Высушенное пятно крови – пилотное исследование статинов (DBS)

Несмотря на снижение смертности от сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ) за последние 20 лет, ССЗ остаются ведущей причиной смертности в Соединенных Штатах, составляя примерно 1 из каждых 3 смертей. ССЗ обходятся США более чем в 100 миллиардов долларов в год и являются важным полем для целенаправленной первичной и вторичной профилактики. Дислипидемия, особенно высокий уровень холестерина липопротеинов низкой плотности (ХС-ЛПНП), является общепризнанным фактором сердечно-сосудистого риска, и панели липидов натощак (включая общий холестерин, ХС-ЛПНП, триглицериды и холестерин липопротеинов высокой плотности) HDL-C]) включены в недавнее руководство ACC/AHA по оценке рисков 2013 года. Клинические испытания показали, что снижение уровня холестерина липопротеинов низкой плотности (ХС-ЛПНП) при терапии статинами предсказывает снижение частоты сердечно-сосудистых событий. Около четверти всех взрослых старше 45 лет принимали статины в 2008 году, и это число, вероятно, увеличится из-за недавних рекомендаций ACC/AHA по управлению холестерином 2013 года. Эти рекомендации рекомендуют терапию статинами всем пациентам с атеросклеротическими сердечно-сосудистыми заболеваниями, всем пациентам с ХС ЛПНП = 190 мг/дл, пациентам в возрасте 40–75 лет с диабетом и ХС ЛПНП 70–189 мг/дл, а также пациентам с примерно 10 Годовой риск атеросклеротических ССЗ = 7,5%. Для всех этих пациентов перед началом приема статинов, а также во время последующего наблюдения следует проводить анализ липидов натощак для оценки приверженности лечению и образу жизни. Эти панели липидов натощак получают с помощью обычной флеботомии через венопункции в лабораторных условиях офиса или больницы.

Исследовательский количественный анализ белка с помощью масс-спектрометрии и иммуноферментного анализа (ИФА) — это технологии, которые позволяют проводить чувствительный количественный анализ белковых биомаркеров и мишеней, включая липопротеины. Что наиболее важно, масс-спектрометрия с мониторингом множественных реакций (MRM) способна оценивать образцы из высушенной капли крови (DBS), преимущества которой включают минимальные требования к объему, простоту получения образца пальцем с минимальными затратами на обучение, простоту транспортировки и удобство хранения образца. стабильность. Отбор проб DBS использовался для клинических и доклинических исследований, упрощая сбор и обработку образцов. Тем не менее, количественный анализ белка с помощью масс-спектрометрии и ИФА не сравнивали с обычным образцом крови для оценки изменений уровня холестерина во время терапии статинами.

В то время как ХС-ЛПНП хорошо зарекомендовал себя в прогнозировании снижения сердечно-сосудистых событий, было показано, что другие лабораторные липидные, тромботические и воспалительные биомаркеры связаны с развитием атеросклеротических бляшек или риском сердечно-сосудистых заболеваний. К ним относятся Апо А-I, Апо В, Апо Е, IgM, плазминоген, ТИМП-1, фактор фон Виллебранда, антитромбин III, цистатин С, мезотелин, С-реактивный белок, SAA, ЛПС-связывающий белок, маннозо-связывающий лектин, миелопероксидаза, фибриноген, альфа-1-кислый гликопротеин, растворимый трансферриновый рецептор, гаптоглобин. Все эти белковые биомаркеры сердечно-сосудистых заболеваний могут быть измерены с помощью методов количественного определения белков.

В пилотном исследовании 20 предметов мы стремимся:

1. измерять изменения в панели белковых биомаркеров сердечно-сосудистых заболеваний до и после начала терапии статинами.
2. сравнить клинические лабораторные измерения LDL-C и HDL-C в обычных образцах крови после флеботомии с масс-спектрометрией количественного определения белка и измерениями ELISA белков LDL-C (Apo B) и HDL-C (Apo A-I) в DBS и плазме.