Клиническое значение белка DKK2 при церебральном ишемически-реперфузионном повреждении

Ишемический инсульт относится к ишемическому и гипоксическому некрозу ткани головного мозга, вызванному сужением или окклюзией кровеносных сосудов в головном мозге, и составляет примерно 80% всех инсультов. Он характеризуется высокой заболеваемостью, смертностью, инвалидностью и частотой рецидивов. В настоящее время наиболее эффективным методом лечения острой фазы ишемического инсульта является реперфузия, включающая фармакологический тромболизис и механическую эмболизацию. Хотя успешная реваскуляризация может реперфузировать участки церебральной ишемии, она может вызвать острое цереброваскулярное повреждение при восстановлении кровоснабжения ткани головного мозга, приводя к нарушению гематоэнцефалического барьера (ГЭБ), повышению риска отека мозга и геморрагической трансформации, усилению воспаления нервной ткани, что может привести к дальнейшему повреждению ткани головного мозга. Таким образом, целенаправленное снижение повреждения эндотелия в результате ишемии-реперфузии будет эффективно защищать нейроны от последующего повреждения, тем самым сводя к минимуму неврологические нарушения после инсульта и максимизируя пользу от реваскуляризирующей терапии.

Путь передачи сигналов Wnt был идентифицирован несколькими исследовательскими группами по всему миру как ключевой регуляторный путь в поддержании функции цереброваскулярных и нервных клеток. Семейство белков DKK (Dickkopf-related protein) представляет собой наиболее репрезентативную группу классических ингибиторов сигнального пути Wnt. Белки DKK конкурентно связываются с корецептором Wnt LRP5/6, тем самым ингибируя активность белков Wnt и оказывая их ингибирующее действие на сигнальный путь Wnt/β-catenin. Первоначально мы обнаружили, что уровни DKK2 в сыворотке значительно увеличились через 4,5 часа реканализации у 20 пациентов с окклюзионным острым инсультом крупных сосудов и снизились через 24 часа. Повышенные уровни DKK2 были тесно связаны с неблагоприятным прогнозом. Это также было подтверждено на животных моделях: уровни экспрессии DKK2 в ишемизированной ткани головного мозга и периферической крови были значительно повышены и быстро повышались в течение 6-12 часов после начала церебральной ишемии-реперфузии у мышей. Анализы клеток in vitro показали, что белок DKK2 значительно ингибирует активность сигнального пути Wnt/β-катенин. Дальнейшее исследование показало, что повышение уровня белка DKK2 в крови мышей путем внутривенного введения аденовируса, экспрессирующего белок DKK2, значительно увеличивало инфаркт головного мозга и неврологические нарушения у мышей с инсультом. Повышенная экспрессия белка DKK2 в ткани головного мозга является основной причиной снижения активности сигнального пути Wnt/β-катенина после ишемии/реперфузии, что приводит к повреждению гематоэнцефалического барьера, гибели нейронов и нейровоспалению и в конечном итоге способствует повреждение тканей и неврологическая дисфункция. Это новая мишень для лекарственной терапии, имеющая большое научное значение и перспективы клинического применения.

Это клиническое исследование проводится в больнице Дунгуань Южного медицинского университета и больнице Наньфан Южного медицинского университета. Пациенты с острым ишемическим инсультом с окклюзией крупных сосудов, получившие терапию механической тромбэктомией и успешно реваскуляризированные, будут включены и будут наблюдаться в течение 90 дней, наряду с тестированием уровня белка DKK2 в сыворотке для изучения его корреляции с прогнозом включенных пациентов. Образцы венозной крови будут собираться до, а также через 24, 48 и 72 часа после реваскуляризации у включенных в исследование пациентов. Образцы венозной крови будут собираться до и через 0 часов, 24 часа, 48 часов и 72 часа после лечения реваскуляризацией для определения уровня KKD2 в сыворотке, а КТ черепа будет выполняться до, через 24 часа и 72 часа после лечения реваскуляризацией для выявления возникновения трансформацию кровоизлияния, тяжесть отека головного мозга и смещение срединной линии после реваскуляризирующего лечения. Показатели, связанные с повреждением гематоэнцефалического барьера (MMP-9, ICAM-1) и индикаторы, связанные с воспалением (IL-6, IL-1β, TNF-α, IL-10), будут измеряться в каждый момент времени тестирования DKK2. Оценки по шкале NIHSS будут оцениваться до, через 0 ч (сразу после реваскуляризации), через 24 ч, 48 ч, 72 ч и 7 дней после реваскуляризации. Оценки mRS будут отслеживаться через 30 дней и 90 дней после начала заболевания, чтобы прояснить взаимосвязь между уровнями DKK2 в сыворотке и окклюзией крупных сосудов. Мы стремимся исследовать механизм DKK2, вызывающий неблагоприятные клинические исходы, такие как утечка ГЭБ, отек мозга и геморрагическая трансформация, на реальном клиническом уровне путем сбора образцов крови, последующего клинического наблюдения и неврологической оценки пациентов с инсультом путем измерения уровней DKK2. и параметры визуализации головного мозга для количественной оценки.