Eficácia e segurança da ovotransferrina em pacientes com COVID-19

Ovo de galinha consiste em três componentes principais, clara de ovo (56%), gema (33%) e casca (11%). O principal componente da clara de ovo é 88% de água e 12% de sólidos, dos quais mais de 90% são proteínas. Ovalbumina, ovotransferrina e ovomucóide são consideradas as principais proteínas, enquanto ovomucina, lisozima, ovoglobulina, ovomacroglobulina, ovoglicoproteína, ovoflavoproteína, proteínas ligantes de tiamina, inibidores de ficina/papaína, avidina e cistatina são as proteínas brancas menores do embrião. Essas proteínas e seus peptídeos foram reconhecidos como antioxidantes, antimicrobianos, quelantes de metais, antivirais, antitumorais e inibidores da enzima conversora de angiotensina (ACE) por seu significado funcional. Dentre essas propriedades funcionais, a capacidade antioxidante é essencial para o processamento de alimentos. A geração de espécies reativas de oxigênio (ROS) e radicais livres é parte integrante dos processos biológicos que afetam todos os organismos vivos na produção de energia. A ovotransferrina (OTf), que constitui 12% da proteína total da clara do ovo, é conhecida como aglutinante e transportadora de ferro em animais, podendo assim ser utilizada como substituto do ferro, antimicrobiano ou antioxidante. Pesquisadores japoneses descobriram que a ovotransferrina em um método dependente de redox gera autolimpeza observável.

O OTf é composto por 686 aminoácidos e tem massa molecular de 77,90 kDa. É uma proteína que mimetiza a superóxido dismutase (SOD) com uma potente atividade de eliminação de ânion superóxido (O2 _-) e mostrou atividade de eliminação dramaticamente maior do que alguns antioxidantes conhecidos, como albumina sérica ou ascorbato. Curiosamente, OTfs ligados a metais, como Fe2+-OTf, Mn2+-OTf, Cu2+-OTf, exibiram maior capacidade de dismutação de O2 _- do que a apoproteína. A conjugação de OTf com pequenas moléculas, como a catequina, mostra uma atividade antioxidante melhorada. Durante os experimentos in vitro, OTf exibiu alguns efeitos antioxidantes e seus hidrolisados ​​mostraram aproximadamente 3,2 a 13,5 vezes maior atividade de eliminação de ânion superóxido e melhor atividade de eliminação de cobre/cálcio do que OTf. Além disso, o OTf autoclivado apresentou maior atividade antioxidante do que o OTf natural, e os hidrolisados ​​do OTf autoclivado apresentaram atividade antioxidante mais forte do que os do autoclivado.

O peptídeo IRW, resultante da hidrólise, exibiu um sequestrador de radicais de alto oxigênio que pode estar relacionado ao triptofano. Além disso, dois tetrapeptídeos de alta atividade antioxidante (WNIP e GWNI) foram encontrados em digestões de termolisina OTf. O motivo de WNI parece ser responsável pelo alto potencial antioxidante, pois os resíduos de aminoácidos acoplados ao terminal N ou C de ambos os peptídeos diminuíram sua capacidade antioxidante. Além disso, quando testado em células endoteliais, o peptídeo GWNI mostrou a capacidade de reduzir a geração de espécies reativas de oxigênio. Outros peptídeos antioxidantes relatados anteriormente de OTf usando a capacidade de absorção de radicais de oxigênio, por outro lado, não mostraram atividade antioxidante nas células, mostraram deficiências em métodos in vitro livres de células para estudos antioxidantes e destacaram a necessidade de usar mais sistemas biológicos, como cultura células para testar peptídeos antioxidantes. Hidrolisados ​​derivados de OTf obtidos com HCl em pH 2,5 ou outras enzimas como protamex, alcalase, tripsina, neutrase, flavorzima, maxazima, colupulina, protex, promod 278 e alfa-quimotripsina mostrando maior atividade de eliminação de ânion superóxido e capacidade de absorção de oxigênio radical do que intacta proteína e mostrando efeitos protetores contra o DNA induzido pelo estresse oxidativo.

Devido às suas propriedades anti-inflamatórias e antioxidantes, os peptídeos derivados de otrf, incluindo IRW, IQW e KVREGT, são agentes de tratamento viáveis ​​para disfunção endotelial e prevenção de DCV. Eles desregulam a expressão da proteína inflamatória induzida por citocinas no endotélio vascular, modulando a via NF-μB. Pesquisas recentes também revelaram que o KVREGT tem um papel significativo na inibição da ECA e na promoção da vasodilatação. IQW impede ACE, promovendo antioxidação.

A ovotransferrina e a lactoferrina são proteínas de ligação ao ferro com atividades antivirais e antibacterianas relacionadas à imunidade natural, exibindo sequência marcada e homologias estruturais. Dois fragmentos de ovotransferrina de galinha DQKDEYELL (hOtrf219-227) e KDLLFK (hOtrf269-301 e hOtrf633-638) registraram atividade antiviral contra a infecção pelo vírus Marek de fibroblastos de embrião de galinha. Esses fragmentos têm homologia de sequência com dois fragmentos de lactoferrina bovina com atividade antiviral contra o vírus do herpes simples, indicando que esses fragmentos podem desempenhar um papel na exploração da atividade antiviral da proteína intacta contra o vírus do herpes. A análise de RMN mostrou que esses peptídeos sintetizados quimicamente não tinham conformação de solução favorita, sugerindo que tanto a sequência de aminoácidos quanto a conformação na proteína intacta são necessárias para a ação antiviral.

O vírus SARS-CoV-2 ativa o receptor ACE2 da célula humana, desencadeando uma série de eventos deletérios. No COVID19, a renina-angiotensina é regulada positivamente e a via é superexpressa e uma tempestade progressiva de citocinas é sempre observada. Em todos esses processos patogênicos, a ovotransferrina pode desempenhar uma função modificadora para melhorar a condição. A ovotransferrina pode ser benéfica para os efeitos antioxidantes da Angiotensina II ao inibir o NF-kB. A ovotransferrina é um imunomodulador que regula negativamente as citocinas pró-inflamatórias, incluindo TNF-α, IL-6 e IL-1, que podem extinguir a tempestade de citocinas. A ovotransferrina também pode servir como um agente protetor contra a cardiotoxicidade do COVID19 devido à interrupção na via de sinalização mediada por ACE2, tempestade de citocinas, disfunção pulmonar e efeitos colaterais de medicamentos.

Em pacientes com infecção por coronavírus, devido aos possíveis efeitos protetores da ovotransferrina, ela é sugerida como uma alternativa terapêutica e de suporte.

Dado este contexto, à luz da atual emergência do COVID-19, é intenção dos investigadores realizar um estudo prospectivo, randomizado, aberto e controlado na coorte de pacientes hospitalizados com pneumonia por covid-19, administrando 200 mg de ovotransferrina por via oral, além da terapia padrão de atendimento (SOC).

Os investigadores levantam a hipótese de que o uso de ovotransferrina estará associado a uma melhora mais precoce dos parâmetros clínicos e humorais após 10 dias de tratamento com ovotransferrina quando comparado ao grupo de pacientes tratados com tratamento padrão.