con 4 mL de PRP junto con 3 +/- 1,5 mL de BMAC en la región subcortical de ambos ovarios como inyección transvaginal guiada por ecografía.

Después del procedimiento, durante un año de seguimiento, se medirían los niveles hormonales de hormona estimulante del folículo (FSH), hormona luteinizante (LH), estradiol (E2), progesterona (PG) y hormona antimülleriana (AMH) y se mediría el número de folículos. se controlarían para proporcionar información sobre la función ovárica. Para investigar los cambios en los niveles hormonales, se realizarían comparaciones de los niveles detectados antes de la intervención y 3, 6 y 12 meses después de la intervención mediante la prueba de rango de Wilcoxon. Se proporcionarán estadísticas descriptivas para cada variable como número medio o mediano, frecuencia, porcentaje, tabla o gráfico.

En pacientes con ovocitos recuperados después del procedimiento SEGOVA, se realizará el protocolo estándar de Fecundación In Vitro y se controlarán las tasas de fecundación, segmentación y embarazo clínico.