Hodnocení oxidačního stresu: Srovnání mezi diabetes mellitus 1. typu a latentním autoimunitním diabetem dospělých

Cílem této observační studie bude vyhodnotit hladiny hlavních markerů oxidačního stresu u T1DM a LADA a identifikovat, zda existují nějaké markery oxidačního stresu specifické pro tyto dvě choroby. Sekundární cíle budou vyhodnotit, zda existuje asociace mezi markery oxidačního stresu a závažností onemocnění.

Primární cíl:

Ověřit, zda hladiny biomarkerů závisí na typu onemocnění (T1DM vs LADA), s přihlédnutím k charakteristikám pacientů.

Sekundární cíle:

2.1) Ověřit, zda hladiny biomarkerů souvisejí s glykemickou kontrolou (FPG, HbA1c, PPG).

2.2) U nově diagnostikovaných případů posoudit, zda pokles HbA1c odpovídá poklesu biomarkerů po 3 měsících od zahájení léčby u každého onemocnění.

2.3) Ověřit, zda tyto biomarkery mají tendenci tvořit shluky, celkově a podle diagnózy.

Po získání informovaného souhlasu budou vyšetřovatelé rekrutovat 75 pacientů s T1DM a 75 s LADA ve věku ≥ 18 let a ≤ 75 let, obojího pohlaví. Všichni pacienti budou vybráni z ambulantních pacientů navštěvujících Centrum pro diabetes a metabolická onemocnění Prvního interního oddělení, IRCCS Policlinico San Matteo Foundation. Studijní design bude zahrnovat jednu jedinou návštěvu, při které bude shromážděna anamnéza pacientů a vzorky krve. U nově diagnostikovaných případů bude naplánována kontrolní návštěva po 3 měsících od zahájení léčby, aby se posoudilo, zda pokles HbA1c odpovídá poklesu biomarkerů. Pro komplexní hodnocení oxidační rovnováhy bude proveden d-ROMs test k vyhodnocení pro-oxidačního stavu spojeného s jedním z parametrů souvisejících s antioxidačním potenciálem (BAP test, OXY-Adsorbent test, -SHp test a anti-ROMs test). Parametry budou vyhodnoceny pomocí Free Radical Elective Evaluator (FREE) Duo od společnosti Diacron International s.r.l. (Grosseto, ITÁLIE), integrovaného analytického systému, který umožňuje jakýkoli typ chemicko-klinické analýzy na principu fotometrie. Vyšetřovatelé také vyhodnotí vysoce senzitivní C-reaktivní protein (Hs-CRP), superoxid dismutázu (SOD), glutathion peroxidázu (GSH-Px), malondialdehyd (MDA). Aby bylo možné vyhodnotit, zda existuje asociace mezi horším stádiem onemocnění a některými markery oxidačního stresu, vyšetřovatelé také vyhodnotí glykovaný hemoglobin (HbA1c), glukózu v plazmě nalačno (FPG), postprandiální glukózu (PPG). Všechny plazmatické parametry budou stanoveny po 12hodinovém nočním lačnění, s výjimkou PPG, která bude stanovena 2 hodiny po standardizovaném jídle. Žilní vzorky krve budou odebrány všem pacientům mezi 8:00 a 9:00 hod. Vyšetřovatelé použijí plazmu získanou přidáním Na2-ethylendiamintetraoctové kyseliny (EDTA), 1 mg/ml, a centrifugací při 3000 g po dobu 15 minut při 4°C. Ihned po centrifugaci budou vzorky plazmy zmraženy a skladovány při -80 °C po dobu maximálně 3 měsíců. Všechna měření budou analyzována Laboratoří molekulární medicíny, Všeobecné lékařství 1, IRCCS Policlinico San Matteo Foundation s prokázanými zkušenostmi v dávkování těchto markerů. Vyšetřovatelé budou studovat 10 biomarkerů. Výpočet velikosti vzorku je založen na proveditelnosti. Vyšetřovatelé očekávají zařazení 75 pacientů s T1DM a 75 pacientů s LADA, obojího pohlaví, ve věku ≥ 18 a ≤ 75 let.