Avalie a eficácia dos protocolos preparados com progestógeno versus antagonista do GnRH em mulheres vietnamitas submetidas à fertilização in vitro

Materiais e Método

Este foi um ensaio clínico aberto, randomizado e controlado realizado no Centro de Reprodução Assistida do Hospital Geral Tam Anh. O estudo teve como objetivo estimar a eficácia da intervenção (protocolo PPOS) em comparação com um grupo controle que recebeu um protocolo antagonista do hormônio liberador de gonadotrofina (GnRH).

Estimativa do tamanho da amostra

O procedimento de estimativa do tamanho da amostra está detalhado no protocolo do estudo. Em resumo, os investigadores realizaram uma simulação que implicou o método de Cundill e Alexander (2015) com parâmetros derivados do perfil clínico de 804 pacientes que foram submetidas à estimulação ovariana por dois protocolos no Hospital Tam Anh de janeiro a outubro de 2022. O procedimento teve como objetivo otimizar o teste de não inferioridade na diferença na quantidade de oócitos recuperados entre dois grupos, estimada por uma distribuição Binomial Negativa. O resultado da simulação indicou que seria necessário um tamanho total de amostra de 200 pacientes (n=100 para cada braço de tratamento) para atingir um poder estatístico de 0,8.

Recrutamento de participantes do estudo

Pacientes inférteis vêm para exames no Centro de Reprodução Assistida do Hospital Geral Tam Anh, em Hanói, e no Centro de Reprodução Assistida e Tecnologia de Enxerto da Universidade Médica de Hanói. No processo básico de exame de infertilidade no hospital, os médicos considerarão os critérios inclusivos e exclusivos do paciente. Os médicos entrarão em contato com um membro da equipe de pesquisa se os critérios inclusivos forem atendidos. Um membro da equipe de pesquisa ou médico do hospital convidará o paciente a participar, aconselhará sobre o procedimento do estudo e os benefícios e riscos da participação e responderá a quaisquer perguntas do paciente. Se os pacientes concordarem em participar, eles consentirão em participar do estudo. Cada participante será atribuído aleatoriamente ao grupo de tratamento usando o protocolo PPOS ou ao grupo de controle usando o regime GnRH-ant.

Método de tratamento

Protocolos de estimulação ovariana

A hiperestimulação ovariana controlada começou no segundo dia da menstruação utilizando hormônio folículo-estimulante recombinante. No grupo do protocolo antagonista do hormônio liberador de gonadotrofina (GnRH), a supressão hipofisária começou no sexto dia de estimulação por meio da administração diária de 0,25 miligramas de antagonista de GnRH (ganirelix ou cetrorelix). No grupo de estimulação ovariana iniciada com progestina (PPOS), 30mg/dia de didrogesterona foram iniciados no dia 2 do ciclo até o dia desencadeante.

Protocolo laboratorial

Os complexos oócito-cúmulo foram incubados por 2 horas em meio G-IVF (Vitrolife) utilizando incubadoras de bancada Origio para completar a maturação nuclear. Após a remoção das células do cumulus, os oócitos desnudados foram avaliados sob um microscópio invertido para validar a obtenção do status de metáfase II, enquanto os oócitos degenerados, grandes ou gravemente dismórficos foram excluídos. A injeção intracitoplasmática de espermatozóides (ICSI) foi executada 3-4 horas após a recuperação por embriologistas experientes. Os zigotos resultantes foram cultivados em meio único contínuo (Fujifilm Irvine Scientific) dentro de incubadoras trigás (37°C, 5% O2, 6% CO2) até o dia 3. Critérios morfológicos rigorosos foram aplicados, retendo apenas dois zigotos de pró-núcleos normalmente fertilizados enquanto eliminavam embriões multinucleares anormais. A qualidade do estágio de clivagem foi classificada em 67-69 horas de acordo com o consenso de Istambul com base no número de células, fragmentação, multinucleação e uniformidade. No terceiro dia pós-ICSI, os embriologistas aconselharam os pacientes sobre a realização da cultura de blastocistos versus a criopreservação. A morfologia dos blastocistos foi avaliada utilizando o sistema de classificação de Gardner e Schoolcraft, e os embriões que atenderam aos critérios de 3-6 blastocistos AA/AB/BA ou 1-2 embriões AA/AB foram classificados como de boa qualidade.