Um Novo Biomarcador para Resposta e Prognóstico de Carcinoma Hepatocelular Relacionado ao VHB

Tumores residuais e recidivas/metástases precoces após radioterapia (RT) comprometem a sobrevida do paciente com carcinoma hepatocelular (CHC). A detecção oportuna de resíduo/recorrência/metástase e a clonalidade são necessárias para implementar terapias de resgate adequadamente. As principais necessidades não atendidas da radioterapia para CHC são as dificuldades na avaliação precoce da resposta por imagens e detecção oportuna de recorrência intra-hepática e metástase extra-hepática. Assim, é necessário um biomarcador preciso e personalizado para previsão de resposta e monitoramento de doenças. O DNA específico do tumor livre de células (ctDNA) chamou a atenção como um biomarcador promissor em pacientes com câncer. No entanto, no CHC, a taxa de detecção é baixa (9-21,2%), principalmente devido à prevalência limitada de mutações somáticas tradicionais e à difícil separação de fragmentos de ctDNA de células normais. Os investigadores pretendem desenvolver um novo ctDNA, o DNA quimera do hospedeiro do vírus (vh-DNA), como um biomarcador para pacientes com CHC relacionados ao vírus da hepatite B (HBV) submetidos à RT. Vh-DNA do VHB está presente em ~90% dos pacientes com CHC relacionados ao VHB e pode ser diferenciado do DNA liberado das células normais por meio de enriquecimento por captura com sondas de VHB. vh-DNA pode ser vantajoso para o tipo de mutação somática tradicional de ctDNA. Os investigadores levantaram a hipótese de que o vh-DNA do VHB poderia diagnosticar com precisão o tumor residual 6 a 12 meses antes das imagens contemporâneas e prever a recorrência/metástase precoce, permitindo assim a intervenção precoce de terapias de resgate.

Os investigadores usarão primeiro nossas amostras de soro coletadas anteriormente e tecidos cirúrgicos/biópsiados de pacientes com CHC relacionados ao HBV submetidos a radioterapia. A consistência dos clones juncionais por Capture NGS precisa ser testada entre os soros pré e pós-RT, e as alterações seriais nos números de cópias de vh-DNA por ddPCR são quantificadas nos casos representativos. Os mesmos clones de junção de soros pré-pós-RT e tecidos cirúrgicos serão confirmados e as alterações no número de cópias do vh-DNA serão correlacionadas com a resposta à RT e o estado de controle da doença.

Os investigadores planejam identificar integrações de HBV por Capture NGS e quantificar o vh-DNA específico por ddPCR como biomarcadores personalizados das amostras de soro do mesmo paciente. Os investigadores correlacionarão ainda mais a resposta clínica e a recorrência/metástase com alterações seriadas dos números de cópias do vh-DNA. Os investigadores coletaram prospectivamente amostras de plasma de pacientes com CHC relacionados ao HBV antes/depois da RT, em 1, 4, 7 meses e na recorrência/metástase. Os investigadores planejam confirmar o papel viável das alterações pré/pós-RT de cópias plasmáticas de vh-DNA do mesmo clone de junção na resposta e prognóstico pós-RT. Além disso, os investigadores explorarão os tumores recorrentes/metastáticos que surgem do original ou de um novo, identificando sua clonalidade com os padrões de integração do HBV. O verdadeiro valor desta nova quimera vh-DNA do VHB será revelado. Os resultados também apoiarão o uso consolidado do vh-DNA personalizado para avaliação precoce da resposta ao tratamento após RT, para monitoramento da doença pós-RT e para diferenciar a clonalidade na recorrência para projetar futuros ensaios clínicos sobre tratamento combinado.