Significado clínico da proteína DKK2 na lesão de isquemia-reperfusão cerebral

O acidente vascular cerebral isquêmico refere-se à necrose isquêmica e hipóxica do tecido cerebral causada pelo estreitamento ou oclusão dos vasos sanguíneos no cérebro e representa aproximadamente 80% de todos os acidentes vasculares cerebrais. É caracterizada por altas taxas de morbidade, mortalidade, incapacidade e recorrência. A reperfusão é atualmente o tratamento mais eficaz para a fase aguda do AVC isquêmico, incluindo trombólise farmacológica e embolização mecânica. Embora a revascularização bem-sucedida possa reperfundir áreas de isquemia cerebral, ela pode causar danos cerebrovasculares agudos enquanto restaura o suprimento de sangue para o tecido cerebral, levando à ruptura da barreira hematoencefálica (BHE), aumento do risco de edema cerebral e transformação hemorrágica e aumento da inflamação de tecido neural, o que pode danificar ainda mais o tecido cerebral. A redução direcionada do dano endotelial da isquemia-reperfusão protegerá efetivamente os neurônios dos danos subsequentes, minimizando assim o comprometimento neurológico após o AVC e maximizando o benefício da terapia de revascularização.

A via de sinalização Wnt foi identificada por vários grupos de pesquisa em todo o mundo como uma via regulatória chave na manutenção da função das células cerebrovasculares e neurais. A família de proteínas DKK (Dickkopf-related protein) é o grupo mais representativo de inibidores clássicos da via de sinalização Wnt. As proteínas DKK se ligam competitivamente ao co-receptor Wnt LRP5/6, inibindo assim a atividade das proteínas Wnt e exercendo seus efeitos inibitórios na via de sinalização Wnt/β-catenina. Inicialmente, descobrimos que os níveis séricos de DKK2 aumentaram significativamente após 4,5 horas de terapia de recanalização em 20 pacientes com AVC agudo oclusivo de grandes vasos e diminuíram após 24 horas. Níveis aumentados de DKK2 foram fortemente associados a um prognóstico desfavorável. Isso também foi corroborado em modelos animais, os níveis de expressão de DKK2 no tecido cerebral isquêmico e no sangue periférico foram significativamente elevados e rapidamente regulados positivamente dentro de 6-12 h do início da isquemia-reperfusão cerebral em camundongos. Ensaios celulares in vitro mostraram que a proteína DKK2 inibiu significativamente a atividade da via de sinalização Wnt/β-catenina. Nosso estudo posterior mostrou que a regulação positiva dos níveis de proteína DKK2 no sangue de camundongos por administração intravenosa de adenovírus expressando a proteína DKK2 aumentou significativamente o infarto cerebral e o comprometimento neurológico em camundongos com acidente vascular cerebral. A expressão aumentada da proteína DKK2 no tecido cerebral é a principal razão para a regulação negativa da atividade da via de sinalização Wnt/β-catenina após isquemia/reperfusão, o que leva a danos na barreira hematoencefálica, morte de células neuronais e neuroinflamação e, finalmente, promove dano tecidual e disfunção neurológica. É um novo alvo para terapia medicamentosa e tem grande significado científico e perspectivas de aplicação clínica.

Este estudo clínico é conduzido no Hospital Dongguan da Southern Medical University e no Hospital Nanfang da Southern Medical University. Pacientes com AVC isquêmico agudo com oclusão de grandes vasos que receberam terapia de trombectomia mecânica e são revascularizados com sucesso serão incluídos e acompanhados por 90 dias, juntamente com o teste dos níveis séricos da proteína DKK2 para explorar sua correlação com o prognóstico dos pacientes inscritos. Amostras de sangue venoso serão coletadas antes e 24 h, 48 h e 72 h após o tratamento de revascularização em pacientes inscritos. Amostras de sangue venoso serão coletadas antes e 0h, 24h, 48h e 72h após o tratamento de revascularização para testar o nível sérico de KKD2, e o exame de TC de crânio será realizado antes, 24h e 72h após o tratamento de revascularização para detectar a ocorrência da transformação da hemorragia, da gravidade do edema cerebral e do deslocamento da linha média após o tratamento de revascularização. Indicadores relacionados à lesão da barreira hematoencefálica (MMP-9, ICAM-1) e indicadores relacionados à inflamação (IL-6, IL-1β, TNF-α, IL-10) serão medidos em cada momento do teste DKK2. Os escores NIHSS serão avaliados antes, 0h (imediatamente após o tratamento de revascularização), 24 h, 48 h, 72 h e 7 d após o tratamento de revascularização. Os escores de mRS serão acompanhados em 30 dias e 90 dias após o início para esclarecer a relação entre os níveis séricos de DKK2 e a oclusão de grandes vasos. Nosso objetivo é investigar o mecanismo de DKK2 causando resultados clínicos adversos, como vazamento de BBB, edema cerebral e transformação hemorrágica em um nível clínico do mundo real, coletando amostras de sangue, acompanhamento clínico e pontuação neurológica de pacientes com AVC, medindo os níveis de DKK2 e parâmetros de imagem cerebral para avaliação quantitativa.