Strategie multidisciplinari innovative per combattere la dengue grave (COMBAT)

Background: molti studi clinici sulla dengue in corso mirano a valutare sia i composti terapeutici che i potenziali candidati al vaccino. I composti terapeutici mirano a colpire varie fasi della replicazione del virus dengue, come l’ingresso virale, inibendo la fusione del virus, l’inibitore della polimerasi NS5 e la riduzione dell’antigenemia NS1, per citarne alcuni. Tuttavia, deve ancora essere stabilito un approccio basato su omics per identificare le vie metaboliche che la dengue utilizza per sovvertire il sistema ospite per ricavare energia e successivamente implementare strategie di evasione immunitaria virale. Questo studio si concentrerà sull'esplorazione e sulla comprensione dei percorsi sfruttati dal virus della dengue e indagherà se il blocco del percorso identificato può causare la "morte di fame" del virus.

• Lo studio offrirà informazioni sulla vasta gamma a livello di sistema di marcatori di infezione da dengue e sulle molecole disregolate coinvolte nelle vie cellulari e metaboliche durante l’infezione da dengue.
• L'identificazione di nuovi percorsi interessati dalla disregolazione delle molecole svelerà l'associazione dei biomarcatori con la risposta immunitaria e la gravità della malattia, contribuendo così a migliorare la selezione e il trattamento dei pazienti.
• I biomarcatori identificati saranno significativi nel monitoraggio dei pazienti, creando una piattaforma per un intervento precoce per mitigare la dengue grave attraverso nuovi bersagli terapeutici e strategie di gestione.

Gli obiettivi primari dello studio proposto sono:

• Sierotipizzazione virale caso per caso e studio del profilo delle citochine dell'ospite.
• Trascrittomica e proteomica del sangue a livello di sistema durante l'infezione da dengue e la sua relazione con la gravità della malattia.
• Identificazione dei percorsi che influenzano la gravità mediante studi meccanicistici in vitro.

Gruppi di studio:

Verrà utilizzato materiale clinico proveniente da due regioni endemiche, una dall'America Centrale (Guatemala) e una dal Sud-Est asiatico (India). Il Guatemala è un luogo esemplare per lo studio dell’infezione da DENV, grazie alla sua combinazione distintiva di diversità climatica e presenza endemica e di dengue. Verranno raccolti due campioni di sangue (il giorno del ricovero e il giorno della dimissione) dai pazienti secondo la classificazione dei casi rivista dall'OMS del 2009: 1) dengue senza segnali di pericolo (DwoWS, n = 200), 2) dengue con segnali di pericolo (DWS, n=200), 3) dengue grave (SD, n=200). Inoltre, verranno raccolti campioni non dengue da controlli sani (n = 200). Questa coorte fungerà da coorte DISCOVERY. Raccoglieremo il sangue intero in una provetta TempusTM (per il sequenziamento dell'RNA) e il siero (per la proteomica e la metabolomica).

Nell'ambito della cooperazione India-UE in materia di ricerca e innovazione (R&I) e del partenariato di cofinanziamento nell'ambito del programma quadro dell'UE in materia di R&I "Orizzonte Europa", i campioni saranno raccolti dall'India, dall'Artemis Hospital, Nuova Delhi, Max Health Care, Nuova Delhi ( un'unità della Fondazione Devki Devi) e il Kasturba Medical College Hospital, Mangalore. Questi sono i due epicentri della dengue endemica in India. Verranno raccolti 50 campioni da ciascuna classificazione di gravità della dengue (campioni totali 150 in ciascuna categoria) e controllo sano negativo alla DENV (totale 150: 50 in ciascun sito). Le coorti indiane fungeranno da coorti di CONVALIDA.

Reclutamento dei controlli I partecipanti sani che sono risultati negativi al test per l'infezione da dengue negli ultimi tre mesi non saranno reclutati per lo studio, che sarà ulteriormente abbinato ai casi per età e sesso. Questi campioni verranno testati per IgM anti-dengue e ELISA NS1 per escludere un'infezione asintomatica in corso. Saranno inoltre sottoposti a ELISA IgG anti-dengue per verificare la presenza di un'infezione da dengue pregressa. A ciascuno dei partecipanti al controllo verrà inoltre chiesto di fornire una storia medica dettagliata