Estratégias multidisciplinares inovadoras para o combate à dengue grave (COMBAT)

Antecedentes: Muitos ensaios clínicos de dengue em andamento visam avaliar compostos terapêuticos e potenciais candidatos a vacinas. Os compostos terapêuticos visam atingir vários estágios da replicação do vírus da dengue, como a entrada viral, por meio da inibição da fusão do vírus, do inibidor da polimerase NS5 e da redução da antigenemia NS1, para citar alguns. No entanto, ainda não foi estabelecida uma abordagem baseada em ómicas para identificar as vias metabólicas que a dengue utiliza para subverter o sistema hospedeiro para obter energia e subsequentemente implementar estratégias de evasão imunitária viral. Este estudo se concentrará na exploração e compreensão das vias que o vírus da dengue explora e na investigação se o bloqueio da via identificada pode fazer com que o vírus “morra de fome”.

• O estudo oferecerá informações sobre a diversidade de marcadores de infecção por dengue em nível de sistema e as moléculas desreguladas envolvidas nas vias celulares e metabólicas durante a infecção por dengue.
• A identificação de novas vias afetadas pela desregulação molecular revelará a associação dos biomarcadores com a resposta imune e a gravidade da doença, ajudando assim a melhorar a triagem e o tratamento dos pacientes.
• Os biomarcadores identificados serão significativos na monitorização dos pacientes, criando uma plataforma para intervenção precoce para mitigar a dengue grave através de novos alvos terapêuticos e estratégias de gestão.

Os objetivos principais do estudo proposto são:

• Sorotipagem viral caso a caso e investigação do perfil de citocinas do hospedeiro.
• Transcriptômica e proteômica do sangue em todo o sistema durante a infecção por dengue e sua relação com a gravidade da doença.
• Identificação de vias que influenciam a gravidade por estudos mecanísticos in vitro.

Coortes de estudo:

Serão utilizados materiais clínicos de duas regiões endêmicas, uma da América Central (Guatemala) e do Sudeste Asiático (Índia). A Guatemala é um local exemplar para estudar a infecção por DENV, devido à sua combinação distinta de diversidade climática e presença endêmica e de dengue. Duas amostras de sangue (no dia da internação e no dia da alta) dos pacientes serão coletadas de acordo com a classificação de casos revisada pela OMS de 2009: 1) dengue sem sinais de alerta (DwoWS, n = 200), 2) dengue com sinais de alerta (DWS, n=200), 3) dengue grave (DP, n=200). Além disso, amostras não-dengue serão coletadas de controles saudáveis ​​(n=200). Esta coorte atuará como a coorte DISCOVERY. Coletaremos sangue total em tubo TempusTM (para sequenciamento de RNA) e soro (para proteômica e metabolômica).

No âmbito da cooperação Índia-UE em investigação e inovação (I&I) e da parceria de cofinanciamento no âmbito do programa-quadro da UE em I&I 'Horizonte Europa, serão recolhidas amostras na Índia, no Artemis Hospital, Nova Deli, Max Health Care, Nova Deli ( uma unidade da Fundação Devki Devi) e Kasturba Medical College Hospital, Mangalore. Esses são os dois epicentros da dengue endêmica na Índia. Serão coletadas 50 amostras de cada classificação de gravidade da dengue (total de amostras 150 em cada categoria) e controle saudável negativo para DENV (total 150:50 em cada local). As coortes indianas atuarão como coortes de VALIDAÇÃO.

Recrutamento de controles Participantes saudáveis ​​que tiveram resultados negativos para infecção por dengue nos últimos três meses não serão recrutados para o estudo, que será mais pareado por idade e sexo com os casos. Essas amostras serão testadas para IgM antidengue e ELISA NS1 para descartar infecção assintomática em curso. Eles também serão submetidos a ELISA IgG anti-dengue para verificar se há infecção anterior por dengue. Cada um dos participantes de controle também será solicitado a fornecer um histórico médico detalhado