Влияние упражнений на поглощение бета-аланина тканями и скорость синтеза карнозина

B-аланин — это заменимая непротеиногенная аминокислота, обнаруженная в дефицитных концентрациях в скелетных мышцах. Этот дефицит делает B-аланин фактором, ограничивающим скорость синтеза карнозина. Добавка B-аланина очень эффективна для увеличения внутримышечного содержания карнозина, что приводит к улучшению физической работоспособности, особенно при высокоинтенсивных упражнениях (HIIE). Кажется, что упражнения сами по себе могут модулировать содержание карнозина; тем не менее, остается неясным, могут ли физическая подготовка или статус тренировки влиять на реакцию добавок B-аланина. Таким образом, эта работа направлена ​​на оценку того, может ли HIIE увеличивать поглощение B-аланина периферическими тканями и, в частности, скелетными мышцами и увеличивать внутримышечный синтез карнозина. Будет проведено перекрестное уравновешенное исследование. Добровольцы будут оцениваться в двух условиях: потребление B-аланина + упражнения (B-EX) и потребление только B-аланина (B-Ala). Дозировка составит 20 мг·кг-1 (порошок, разведенный в воде). Этот процесс будет разделен на два блока по шесть дней (с четверга по четверг - без выходных) с перерывом в 4-6 недель. В блоке B-EX пройдет 20-минутная сессия HIIE. Затем будет введена добавка B-аланина. Сразу после тренировки, во время 150-минутного отдыха, будут взяты образцы венозной крови, а также биопсия мышц и сбор мочи до и после теста. В следующие три дня (с четверга по среду) этот же протокол будет повторяться без забора крови, мышц или мочи. В эти дни будет вводиться добавка B-аланина до и после протокола (B-EX и B-Ala) в той же дозировке 20 мг/кг. На 6-й день (четверг) будет проведен полный протокол, включая сбор биологических материалов. В блоке B-Ala те же процедуры будут приняты для блока B-EX с заменой HIIE на 20 минут отдыха сидя на велоэргометре. Параметры питания будут оцениваться в течение двух блоков с помощью диетических дневников в программном обеспечении (Dietbox), которое включает изображения и описание всей еды добровольцев в течение дня. Будет определено, что во время блоков (В-ЕХ и В-ала) прием Бета-аланина с пищей ограничивается до 300мг в сутки. Анализ определения B-аланина в мышцах, плазме и моче, мышечного карнозина будет выполнен с помощью ВЭЖХ-ESI+-MS/MS. Экспрессия генов ферментов и транспортеров, связанных с карнозином, будет проанализирована с использованием метода ПЦР в реальном времени. Ферменты CARNS1, CN2, TauT, PAT1 и фосфорилированная Na+/K+/АТФаза будут проанализированы методом вестерн-блоттинга. Активность карнозинсинтазы будет осуществляться за счет включения [3H] B-аланиновой кислоты в соответствующий дипептид. Анализ наличия и интенсивности парестезии будет проводиться по шкале, адаптированной из LINGJÆRDE et al., 1987. Статистический анализ будет выполняться в программном обеспечении RStudio и программном обеспечении SAS с использованием смешанной модели для сравнения показателей мышц, плазмы и мочи. Состояние (B-Ex против B-ala) и время сбора (время) будут фиксированными факторами, тогда как испытуемые будут случайными факторами. Наборы данных, содержащие значения, полученные только в 2 момента времени (например, область ниже кривой B-аланина в плазме), будут проанализированы с использованием t-критерия Стьюдента для зависимых выборок, если распределение данных нормальное. Если распределение данных не является нормальным, мы будем использовать критерий знаков Уилкоксона для пар. Нормальность распределения данных будет оцениваться качественно с использованием графика Q-Q. Для каждого набора данных будут проверены четыре различные структуры ковариационной матрицы. Критерий Шварца-Байеса (наименьшее значение BIC) будет использоваться для выбора матрицы, которая наилучшим образом соответствует каждому набору данных. Контрастный анализ одной степени свободы, основанный на гипотезе, позволит проверить конкретные эффекты внутри условий и между ними. Размер эффекта Коэна (D) будет рассчитан для всех переменных. Значимость будет принята, если p<0,05.