Sequenciamento de Próxima Geração (NGS) Monitora Doença Residual Mínima (MRD) em Pacientes Allo-PBSCT

A detecção de doença residual mínima (MRD) é a detecção de microclones residuais em pacientes com leucemia em remissão, prevendo a recorrência da doença e determinando o próximo tratamento da doença. Existem muitos métodos para detectar MRD, o mais comum é citometria de fluxo (FCM).Os genes de fusão do tumor de Wilms 1（WT1）, pml-rara, runx1-runx1t1, cbfb-myh11 e nucleofosmina (NPM1) foram detectados por Reação em Cadeia da Polimerase (PCR).Análise cromossômica;Fluorescência in situ hibridação (FISH), etc. FCM é um método comumente usado para detecção clínica de MRD, com uma sensibilidade de 10-3 ~ 4. Sua especificidade é alta apenas quando há clonagem anormal em amostras, e falso negativo pode ser causado quando há é desvio fenotípico e diluição da medula óssea. A detecção por PCR de WT1 é considerada um marcador de pré-leucemia, mas WT1 também é expresso em células não leucêmicas e não é recomendado pela rede europeia de leucemia (ELN). Detecção por PCR de pml-rara , runx1-runx1t1, cbfb-myh11 e outros genes fundidos apenas suportaram os dados do ensaio clínico quando o índice de log diminuiu no procedimento numérico.A análise cromossômica é menos sensível devido à falta de divisão cromossômica em metáfase.FISH tem uma sensibilidade de 10-2 ~ 3, a especificidade é alta apenas em células anormais, mas a taxa de detecção de mutações não cobertas por sondas é baixa e a ligação não específica de sondas pode levar a falsos positivos. A sensibilidade, especificidade e pertinência de várias tecnologias de detecção de MRD são diferentes. Atualmente, essas tecnologias são combinadas para analisar clinicamente o MRD.

O sequenciamento de genes de próxima geração (NGS) é a capacidade de detectar simultaneamente a estrutura de todos os clones e subclones de doenças e rastrear suas mutações mutantes. Em comparação com PCR e FCM que detectam anormalidades em um único clone, o NGS pode detectar cada clone e subclone de doenças.NGS tem sido usado clinicamente para diagnosticar mutações e subtipos de doenças do sangue. Mutações persistentes estão associadas a altas taxas de recorrência.

Este estudo clínico é observacional e não envolve medicamentos. O sequenciamento sensível de próxima geração (NGS) foi usado para monitorar as lesões residuais mínimas após o transplante alogênico de células-tronco hematopoiéticas, para prever a recaída da doença no estágio inicial e para monitorar e avaliar o prognóstico, de forma a embasar o tratamento de intervenção precoce após o transplante, a fim de reduzir a recidiva hematológica e melhorar a sobrevida.