Оценка эффективности протоколов с использованием прогестина и антагонистов ГнРГ у вьетнамских женщин, перенесших экстракорпоральное оплодотворение

Материалы и метод

Это было открытое рандомизированное контролируемое исследование, проведенное в Центре вспомогательной репродукции больницы общего профиля Там Ань. Целью исследования было оценить эффективность вмешательства (протокол PPOS) по сравнению с контрольной группой, получавшей протокол с антагонистами гонадотропин-рилизинг-гормона (ГнРГ).

Оценка размера выборки

Процедура оценки размера выборки подробно описана в протоколе исследования. Вкратце, исследователи провели моделирование, основанное на методе Кандилла и Александера (2015), с параметрами, полученными на основе клинического профиля 804 пациенток, которые прошли стимуляцию яичников по двум протоколам в больнице Там Ань с января по октябрь 2022 года. Процедура была направлена ​​на оптимизацию тестирования не меньшей эффективности по разнице в количестве полученных ооцитов между двумя группами, оцененной с помощью отрицательного биномиального распределения. Результаты моделирования показали, что для достижения статистической мощности 0,8 потребуется общий размер выборки в 200 пациентов (n=100 для каждой группы лечения).

Набор участников исследования

Пациенты с бесплодием приходят на обследование в Центр вспомогательной репродукции больницы общего профиля Там Ань в Ханое и Центр вспомогательной репродукции и трансплантологии Ханойского медицинского университета. В процессе базового обследования бесплодия в больнице врачи будут учитывать инклюзивные и эксклюзивные критерии пациента. Врачи свяжутся с членом исследовательской группы, если все критерии будут соблюдены. Член исследовательской группы или врач больницы пригласит пациента принять участие, проконсультирует о процедуре исследования, преимуществах и рисках участия, а также ответит на любые вопросы пациента. Если пациенты соглашаются участвовать, они дадут согласие на участие в исследовании. Каждый участник будет случайным образом распределен в группу лечения с использованием протокола PPOS или в контрольную группу с использованием режима GnRH-ant.

Метод лечения

Протоколы стимуляции яичников

Контролируемую гиперстимуляцию яичников начинали на второй день менструации с использованием рекомбинантного фолликулостимулирующего гормона. В группе протокола с антагонистами гонадотропин-рилизинг-гормона (ГнРГ) подавление гипофиза начиналось на шестой день стимуляции посредством ежедневного введения 0,25 миллиграмм антагониста ГнРГ (ганиреликса или цетрореликса). В группе стимуляции яичников с прогестином (PPOS) дидрогестерон в дозе 30 мг/день начинался со 2-го дня цикла до триггерного дня.

Лабораторный протокол

Комплексы ооцит-кумулюс инкубировали в течение 2 часов в среде G-IVF (Vitrolife) с использованием настольных инкубаторов Origio для завершения созревания ядра. После удаления кумулюсных клеток оголенные ооциты оценивали под инвертированным микроскопом для подтверждения достижения статуса метафазы II, в то время как дегенеративные, крупные или сильно дисморфные ооциты исключали. Интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида (ИКСИ) была выполнена опытными эмбриологами через 3-4 часа после извлечения. Полученные зиготы культивировали в непрерывной одиночной среде (Fujifilm Irvine Scientific) в трехгазовых инкубаторах (37°C, 5% O2, 6% CO2) до 3-го дня. Соблюдались строгие морфологические критерии, при этом сохранялись только две нормально оплодотворенные зиготы пронуклеусов при одновременном удалении аномальные многоядерные эмбрионы. Качество стадии расщепления оценивалось в 67-69 часов согласно Стамбульскому консенсусу на основании количества клеток, фрагментации, многоядерности и однородности. На третий день после ИКСИ эмбриологи консультировали пациентов по поводу культивирования бластоцист вместо криоконсервации. Морфологию бластоцист оценивали с использованием системы оценок Гарднера и Скулкрафта, а эмбрионы, соответствующие критериям 3-6 бластоцист АА/АВ/ВА или 1-2 эмбрионов АА/АВ, классифицировались как эмбрионы хорошего качества.