Sequenzierung der nächsten Generation (NGS) überwacht die minimale Resterkrankung (MRD) bei Allo-PBSCT-Patienten

Der Nachweis einer minimalen Resterkrankung (MRD) ist der Nachweis von Restmikroklonen bei Patienten mit Leukämie in Remission, die Vorhersage des Wiederauftretens der Krankheit und die Bestimmung der nächsten Behandlung der Krankheit. Es gibt viele Methoden zum Nachweis von MRD, die häufigste ist Durchflusszytometrie (FCM). Die Fusionsgene von Wilms-Tumor 1 (WT1), pml-rara, runx1-runx1t1, cbfb-myh11 und Nukleophosmin (NPM1) wurden durch Polymerase-Kettenreaktion (PCR) nachgewiesen. Chromosomenanalyse; Fluoreszenz in situ Hybridisierung (FISH) usw. FCM ist eine häufig verwendete Methode zum klinischen Nachweis von MRD mit einer Sensitivität von 10-3~4. Seine Spezifität ist nur hoch, wenn die Proben abnormal kloniert werden, und wenn dies der Fall ist, kann es zu falsch negativen Ergebnissen kommen ist eine phänotypische Drift und Knochenmarkverdünnung. Der PCR-Nachweis von WT1 gilt als Marker für Präleukämie, aber WT1 wird auch in nicht-leukämischen Zellen exprimiert und wird vom Europäischen Leukämie-Netzwerk (ELN) nicht empfohlen. PCR-Nachweis von pml-rara , runx1-runx1t1, cbfb-myh11 und andere fusionierte Gene stützten die klinischen Studiendaten nur, wenn der Log-Index im numerischen Verfahren abnahm. Die Chromosomenanalyse ist weniger empfindlich, da keine Metaphase-Chromosomenteilung erfolgt. FISH hat eine Empfindlichkeit von 10-2 ~ 3, die Spezifität ist nur in abnormalen Zellen hoch, aber die Erkennungsrate von Mutationen, die nicht von Sonden erfasst werden, ist niedrig, und eine unspezifische Bindung von Sonden kann zu falsch positiven Ergebnissen führen. Die Empfindlichkeit, Spezifität und Relevanz verschiedener MRD-Erkennungstechnologien sind unterschiedlich. Derzeit werden diese Technologien kombiniert, um MRD klinisch zu analysieren.

Die Gensequenzierung der nächsten Generation (NGS) ist die Fähigkeit, gleichzeitig die Struktur aller Krankheitsklone und -subklone zu erkennen und ihre sich ändernden Mutationen zu verfolgen. Im Vergleich zu PCR und FCM, die Anomalien in einem einzelnen Klon erkennen, kann NGS jeden Krankheitsklon und -subklon erkennen.NGS wurde klinisch verwendet, um Mutationen und Subtypen von Blutkrankheiten zu diagnostizieren. Persistente Mutationen sind mit hohen Rezidivraten verbunden.

Diese klinische Studie ist eine Beobachtungsstudie und beinhaltet keine Medikamente. Das sensitive Next Generation Sequencing (NGS) wurde verwendet, um die minimalen Restläsionen nach einer allogenen hämatopoetischen Stammzelltransplantation zu überwachen, den Rückfall der Krankheit im Frühstadium vorherzusagen und zu überwachen und Bewertung der Prognose, um die Grundlage für eine frühzeitige Interventionsbehandlung nach der Transplantation zu schaffen, um das hämatologische Rezidiv zu reduzieren und die Überlebensrate zu verbessern.