Un nuovo biomarcatore per la risposta e la prognosi del carcinoma epatocellulare correlato all'HBV

I tumori residui e le recidive/metastasi precoci dopo la radioterapia (RT) compromettono la sopravvivenza del paziente con carcinoma epatocellulare (HCC). Rilevamento tempestivo di residui/recidive/metastasi e clonalità è necessario per implementare correttamente le terapie di salvataggio. Le principali esigenze insoddisfatte della radioterapia per l'HCC sono le difficoltà nella valutazione precoce della risposta mediante immagini e nel rilevamento tempestivo della recidiva intraepatica e delle metastasi extraepatiche. Pertanto, è richiesto un biomarcatore accurato e personalizzato per la previsione della risposta e il monitoraggio della malattia. Il DNA specifico del tumore libero da cellule (ctDNA) ha attirato l'attenzione come promettente biomarcatore nei pazienti oncologici. Tuttavia, nell'HCC, il tasso di rilevamento è basso (9-21,2%), principalmente a causa della prevalenza limitata delle mutazioni somatiche tradizionali e della difficile separazione dei frammenti di ctDNA dalle cellule normali. I ricercatori mirano a sviluppare un nuovo ctDNA, il DNA chimera ospite del virus (vh-DNA), come biomarcatore per i pazienti con HCC correlati al virus dell'epatite B (HBV) sottoposti a RT. L'HBV vh-DNA è presente in circa il 90% dei pazienti con HCC correlato all'HBV e può essere differenziato dal DNA rilasciato dalle cellule normali attraverso l'arricchimento mediante cattura con sonde HBV. vh-DNA potrebbe essere vantaggioso per il tradizionale tipo di mutazione somatica del ctDNA. I ricercatori ipotizzano che l'HBV vh-DNA possa diagnosticare con precisione il tumore residuo di 6-12 mesi prima rispetto alle immagini contemporanee e prevedere recidive/metastatsi precoci, consentendo così un intervento precoce delle terapie di salvataggio.

Gli investigatori utilizzeranno prima i nostri campioni di siero precedentemente raccolti e tessuti chirurgici / biopsiati da pazienti con HCC correlato all'HBV sottoposti a radioterapia. La coerenza dei cloni giunzionali di Capture NGS deve essere testata tra i sieri pre e post-RT e le modifiche seriali nei numeri di copie di vh-DNA mediante ddPCR sono quantificate nei casi rappresentativi. Gli stessi cloni di giunzione da sieri pre-post-RT e tessuti chirurgici saranno confermati e le variazioni del numero di copie di vh-DNA saranno correlate con la risposta RT e lo stato di controllo della malattia.

Gli investigatori intendono identificare le integrazioni dell'HBV mediante Capture NGS e quantificare il vh-DNA specifico mediante ddPCR come biomarcatori personalizzati dai campioni di siero dello stesso paziente. Gli investigatori correleranno ulteriormente la risposta clinica e la recidiva/metastasi con i cambiamenti seriali dei numeri di copie del vh-DNA. I ricercatori hanno raccolto in modo prospettico campioni di plasma da pazienti con HCC correlato all'HBV prima/dopo la RT, a 1, 4, 7 mesi e alla recidiva/metastasi. Gli investigatori intendono confermare il ruolo vitale delle modifiche pre/post-RT delle copie plasmatiche di vh-DNA dello stesso clone di giunzione nella risposta e nella prognosi post-RT. Inoltre, gli investigatori esploreranno i tumori ricorrenti / metastatici derivanti dall'originale o da uno de novo identificando la loro clonalità con i modelli di integrazione dell'HBV. Verrà rivelato il vero valore di questa nuova chimera HBV vh-DNA. I risultati supporteranno anche l'uso consolidante del vh-DNA personalizzato per la valutazione precoce della risposta al trattamento dopo la RT, per il monitoraggio della malattia post-RT e per differenziare la clonalità alla recidiva per progettare la futura sperimentazione clinica sul trattamento combinato.