Desenvolvimento de um Modelo de Infecção Humana Controlada para Streptococcus do Grupo B (CHIM_GBS) (TIMING)

A carga global de Streptococcus do Grupo B (GBS) é alta e representa uma necessidade de saúde pública não atendida. GBS é a principal causa de sepse neonatal e meningite na maioria dos países. Em 2015, estimou-se que em todo o mundo havia pelo menos 320.000 bebês com doença invasiva por GBS, 90.000 óbitos infantis e 10.000 casos de crianças com incapacidade relacionada à meningite por GBS1.

A colonização retovaginal materna com GBS é um pré-requisito para a doença de início precoce nos primeiros 6 dias de vida, com transmissão vertical de GBS ocorrendo na época do nascimento2. Estima-se que 20-35% das mulheres grávidas sejam colonizadas com GBS com transmissão vertical ocorrendo em aproximadamente 50% dos casos colonizados3. 1-2% dos neonatos nascidos de mulheres colonizadas por GBS desenvolvem doença invasiva na ausência de profilaxia antibiótica intraparto (IAP)4.

Embora a incidência de doença de início precoce nos EUA tenha diminuído significativamente após a adoção de uma triagem universal baseada em swab e política de IAP, em países que adotam uma estratégia de IAP baseada em risco, como o Reino Unido, são relatados aumentos na carga de doença de início precoce .4. A IAP tem limitações como estratégia para uso em países como Uganda devido ao custo e acesso aos cuidados de saúde, bem como ao risco de desenvolvimento de resistência antimicrobiana.

Dado o início precoce da doença de GBS neonatal e as deficiências das políticas de IAP, uma das melhores abordagens para prevenir a doença de GBS poderia ser o uso de vacinação para prevenir a colonização de mulheres grávidas. O modelo ideal para testar qualquer vacina contra GBS seria um modelo de infecção humana controlada em mulheres não grávidas; no entanto, para desenvolver esse modelo de infecção humana controlada, os pesquisadores precisam entender como a imunidade do hospedeiro afeta a colonização por GBS. Cerca de 25-30% das mulheres não grávidas são colonizadas com GBS a qualquer momento e a colonização pode ser perdida ou adquirida ao longo da vida. Antes de realizar modelos controlados de infecção humana, os pesquisadores precisam entender melhor a correlação entre a colonização e a produção de anticorpos GBS no soro e nas superfícies mucosas e os pesquisadores precisam entender melhor como a colonização muda ao longo do tempo em mulheres saudáveis, não grávidas e dadas as diferenças observadas na doença GBS em países de alta e baixa renda, seria útil realizar essas observações em diferentes localizações geográficas.

FUNDAMENTAÇÃO

Em primeiro lugar, os investigadores precisam determinar os níveis de imunidade local e sistêmica pré-existente em mulheres colonizadas e não colonizadas por GBS que possam ser usados ​​como critérios de inclusão/exclusão em um modelo de infecção humana controlada e, para isso, os investigadores precisam otimizar as técnicas de amostragem.

Em segundo lugar, os investigadores precisam entender as diferenças na imunidade vaginal que podem ser devidas a diferenças genéticas ou geográficas, a fim de demonstrar o potencial de aplicabilidade global de qualquer candidato a vacina em potencial. Essa é a justificativa para conduzir o estudo no Reino Unido e em Uganda. Finalmente, os investigadores precisam esclarecer quem poderia (e seria) voluntário para participar de estudos controlados de modelo de infecção humana para GBS.

QUADRO TEÓRICO

Correlação entre imunoglobulina G soroespecífica vaginal para GBS foi encontrada em mulheres grávidas com menos colonização naquelas mulheres com níveis mais altos de imunoglobulina G sugerindo um nível de imunidade natural5. Não está claro por quanto tempo a imunoglobulina G no sangue permanece alta após a colonização e se isso diminui com o tempo, levando a um aumento da suscetibilidade futura. Há pouca pesquisa publicada sobre como a colonização de GBS muda naturalmente ao longo do tempo e se isso se correlaciona com os níveis de imunoglobulina G de GBS específicos para sorotipos e vaginais.

Para desenvolver um modelo de infecção humana, seria útil saber como a colonização natural varia ao longo do tempo e sua relação com a imunidade natural, de modo que, para futuros estudos de vacinas, os pesquisadores saibam se a não colonização observada é devida à vacina ou à imunidade natural.

Um objetivo secundário é explorar se os modelos de infecção humana de GBS seriam aceitáveis ​​para as mulheres, dada a natureza complexa da colonização de GBS e seu impacto potencial em gestações subsequentes.

Este será um estudo de coorte prospectivo de 100 mulheres (50 colonizadas com GBS na linha de base e 50 não colonizadas com GBS na linha de base) em cada local amostrado ao longo de 12 semanas para avaliar os anticorpos na vagina a cada duas semanas e no sangue a cada 6 semanas. O estudo também incluirá um grupo focal para entender a aceitabilidade dos métodos para o modelo de desafio de infecção humana proposto de GBS.

1. Triagem para GBS As mulheres serão recrutadas para triagem para GBS no Reino Unido e em Uganda (250 em cada local). Na triagem, as mulheres receberão um esfregaço vaginal e retal para avaliar a presença de GBS e também passarão por uma triagem assintomática de infecções sexualmente transmissíveis de acordo com a prática local usual. Tanto no Reino Unido quanto em Uganda, esta triagem procurará clamídia, gonorréia, Trichomonas vaginalis, vaginose bacteriana, Candida e sífilis, HIV e hepatite B e C. Qualquer pessoa que atenda a todos os critérios de inclusão após a triagem será convidada a participar do estudo de amostragem até que as metas de recrutamento sejam alcançadas. Se alguma mulher testar positivo para qualquer uma das infecções, ela será encaminhada a um centro local para tratamento e ainda poderá ser incluída após o término do tratamento para a infecção. Das 250 mulheres rastreadas, os investigadores terão como objetivo recrutar 50 mulheres positivas para GBS e 50 negativas para GBS para participar do estudo de amostragem. O consentimento para realizar a triagem será feito inicialmente com um processo de consentimento adicional para o estudo de amostragem.

   A triagem envolverá três esfregaços vaginais autocolhidos e um esfregaço retal para detecção de GBS e detecção de infecções sexualmente transmissíveis e uma amostra de sangue venoso para HIV, sífilis e hepatite B e C. Um breve histórico médico será conduzido na triagem para excluir mulheres com um histórico de diabetes, dermatoses genitais, neoplasia intra-epitelial cervical ou outra condição que o investigador considere que possa torná-los inadequados para participar do estudo de amostragem. Um teste de gravidez de urina à beira do leito será realizado na triagem. O VIH e as hepatites B e C não são critérios de exclusão, no entanto, esta informação é necessária nas análises, uma vez que existe a possibilidade de as mulheres com VIH em particular não terem a mesma resposta de anticorpos à colonização.

2. Otimização do método de amostragem Se uma mulher atender a todos os critérios de inclusão e nenhum critério de exclusão na triagem e estiver disposta a participar do estudo de otimização do método de amostragem, ela será consentida novamente para o estudo posterior, incluindo consentimento para participação em um grupo focal em o final do estudo. O consentimento para participar do grupo focal será opcional.

   O estudo de amostragem durará 12 semanas e as amostras serão coletadas da seguinte forma:

   1. Uma zaragatoa vaginal baixa autocolheita utilizando zaragatoas na inscrição e depois dois intervalos semanais (dia 0, dia 14, dia 28, dia 42, dia 56, dia 70 e dia 84) para portadores de GBS.
   2. Um swab retal autocolhido no recrutamento e depois em dois intervalos semanais (Dia 0, dia 14, dia 28, dia 42, dia 56, dia 70 e dia 84.) que será testado para a presença de GBS.
   3. Fluido do copo menstrual no recrutamento e depois em dois intervalos semanais (dia 0, dia 14, dia 28, dia 42, dia 56, dia 70 e dia 84) que é testado para anticorpo de imunoglobulina G (total e específico de GBS).
   4. Amostra de soro no dia 0 e no dia 42 e dia 84 para detecção de Imunoglobulina G (total e específico para GBS) - 10 mls de sangue serão coletados usando agulha estéril e seringa em tubos separadores de soro.
   5. Testes de gravidez de urina serão realizados no dia 0, dia 42 e dia 84 para garantir que não haja gravidez durante o estudo.

   As mulheres podem optar por coletar amostras com esfregaços retovaginais e copos menstruais em casa ou na visita do estudo. Exames de sangue e testes de gravidez de urina sempre serão realizados pela equipe do estudo.

3. Grupos focais No Reino Unido, o investigador recrutará até 20 mulheres do estudo de amostragem para participar de grupos focais sobre suas experiências com métodos de auto-amostragem e a aceitabilidade de modelos controlados de infecção humana. O consentimento para participar das discussões do grupo focal será incluído como parte do consentimento para participar do estudo de amostragem, mas será opcional. As mulheres podem optar por não participar dos grupos focais a qualquer momento, mas permanecer no estudo de amostragem se assim o desejarem.

Em Uganda, os pesquisadores recrutarão mais amplamente para nossos grupos focais, incluindo a representação de parteiras e parceiros dos participantes e líderes comunitários. Os investigadores entrarão em contato diretamente com os potenciais participantes do grupo focal. Grupos focais serão conduzidos sobre a aceitabilidade de modelos controlados de infecção humana. Os investigadores também explorarão questões potenciais em torno da vacinação materna e visões tradicionais e contemporâneas sobre coleta de esfregaços vaginais e amostras de sangue. Dos grupos focais de Uganda, o investigador pedirá a 30 voluntários (10 homens e/ou líderes comunitários, 10 mulheres e 10 parteiras) para participar de mais três grupos de discussão para explorar visões mais aprofundadas sobre a segurança e aceitabilidade de esfregaços vaginais e menstruais. copos, possível hesitação em consentir a coleta de amostras e possíveis barreiras para ingressar no estudo.

Os resultados dos grupos focais serão usados ​​para informar os folhetos informativos do paciente e o protocolo de amostragem para o desenho de um estudo modelo de infecção humana controlada.