Ocena skuteczności protokołów zawierających startery progestynowe w porównaniu z protokołami antagonistów GnRH u wietnamskich kobiet poddawanych zapłodnieniu in vitro

Materiały i metody

Było to otwarte, randomizowane, kontrolowane badanie przeprowadzone w Centrum Wspomaganego Rozrodu szpitala ogólnego w Tam Anh. Celem badania była ocena skuteczności interwencji (protokół PPOS) w porównaniu z grupą kontrolną otrzymującą protokół z antagonistą hormonu uwalniającego gonadotropinę (GnRH).

Oszacowanie wielkości próbki

Procedura szacowania wielkości próby jest szczegółowo opisana w protokole badania. W skrócie, badacze przeprowadzili symulację wykorzystującą metodę Cundill i Alexandra (2015) z parametrami uzyskanymi z profilu klinicznego 804 pacjentek, które przeszły stymulację jajników według dwóch protokołów w szpitalu Tam Anh od stycznia do października 2022 r. Procedura miała na celu optymalizację badania równoważności na podstawie różnicy w ilości uzyskanych oocytów pomiędzy dwiema grupami, oszacowanej za pomocą ujemnego rozkładu dwumianowego. Wynik symulacji wskazał, że do osiągnięcia mocy statystycznej wynoszącej 0,8 wymagana byłaby całkowita wielkość próby wynosząca 200 pacjentów (n=100 w każdym ramieniu leczenia).

Rekrutacja uczestników badania

Niepłodni pacjenci przychodzą na badania do Centrum Wspomaganego Rozrodu Szpitala Ogólnego Tam Anh w Hanoi oraz Centrum Technologii Wspomaganego Rozrodu i Przeszczepów Uniwersytetu Medycznego w Hanoi. Podczas podstawowego badania niepłodności w szpitalu lekarze biorą pod uwagę kryteria włączające i wyłączne pacjenta. Jeśli spełnione zostaną kryteria włączające, klinicyści skontaktują się z członkiem zespołu badawczego. Członek zespołu badawczego lub lekarz szpitalny zaprosi pacjenta do udziału, doradzi procedurę badania oraz korzyści i ryzyko związane z uczestnictwem w badaniu, a także odpowie na wszelkie pytania pacjenta. Jeżeli pacjenci wyrażą zgodę na udział, będą jednocześnie wyrazili zgodę na udział w badaniu. Każdy uczestnik zostanie losowo przydzielony do grupy leczonej stosującej protokół PPOS lub do grupy kontrolnej stosującej schemat GnRH-ant.

Metoda leczenia

Protokoły stymulacji jajników

Kontrolowaną hiperstymulację jajników rozpoczynano drugiego dnia miesiączki za pomocą rekombinowanego hormonu folikulotropowego. W grupie stosującej protokół protokołu z antagonistą hormonu uwalniającego gonadotropinę (GnRH), supresja przysadki mózgowej rozpoczęła się w szóstym dniu stymulacji poprzez codzienne podawanie 0,25 miligrama antagonisty GnRH (ganireliks lub cetroreliks). W grupie otrzymującej stymulację jajników szczepionką progestynową (PPOS) od drugiego dnia cyklu aż do dnia wyzwalającego włączono dawkę 30 mg dydrogesteronu na dobę.

Protokół laboratoryjny

Kompleksy oocyt-cumulus inkubowano przez 2 godziny w pożywce G-IVF (Vitrolife) przy użyciu inkubatorów laboratoryjnych Origio w celu zakończenia dojrzewania jądrowego. Po usunięciu komórek wzgórka, obnażone oocyty oceniano pod odwróconym mikroskopem, aby potwierdzić osiągnięcie statusu metafazy II, wykluczając oocyty zdegenerowane, duże lub silnie dysmorficzne. Docytoplazmatyczna iniekcja plemnika (ICSI) została wykonana przez doświadczonych embriologów 3–4 godziny po pobraniu. Powstałe zygoty hodowano w ciągłych, pojedynczych pożywkach (Fujifilm Irvine Scientific) w inkubatorach trójgazowych (37°C, 5% O2, 6% CO2) do 3. dnia. Narzucono rygorystyczne kryteria morfologiczne, zachowując jedynie normalnie zapłodnione dwie zygoty przedjądrowe, eliminując nieprawidłowe zarodki wielojądrowe. Jakość etapu rozszczepiania oceniano na 67–69 godzin zgodnie z konsensusem ze Stambułu w oparciu o liczbę komórek, fragmentację, wielojądrowość i jednorodność. W 3. dniu po ICSI embriolodzy doradzali pacjentom, czy należy przeprowadzić posiew blastocysty zamiast kriokonserwacji. Morfologię blastocyst oceniano za pomocą skali Gardnera i Schoolcrafta, a zarodki spełniające kryteria 3-6 blastocyst AA/AB/BA lub 1-2 zarodków AA/AB uznawano za dobrej jakości.