A influência do exercício na captação de beta-alanina tecidual e nas taxas de síntese de carnosina

A B-alanina é um aminoácido não essencial e não proteinogênico encontrado em concentrações deficientes no músculo esquelético. Essa deficiência torna a B-alanina um fator limitante da taxa de síntese de carnosina. A suplementação de B-alanina é altamente eficiente em aumentar o conteúdo de carnosina intramuscular, levando a melhora do desempenho físico, principalmente em exercícios de alta intensidade (HIIE). Parece que o exercício em si pode modular o conteúdo de carnosina; no entanto, permanece incerto se o treinamento físico ou o status do treinamento podem influenciar as respostas de suplementação de B-alanina. Assim, este trabalho tem como objetivo avaliar se o HIIE pode aumentar a captação de B-alanina pelos tecidos periféricos e, mais especificamente, pelo músculo esquelético e aumentar a síntese intramuscular de carnosina. Será realizado um estudo cruzado contrabalançado. Os voluntários serão avaliados em duas condições: ingestão de B-alanina + exercício (B-EX) e ingestão apenas de B-alanina (B-Ala). A dosagem será de 20 mg · kg-1 (pó diluído em água). Este processo será dividido em dois blocos de seis dias (quinta a quinta - sem fim de semana) com washout de 4-6 semanas. No bloco B-EX, será realizada uma sessão de HIIE de 20 minutos. Em seguida, será administrada a suplementação de B-alanina. Imediatamente após o exercício, em repouso de 150 minutos, serão realizadas coletas de sangue venoso, biópsia muscular e coleta de urina pré-teste e pós-teste. Nos próximos três dias (quinta a quarta), esse mesmo protocolo será repetido sem coletas de sangue, músculo ou urina. Nestes dias, a suplementação de B-alanina será administrada antes e após o protocolo (B-EX e B-Ala), na mesma dosagem de 20mg.kg-1. No 6º dia (quinta-feira), será realizado o protocolo completo, incluindo a coleta de materiais biológicos. No bloco B-Ala, serão adotados os mesmos procedimentos do bloco B-EX, com a substituição do HIIE por 20 minutos de repouso sentado no cicloergômetro. Os parâmetros nutricionais serão avaliados durante os dois blocos por meio de diários alimentares em software (Dietbox) que inclui imagens e a descrição de todos os alimentos voluntários do dia. Será determinado que durante os bloqueios (B-EX e B-ala), a ingestão de Beta-alanina por via alimentar seja limitada a 300mg por dia. A análise da determinação de B-alanina muscular, plasmática e urinária, carnosina muscular será realizada por HPLC-ESI + -MS/MS. A expressão gênica de enzimas e transportadores relacionados à carnosina será analisada pela técnica de PCR em tempo real. As enzimas CARNS1, CN2, TauT, PAT1 e Na+/K+/ATPase fosforiladas serão analisadas pela técnica de Western Blot. A atividade da carnosina sintase será realizada pela incorporação do ácido [3H]B-alanina no dipeptídeo correspondente. A análise da presença e intensidade da parestesia será feita através de uma escala adaptada de LINGJÆRDE et al., 1987. A análise estatística será realizada nos softwares RStudio e SAS, utilizando o modelo misto para comparação das variáveis ​​musculares, plasmáticas e urinárias. A condição (B-Ex vs. B-ala) e o tempo de coleta (tempo) serão fatores fixos, enquanto os sujeitos serão fatores aleatórios. Conjuntos de dados contendo valores obtidos em apenas 2 pontos no tempo (por exemplo, área abaixo da curva plasmática de B-alanina) serão analisados ​​usando o teste t de Student para amostras dependentes se a distribuição dos dados for normal. Se a distribuição dos dados não for normal, usaremos o teste de sinais de Wilcoxon para pares. A normalidade da distribuição dos dados será avaliada qualitativamente usando Q-Q Plot. Quatro diferentes estruturas de matriz de covariância serão testadas para cada conjunto de dados. O critério Schwarz-Bayesiano (menor valor BIC) será utilizado para selecionar a matriz que melhor se ajusta a cada conjunto de dados. A análise de contraste guiada por hipóteses de um único grau de liberdade testará efeitos específicos dentro e entre as condições. O tamanho do efeito Cohen (D) será calculado para todas as variáveis. A significância será aceita se p<0,05.