Znaczenie kliniczne białka DKK2 w urazie niedokrwienno-reperfuzyjnym mózgu

Udar niedokrwienny odnosi się do niedokrwiennej i niedotlenieniowej martwicy tkanki mózgowej spowodowanej zwężeniem lub niedrożnością naczyń krwionośnych w mózgu i stanowi około 80% wszystkich udarów. Charakteryzuje się wysoką chorobowością, śmiertelnością, niesprawnością i nawrotami. Reperfuzja jest obecnie najskuteczniejszym sposobem leczenia ostrej fazy udaru niedokrwiennego mózgu, obejmującym farmakologiczną trombolizę i mechaniczną embolizację. Chociaż udana rewaskularyzacja może spowodować reperfuzję obszarów niedokrwienia mózgu, może spowodować ostre uszkodzenie naczyń mózgowych przy jednoczesnym przywróceniu dopływu krwi do tkanki mózgowej, prowadząc do przerwania bariery krew-mózg (BBB), zwiększonego ryzyka obrzęku mózgu i transformacji krwotocznej oraz nasilenia stanu zapalnego mózgu. tkanki nerwowej, co może dodatkowo uszkodzić tkankę mózgową. Ukierunkowana redukcja uszkodzeń śródbłonka w wyniku niedokrwienia-reperfuzji będzie zatem skutecznie chronić neurony przed późniejszymi uszkodzeniami, minimalizując w ten sposób zaburzenia neurologiczne po udarze i maksymalizując korzyści z terapii rewaskularyzacyjnej.

Szlak sygnałowy Wnt został zidentyfikowany przez kilka grup badawczych na całym świecie jako kluczowy szlak regulacyjny w utrzymaniu funkcji naczyń mózgowych i komórek nerwowych. Rodzina białek DKK (białka związane z Dickkopfem) jest najbardziej reprezentatywną grupą klasycznych inhibitorów szlaku sygnałowego Wnt. Białka DKK wiążą się kompetycyjnie z koreceptorem Wnt LRP5/6, hamując w ten sposób aktywność białek Wnt i wywierając hamujący wpływ na szlak sygnałowy Wnt/β-katenina. Początkowo stwierdziliśmy, że poziomy DKK2 w surowicy wzrosły znacząco po 4,5 godzinie terapii rekanalizacji u 20 pacjentów z ostrym udarem zarostowym dużych naczyń i zmniejszyły się po 24 godzinach. Podwyższone poziomy DKK2 były silnie związane z niekorzystnym rokowaniem. Zostało to również potwierdzone w modelach zwierzęcych, poziomy ekspresji DKK2 w niedokrwionej tkance mózgowej i krwi obwodowej były zarówno znacząco podwyższone, jak i szybko regulowane w górę w ciągu 6-12 godzin od początku niedokrwienia-reperfuzji mózgu u myszy. Testy komórkowe in vitro wykazały, że białko DKK2 znacząco hamuje aktywność szlaku sygnałowego Wnt/β-katenina. Dalsze badania wykazały, że zwiększenie poziomu białka DKK2 we krwi myszy przez dożylne podanie adenowirusa wyrażającego białko DKK2 znacznie zwiększyło zawał mózgu i upośledzenie neurologiczne u myszy z udarem. Zwiększona ekspresja białka DKK2 w tkance mózgowej jest głównym powodem obniżenia aktywności szlaku sygnałowego Wnt/β-katenina po niedokrwieniu/reperfuzji, co prowadzi do uszkodzenia bariery krew-mózg, śmierci komórek neuronalnych i zapalenia nerwów, a ostatecznie promuje mózg uszkodzenia tkanek i dysfunkcje neurologiczne. Jest to nowy cel terapii lekowej i ma ogromne znaczenie naukowe oraz perspektywy zastosowania klinicznego.

To badanie kliniczne jest prowadzone w Szpitalu Dongguan Południowego Uniwersytetu Medycznego i Szpitalu Nanfang Południowego Uniwersytetu Medycznego. Pacjenci z ostrym udarem niedokrwiennym z niedrożnością dużych naczyń, którzy otrzymali mechaniczną trombektomię i pomyślnie rewaskularyzowani, zostaną włączeni i obserwowani przez 90 dni, wraz z badaniem poziomu białka DKK2 w surowicy w celu zbadania jego korelacji z rokowaniem włączonych pacjentów. Próbki krwi żylnej będą pobierane przed i 24 godziny, 48 godzin i 72 godziny po zabiegu rewaskularyzacji u włączonych pacjentów. Próbki krwi żylnej zostaną pobrane przed i 0h, 24h, 48h i 72h po rewaskularyzacji w celu zbadania poziomu KKD2 w surowicy, a badanie CT czaszki zostanie wykonane przed, 24h i 72h po rewaskularyzacji w celu wykrycia wystąpienia transformacji krwotoku, ciężkości obrzęku mózgu i przesunięcia linii pośrodkowej po leczeniu rewaskularyzacyjnym. Wskaźniki związane z uszkodzeniem bariery krew-mózg (MMP-9, ICAM-1) i wskaźniki związane ze stanem zapalnym (IL-6, IL-1β, TNF-α, IL-10) będą mierzone w każdym punkcie czasowym badania DKK2. Wyniki NIHSS będą oceniane przed, 0h (bezpośrednio po rewaskularyzacji), 24h, 48h, 72h i 7d po rewaskularyzacji. Wyniki mRS będą obserwowane po 30 dniach i 90 dniach od początku, aby wyjaśnić związek między poziomami DKK2 w surowicy a niedrożnością dużych naczyń. Naszym celem jest zbadanie mechanizmu DKK2 powodującego niekorzystne wyniki kliniczne, takie jak wyciek BBB, obrzęk mózgu i transformacja krwotoczna na rzeczywistym poziomie klinicznym, poprzez zbieranie próbek krwi, obserwację kliniczną i ocenę neurologiczną pacjentów po udarze poprzez pomiar poziomów DKK2 oraz parametry obrazowania mózgu do oceny ilościowej.