Hallitun ihmisen infektiomallin kehittäminen ryhmän B streptokokille (CHIM_GBS) (TIMING)

B-ryhmän streptokokkien (GBS) maailmanlaajuinen taakka on korkea ja edustaa täyttämätöntä kansanterveyden tarvetta. GBS on johtava vastasyntyneiden sepsiksen ja aivokalvontulehduksen aiheuttaja useimmissa maissa. Vuonna 2015 arvioitiin, että maailmanlaajuisesti ainakin 320 000 pikkulapsella oli invasiivinen GBS-tauti, 90 000 vauvakuolemaa ja 10 000 GBS-aivokalvontulehdukseen liittyvää vammaista lasta1.

Äidin peräaukon kolonisaatio GBS:llä on edellytys taudin varhaiselle alkamiselle kuuden ensimmäisen elinpäivän aikana, ja vertikaalinen GBS-siirto tapahtuu syntymän tienoilla2. Arviolta 20–35 % raskaana olevista naisista on kolonisoitunut GBS:n kanssa, ja vertikaalista leviämistä esiintyy noin 50 %:ssa kolonisoiduista tapauksista3. 1–2 % GBS-kolonisoiduille naisille syntyneistä vastasyntyneistä kehittää invasiivisen taudin ilman synnytyksensisäistä antibioottiprofylaksia (IAP)4.

Vaikka varhaisvaiheen sairauksien ilmaantuvuus Yhdysvalloissa on vähentynyt merkittävästi yleisen vanupuikkopohjaisen seulonnan ja IAP-politiikan käyttöönoton jälkeen, riskipohjaista IAP-strategiaa omaksuvissa maissa, kuten Yhdistyneessä kuningaskunnassa, varhaisen taudin aiheuttaman taakan on raportoitu lisääntyneen. .4. IAP:lla on rajoituksia käytettäväksi strategiana Ugandan kaltaisissa maissa kustannusten ja terveydenhuollon saatavuuden sekä mikrobilääkeresistenssin kehittymisen riskin vuoksi.

Kun otetaan huomioon vastasyntyneen GBS-taudin varhainen puhkeaminen ja IAP-politiikan puutteet, yksi parhaista tavoista estää GBS-tauti voisi olla rokotusten käyttö raskaana olevien naisten kolonisaatioiden estämiseksi. Ihanteellinen malli minkä tahansa GBS-rokotteen testaamiseen olisi kontrolloitu ihmisen infektiomalli ei-raskaana olevilla naisilla, mutta tämän kontrolloidun ihmisen infektiomallin kehittämiseksi tutkijoiden on ymmärrettävä, kuinka isännän immuniteetti vaikuttaa GBS-kolonisaatioon. Noin 25–30 % ei-raskaana olevista naisista saa GBS-pesäkkeen milloin tahansa, ja kolonisaatio voi kadota tai lisääntyä eliniän aikana. Ennen kuin suorittavat kontrolloituja ihmisen infektiomalleja, tutkijoiden on edelleen ymmärrettävä korrelaatio kolonisaation ja GBS-vasta-ainetuotannon välillä seerumissa ja limakalvojen pinnoilla, ja tutkijoiden on ymmärrettävä paremmin, kuinka kolonisaatio muuttuu ajan myötä terveillä, ei-raskaana olevilla naisilla ja havaitut erot huomioon ottaen. GBS-taudissa korkean ja matalan tulotason maissa olisi hyödyllistä tehdä nämä havainnot eri maantieteellisissä paikoissa.

PERUSTELUT

Ensinnäkin tutkijoiden on määritettävä olemassa olevan paikallisen ja systeemisen immuniteetin tasot GBS-kolonisoiduilla ja kolonisoimattomilla naisilla, joita voitaisiin käyttää sisällyttämis-/poissulkemiskriteereinä kontrolloidussa ihmisen infektiomallissa, ja tämän saavuttamiseksi tutkijoiden on optimoitava näytteenottotekniikat.

Toiseksi tutkijoiden on ymmärrettävä erot emättimen immuniteetissa, jotka voivat johtua geneettisistä tai maantieteellisistä eroista, jotta voidaan osoittaa minkä tahansa mahdollisen rokoteehdokkaan globaali sovellettavuus. Tämä on syy tutkimuksen suorittamiselle Isossa-Britanniassa ja Ugandassa. Lopuksi tutkijoiden on selvennettävä, kuka voisi (ja haluaisi) todennäköisesti vapaaehtoisesti osallistua kontrolloituihin ihmisen infektiomallitutkimuksiin GBS:n osalta.

TEOREETTINEN VIITEKEHYS

Emättimen serospesifisen immunoglobuliini G:n ja GBS:n välinen korrelaatio on havaittu raskaana olevilla naisilla, joilla on vähemmän kolonisaatiota naisilla, joilla on korkeampi immunoglobuliini G:n taso, mikä viittaa luonnolliseen immuniteetin tasoon5. On epäselvää, kuinka kauan immunoglobuliini G pysyy korkeana veressä kolonisaation jälkeen ja väheneekö tämä ajan myötä, mikä lisää herkkyyttä tulevaisuudessa. On vain vähän julkaistua tutkimusta siitä, kuinka GBS-kolonisaatio luonnollisesti muuttuu ajan myötä ja korreloiko tämä emättimen ja seerumin serotyyppispesifisten GBS-immunoglobuliini G -tasojen kanssa.

Ihmisen infektiomallin kehittämiseksi olisi hyödyllistä tietää, miten luonnollinen kolonisaatio vaihtelee ajan myötä ja sen suhde luonnolliseen immuniteettiin, jotta tulevia rokotetutkimuksia varten tutkijat tietäisivät, johtuuko havaittu ei-kolonisaatio rokotteesta vai luonnollisesta immuniteetista.

Toissijaisena tavoitteena on tutkia, olisivatko ihmisen GBS-infektiomallit hyväksyttäviä naisille, kun otetaan huomioon GBS-kolonisaation monimutkainen luonne ja sen mahdollinen vaikutus seuraaviin raskauksiin.

Tämä on prospektiivinen kohorttitutkimus, jossa 100 naista (50 kolonisoituneena GBS:n kanssa lähtötilanteessa ja 50 kolonisoimattomia GBS:llä lähtötilanteessa) kussakin paikassa otettiin 12 viikon aikana emättimen vasta-aineiden arvioimiseksi kahden viikon välein ja veressä 6 viikon välein. Tutkimukseen kuuluu myös fokusryhmä, jossa selvitetään menetelmien hyväksyttävyyttä ehdotetussa GBS:n ihmisen infektiohaastemallissa.

1. GBS-seulonta Naisia ​​palkataan GBS-seulontaan Isossa-Britanniassa ja Ugandassa (250 kussakin paikassa). Seulonnassa naiset saavat suostumuksen emättimen ja peräsuolen näytteeseen GBS-kuljetuksen arvioimiseksi, ja heille tehdään myös oireeton sukupuolitautien seulonta paikallisen tavanomaisen käytännön mukaisesti. Sekä Yhdistyneessä kuningaskunnassa että Ugandassa tässä seulonnassa tarkastellaan klamydiaa, tippuria, Trichomonas vaginalista, bakteerivaginoosia, Candidaa sekä kuppaa, HIV:tä ja hepatiittia B ja C. Kaikki, jotka täyttävät seulonnan jälkeen kaikki osallistumiskriteerit, kutsutaan osallistumaan otantatutkimus, kunnes rekrytointitavoitteet saavutetaan. Jos naisen testitulos on positiivinen jonkin infektion suhteen, hänet lähetetään paikalliseen hoitoon ja hänet voidaan silti ottaa mukaan infektion hoidon päätyttyä. 250:stä seulotusta naisesta tutkijat pyrkivät saamaan 50 GBS-positiivista naista ja 50 GBS-negatiivista naista osallistumaan otantatutkimukseen. Suostumus seulonnan suorittamiseen annetaan aluksi näytteenottotutkimuksen lisäsuostumusprosessin yhteydessä.

   Seulonta sisältää kolme itse otettua vanupuikkoa emättimestä ja peräsuolen vanupuikko GBS- ja sukupuolitautien havaitsemiseksi sekä laskimoverinäytteen HIV:n, kupan ja hepatiitti B- ja C-hepatiittien varalta. Seulonnassa tehdään lyhyt sairaushistoria, jotta naiset, joilla on anamneesissa diabetes, sukuelinten dermatoosit, kohdunkaulan sisäinen epiteelin neoplasia tai muu sairaus, jonka tutkija katsoo, että he eivät voi olla sopivia osallistumaan näytteenottotutkimukseen. Seulonnassa tehdään vuodevirtsan raskaustesti. HIV ja hepatiitti B ja C eivät ole poissulkemiskriteereitä, mutta näitä tietoja tarvitaan analyyseissä, koska on mahdollista, että etenkään HIV-potilailla ei ole samaa vasta-ainevastetta kolonisaatiolle.

2. Näytteenottomenetelmän optimointi Jos naisen katsotaan täyttävän seulonnassa kaikki mukaanottokriteerit eikä yhtään poissulkemiskriteeriä ja hän on halukas osallistumaan näytteenottomenetelmän optimointitutkimukseen, hän saa uudelleen suostumuksen jatkotutkimukseen, mukaan lukien suostumus osallistumiseen kohderyhmään klo. tutkimuksen loppu. Suostumus fokusryhmään osallistumiseen on vapaaehtoista.

   Näytteenottotutkimus kestää 12 viikkoa ja näytteet kerätään seuraavasti:

   1. Itse otettu vanupuikko matalasta emättimestä käyttämällä vanupuikkoja rekisteröinnin yhteydessä ja sen jälkeen kahden viikon välein (päivä 0, päivä 14, päivä 28, päivä 42, päivä 56, päivä 70 ja päivä 84) GBS-kuljetusta varten.
   2. Itse otettu peräsuolen vanupuikko rekrytoinnin yhteydessä ja sen jälkeen kahden viikon välein (päivä 0, päivä 14, päivä 28, päivä 42, päivä 56, päivä 70 ja päivä 84), joka testataan GBS-kuljetuksen varalta.
   3. Kuukautiskuppineste hankinnan yhteydessä ja sitten kahden viikon välein (päivä 0, päivä 14, päivä 28, päivä 42, päivä 56, päivä 70 ja päivä 84), josta testataan immunoglobuliini G -vasta-aine (kokonais- ja GBS-spesifinen).
   4. Seeruminäyte päivänä 0 ja päivänä 42 ja päivänä 84 immunoglobuliini G:n havaitsemista varten (kokonais- ja GBS-spesifinen) - 10 ml verta kerätään steriilillä neulalla ja ruiskulla seerumin erotusputkiin.
   5. Virtsan raskaustestit suoritetaan päivänä 0, päivänä 42 ja päivänä 84, jotta varmistetaan, ettei raskautta tule tutkimuksen aikana.

   Naiset voivat valita, ottavatko he itse näytteen peräsuoleen ja kuukautiskuppien avulla kotona vai opintovierailullaan. Verikokeet ja virtsan raskaustestit tekee aina tutkimusryhmä.

3. Fokusryhmät Isossa-Britanniassa tutkija värvää jopa 20 naista otantatutkimuksesta osallistumaan fokusryhmiin heidän kokemuksistaan ​​omanäytteenottomenetelmistä ja kontrolloitujen ihmisen infektiomallien hyväksyttävyydestä. Suostumus osallistua kohderyhmäkeskusteluihin sisältyy osana suostumusta osallistua otantatutkimukseen, mutta se on vapaaehtoista. Naiset voivat poistua fokusryhmistä milloin tahansa, mutta halutessaan jäädä otostutkimukseen.

Ugandassa tutkijat rekrytoivat kohderyhmiimme laajemmin, mukaan lukien kätilöiden ja osallistujan kumppaneiden ja yhteisön johtajien edustus. Tutkijat ottavat suoraan yhteyttä mahdollisiin fokusryhmän osallistujiin. Fokusryhmiä järjestetään kontrolloitujen ihmisen infektiomallien hyväksyttävyydestä. Tutkijat tutkivat myös mahdollisia ongelmia, jotka liittyvät äitien rokottamiseen, sekä perinteisiä ja nykyaikaisia ​​näkemyksiä emättimen vanupuikko- ja verinäytteiden ottamisesta. Ugandan kohderyhmistä tutkija pyytää 30 vapaaehtoista (10 miestä ja/tai yhteisön johtajaa, 10 naista ja 10 kätilöä) osallistumaan kolmeen muuhun keskusteluryhmään tutkiakseen syvällisempiä näkemyksiä emätinvanupuikkojen ja kuukautisten turvallisuudesta ja hyväksyttävyydestä. kupit, mahdollinen epäröinti suostua näytteenottoon ja mahdolliset esteet tutkimukseen osallistumiselle.

Kohderyhmien tuloksia käytetään potilastietolehtisten ja näytteenottoprotokollan tiedottamiseen kontrolloidun ihmisen infektiomallitutkimuksen suunnittelussa.