Ein neuartiger Biomarker für das Ansprechen und die Prognose von HBV-assoziiertem hepatozellulärem Karzinom

Resttumoren und frühe Rezidive/Metastasen nach Strahlentherapie (RT) beeinträchtigen das Überleben der Patienten mit hepatozellulärem Karzinom (HCC). Die rechtzeitige Erkennung von Residuen/Rezidiven/Metastasen und der Klonalität ist erforderlich, um Salvage-Therapien richtig umzusetzen. Die wichtigsten unerfüllten Bedürfnisse der Strahlentherapie bei HCC sind die Schwierigkeiten bei der frühen Bewertung des Ansprechens durch Bilder und der rechtzeitigen Erkennung von intrahepatischen Rezidiven und extrahepatischen Metastasen. Daher wird ein genauer und personalisierter Biomarker zur Vorhersage des Ansprechens und zur Krankheitsüberwachung benötigt. Zellfreie tumorspezifische DNA (ctDNA) hat als vielversprechender Biomarker bei Krebspatienten Aufmerksamkeit erregt. Bei HCC ist die Erkennungsrate jedoch niedrig (9-21,2 %). hauptsächlich aufgrund der begrenzten Prävalenz traditioneller somatischer Mutationen und der schwierigen Trennung von ctDNA-Fragmenten von normalen Zellen. Das Ziel der Forscher ist die Entwicklung einer neuartigen ctDNA, der Virus-Wirts-Chimären-DNA (vh-DNA), als Biomarker für Hepatitis-B-Virus (HBV)-assoziierte HCC-Patienten, die sich einer RT unterziehen. HBV-vh-DNA ist bei ca. 90 % der HBV-assoziierten HCC-Patienten vorhanden und kann durch Anreicherung durch Abfangen mit HBV-Sonden von DNA unterschieden werden, die aus normalen Zellen freigesetzt wird. vh-DNA könnte gegenüber dem traditionellen somatischen Mutationstyp der ctDNA vorteilhaft sein. Die Forscher gehen von der Hypothese aus, dass HBV-vh-DNA Resttumoren 6-12 Monate früher als aktuelle Bilder genau diagnostizieren und ein frühes Wiederauftreten/Metastasieren vorhersagen könnte, wodurch ein frühzeitiges Eingreifen von Salvage-Therapien ermöglicht wird.

Die Forscher werden zunächst unsere zuvor gesammelten Serumproben und chirurgischen/biopsierten Gewebe von HBV-assoziierten HCC-Patienten verwenden, die sich einer Strahlentherapie unterziehen. Die Konsistenz von junktionalen Klonen durch Capture NGS muss zwischen Pre- und Post-RT-Seren getestet werden, und serielle Änderungen der Kopienzahlen von vh-DNA durch ddPCR werden in den repräsentativen Fällen quantifiziert. Dieselben Verbindungsklone aus Pre-Post-RT-Seren und chirurgischen Geweben werden bestätigt und die Kopienzahländerungen der vh-DNA werden mit der RT-Reaktion und dem Krankheitskontrollstatus korreliert.

Die Forscher planen, HBV-Integrationen durch Capture NGS zu identifizieren und die spezifische vh-DNA durch ddPCR als personalisierte Biomarker aus den Serumproben desselben Patienten zu quantifizieren. Die Prüfärzte werden das klinische Ansprechen und das Wiederauftreten/Metastasieren weiter mit seriellen Änderungen der vh-DNA-Kopienzahlen korrelieren. Die Forscher haben prospektiv Plasmaproben von HBV-assoziierten HCC-Patienten vor/nach RT, nach 1, 4, 7 Monaten und bei Rezidiv/Metastasierung gesammelt. Die Forscher planen, die realisierbare Rolle von Prä-/Post-RT-Änderungen von Plasma-vh-DNA-Kopien desselben Junction-Klons bei der Post-RT-Antwort und -Prognose zu bestätigen. Darüber hinaus werden die Ermittler die rezidivierenden/metastasierenden Tumore untersuchen, die aus dem ursprünglichen oder einem de novo-Tumor entstehen, indem sie ihre Klonalität mit HBV-Integrationsmustern identifizieren. Der wahre Wert dieser neuartigen HBV-Chimären-vh-DNA wird enthüllt werden. Die Ergebnisse werden auch die konsolidierende Verwendung von personalisierter vh-DNA zur früheren Bewertung des Behandlungsansprechens nach RT, zur Krankheitsüberwachung nach RT und zur Differenzierung der Klonalität bei Rezidiven unterstützen, um zukünftige klinische Studien zur Kombinationsbehandlung zu entwerfen.