Avaliação do Stress Oxidativo: Comparação Entre a Diabetes Mellitus Tipo 1 e a Diabetes Autoimune Latente em Adultos

O objetivo deste estudo observacional será avaliar os níveis dos principais marcadores de stresse oxidativo na DM1 e na LADA e identificar se existem alguns marcadores de stresse oxidativo específicos para as duas doenças. Os objetivos secundários serão avaliar se existe uma associação entre os marcadores de stresse oxidativo e a gravidade das doenças.

Objetivo primário:

Verificar se os níveis dos biomarcadores dependem do tipo de doença (DM1 vs. LADA), ajustando para as características dos pacientes.

Objetivos secundários:

2.1) Verificar se os níveis dos biomarcadores estão associados ao controlo glicémico (glicemia em jejum, HbA1c, glicemia pós-prandial).

2.2) Nos casos incidentes, avaliar se uma diminuição da HbA1c corresponde a uma diminuição dos biomarcadores aos 3 meses após o início do tratamento em cada doença.

2.3) Verificar se estes biomarcadores tendem a formar agrupamentos, globalmente e por diagnóstico.

Após obtenção do consentimento informado, os investigadores recrutarão 75 pacientes com DM1 e 75 com LADA, com idade ≥ 18 anos e ≤ 75 anos, de ambos os sexos. Todos os pacientes serão selecionados entre os utentes externos do Centro de Diabetes e Doenças Metabólicas do Primeiro Departamento de Medicina Interna, Fundação IRCCS Policlinico San Matteo. O desenho do estudo incluirá uma única visita em que serão recolhidos o historial médico e amostras de sangue dos pacientes. Para os casos incidentes, será agendada uma visita de seguimento aos 3 meses após o início do tratamento para avaliar se uma diminuição da HbA1c corresponde a uma diminuição dos biomarcadores. Para uma avaliação abrangente do equilíbrio oxidativo, será realizado o teste d-ROMs para avaliar o estado pró-oxidante ligado a um dos parâmetros relacionados com o potencial antioxidante (teste BAP, teste OXY-Adsorbent, teste -SHp e teste anti-ROMs). Os parâmetros serão avaliados utilizando o Free Radical Elective Evaluator (FREE) Duo da Diacron International s.r.l. (Grosseto, ITÁLIA), um sistema analítico integrado que permite qualquer tipo de análise químico-clínica baseada no princípio da fotometria. Os investigadores também avaliarão a proteína C-reativa de alta sensibilidade (PCR-as), a superóxido dismutase (SOD), a glutationa peroxidase (GSH-Px) e o malondialdeído (MDA). Para avaliar se existe uma associação entre um pior estágio das doenças e alguns marcadores de stresse oxidativo, os investigadores também avaliarão a hemoglobina glicada (HbA1c), a glicemia em jejum (GJ) e a glicemia pós-prandial (GPP). Todos os parâmetros plasmáticos serão determinados após um jejum noturno de 12 horas, com exceção da GPP, determinada 2 horas após uma refeição padronizada. Serão recolhidas amostras de sangue venoso para todos os pacientes entre as 8h e as 9h. Os investigadores utilizarão plasma obtido por adição de Na2-ácido etilenodiaminotetraacético (EDTA), 1 mg/ml, e centrifugado a 3000 g durante 15 minutos a 4°C. Imediatamente após a centrifugação, as amostras de plasma serão congeladas e armazenadas a -80 °C por não mais de 3 meses. Todas as medições serão analisadas pelo Laboratório de Medicina Molecular, Medicina Geral 1, Fundação IRCCS Policlinico San Matteo, com experiência comprovada na dosagem destes marcadores. Os investigadores estudarão 10 biomarcadores. O cálculo do tamanho da amostra baseia-se na viabilidade. Os investigadores esperam recrutar 75 pacientes com DM1 e 75 pacientes com LADA, de ambos os sexos, com idade ≥ 18 e ≤ 75 anos.