Revelando o impacto microbiano na fibrose intestinal
Revelando o impacto microbiano na fibrose intestinal: novos insights para a patogênese e o tratamento das complicações associadas à doença de Crohn
A doença de Crohn (DC), pertencente à classe das Doenças Inflamatórias Intestinais, é uma doença inflamatória crônica que pode afetar qualquer local do trato gastrointestinal. É caracterizada por inflamação transmural e uma resposta imunológica esmagadora da mucosa intestinal, o que leva a sintomas clínicos graves. Mais de 50% dos pacientes com DC desenvolvem uma doença penetrante ou estenosante devido à fibroestenose, que na maioria das vezes requer intervenção cirúrgica, uma vez que nenhuma terapia foi considerada tão eficaz ainda. Entre as características histológicas da DC estenosante, o espessamento da muscular da mucosa e da muscular própria é a principal característica, principalmente devido à proliferação excessiva de células mesenquimais e ao aumento do acúmulo de uma matriz extracelular rica em colágeno na submucosa, causada por múltiplos mecanismos , incluindo i) a proliferação de fibroblastos locais existentes, a indução de ambas ii) transição epitelial para e iii) transição endotelial para mesenquimal. Mesmo que a alteração destas funções da mucosa seja causada principalmente pela lesão contínua dos tecidos que ocorre durante a inflamação crónica associada à DC, relatórios recentes sugeriram que a fibrose associada à DC pode ser impulsionada por desencadeadores independentes da inflamação, tais como a disbiose da microbiota.
Lançar luz sobre este aspecto da fibrose da DC pode levar ao desenvolvimento de estratégias terapêuticas inovadoras, eventualmente bloqueando o espessamento intestinal.
Visão geral do estudo
Status
Condições
Intervenção / Tratamento
Descrição detalhada
Este é um estudo observacional transversal envolvendo pacientes com Doença de Crohn (DC) (n=15) e pacientes com Doença Intestinal Não Intestinal (DII) (n=5) submetidos a cirurgia na unidade de Gastroenterologia e Endoscopia Digestiva do Gastro Center ( IRCCS Ospedale San Raffaele) de acordo com o padrão de atendimento.
As amostras serão coletadas durante a cirurgia, sem outros riscos para os pacientes, pois utilizaremos apenas material que sobrar da análise patológica.
Espécimes cirúrgicos derivados de CD serão processados para obtenção de suspensão celular, que será congelada e armazenada para posterior triagem celular. Para processamento de tecido não-DII, cada amostra cirúrgica será cortada em dois pedaços. Um será processado para obtenção da suspensão celular a ser armazenada, enquanto o tecido restante será processado para isolar fibroblastos da lâmina própria e células endoteliais, bem como para gerar organoides epiteliais.
Ospedale San Raffaele (OSR - Unidade Operativa (UO)1 (UO1)) é o promotor deste estudo. O outro centro participante do estudo é a Universidade de Milão (UO2), responsável pelo desenvolvimento de dispositivos microfluídicos 3D para experimentos in vitro. Os pacientes serão inscritos apenas no UO1.
Tipo de estudo
Inscrição (Estimado)
Contactos e Locais
Contato de estudo
- Nome: Federica Ungaro
- Número de telefone: 0226437864
- E-mail: ungaro-federica@hsr.it
Locais de estudo
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Milan, Itália
- IRCCS Ospedale San Raffaele
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Critérios de participação
Critérios de elegibilidade
Idades elegíveis para estudo
- Adulto
- Adulto mais velho
Aceita Voluntários Saudáveis
Método de amostragem
População do estudo
20 pacientes submetidos à cirurgia:
- 15 pacientes com DC (5 pacientes/estágio: (B1 (mais inflamatório, não estruturante), B2 (estruturante, não penetrante) e B3 (estruturante e penetrante).
A estratificação dos pacientes é baseada em classificações prévias feitas de acordo com o padrão de atendimento por meio de TC, RMI ou Ecografia. Por esse motivo, a classificação dos pacientes é conhecida antes da cirurgia.
- 5 pacientes sem doenças relacionadas à DII (ex. diverticulite)
Descrição
Critério de inclusão:
- Pacientes adultos ≥18 e <70 anos
- Todos os pacientes assinarão o consentimento informado
- Dado que se trata de um estudo observacional, também poderiam ser incluídas pacientes grávidas e lactantes
Além disso, para pacientes com DC:
- classificação em diferentes estágios: (B1 (mais inflamatório, não estruturante), B2 (estruturante, não penetrante) e B3 (estruturante e penetrante). A estratificação dos pacientes é baseada em classificações prévias feitas de acordo com o padrão de atendimento por meio de TC, RMI ou Ecografia.
Além disso, para pacientes sem DII:
- indivíduos submetidos a cirurgia para doenças não-DII (ex. diverticulite) de acordo com o padrão de atendimento
Critério de exclusão:
Para pacientes com DC:
- Sujeitos com DC sem classificação prévia em B1, B2, B3
- Pacientes <18 anos ou > 70 anos
- Pacientes sem consentimento informado assinado
Para pacientes sem DII:
- Pacientes <18 anos ou > 70 anos
- Pacientes sem consentimento informado assinado
Plano de estudo
Como o estudo é projetado?
Detalhes do projeto
Coortes e Intervenções
Grupo / Coorte |
Intervenção / Tratamento |
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Doença de Crohn (DC)
15 pacientes com DC (5 pacientes/estágio: (B1 (mais inflamatório, não estruturante), B2 (estruturante, não penetrante) e B3 (estruturante e penetrante). A estratificação dos pacientes é baseada em classificações prévias feitas de acordo com o padrão de atendimento por meio de TC, RMI ou Ecografia. Por esse motivo, a classificação dos pacientes é conhecida antes da cirurgia. |
Espécimes de pacientes com DC e pacientes sem doença relacionada à DII (ex.
diverticulite) será coletado durante a cirurgia, sem outros riscos para os pacientes, pois utilizaremos apenas material que sobrou após análise patológica
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pacientes com doença intestinal não intestinal (sem DII)
5 pacientes sem doenças relacionadas à DII (ex.
diverticulite)
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Espécimes de pacientes com DC e pacientes sem doença relacionada à DII (ex.
diverticulite) será coletado durante a cirurgia, sem outros riscos para os pacientes, pois utilizaremos apenas material que sobrou após análise patológica
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O que o estudo está medindo?
Medidas de resultados primários
Medida de resultado |
Descrição da medida |
Prazo |
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Para realizar citometria de fluxo, RNAseq, metatranscriptômica, transcriptômica e lipidômica em células CD e não-DII
Prazo: 1-36 meses
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Avaliar como os fatores bacterianos podem impactar o estado transcriptômico dos diferentes compartimentos da célula hospedeira em termos de via profibrótica e ativação gênica.
As células serão submetidas a FACS para marcadores CD31, EpCam e CD90 para isolar células endoteliais, células epiteliais e fibroblastos, respectivamente, como os conhecidos atores celulares no processo fibrótico.
Populações unicelulares serão submetidas à preparação da biblioteca e serão analisadas por RNAseq ribo-menos em leituras de 30M de profundidade.
Serão realizadas metatranscriptômica para traçar o perfil da composição microbiana, bem como a transcriptômica para determinar tanto a expressão gênica diferencial (DGE) quanto a Análise de Enriquecimento de Conjunto de Genes (GSEA).
As abundâncias relativas de fatores derivados de Brevibacteriaceae, Caulobacteraceae e Sphingomonadaceae serão calculadas usando Kraken2 para identificar quais subtipos de células entre fibroblastos derivados de CD, células endoteliais e organoides epiteliais abrigam a composição microbiana específica para fibróticos.
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1-36 meses
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Colaboradores e Investigadores
Patrocinador
Datas de registro do estudo
Datas Principais do Estudo
Início do estudo (Estimado)
Conclusão Primária (Estimado)
Conclusão do estudo (Estimado)
Datas de inscrição no estudo
Enviado pela primeira vez
Enviado pela primeira vez que atendeu aos critérios de CQ
Primeira postagem (Estimado)
Atualizações de registro de estudo
Última Atualização Postada (Estimado)
Última atualização enviada que atendeu aos critérios de controle de qualidade
Última verificação
Mais Informações
Termos relacionados a este estudo
Termos MeSH relevantes adicionais
Outros números de identificação do estudo
- RF-2021-12372637
Plano para dados de participantes individuais (IPD)
Planeja compartilhar dados de participantes individuais (IPD)?
Informações sobre medicamentos e dispositivos, documentos de estudo
Estuda um medicamento regulamentado pela FDA dos EUA
Estuda um produto de dispositivo regulamentado pela FDA dos EUA
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