Studio pilota sulle macchie di sangue essiccato sulle statine (DBS)

Nonostante la riduzione della mortalità per malattie cardiovascolari (CVD) negli ultimi 20 anni, la CVD rimane la principale causa di mortalità negli Stati Uniti, rappresentando circa 1 decesso su 3. La CVD costa agli Stati Uniti oltre 100 miliardi di dollari all'anno ed è un campo importante per la prevenzione primaria e secondaria mirata. La dislipidemia, in particolare un livello elevato di colesterolo da lipoproteine ​​a bassa densità (LDL-C), è un fattore di rischio cardiovascolare ben consolidato e pannelli lipidici a digiuno (compresi colesterolo totale, LDL-C, trigliceridi e colesterolo da lipoproteine ​​ad alta densità). HDL-C]) sono inclusi nelle recenti linee guida per la valutazione del rischio ACC/AHA del 2013. Gli studi clinici hanno dimostrato che la riduzione del colesterolo lipoproteico a bassa densità (LDL-C) con la terapia con statine predice la riduzione degli eventi cardiovascolari. Circa un quarto di tutti gli adulti >45 anni era in terapia con statine nel 2008, e questo probabilmente aumenterà a causa delle recenti linee guida ACC/AHA per la gestione del colesterolo del 2013. Queste linee guida raccomandano la terapia con statine in tutti i pazienti con CVD aterosclerotica clinica, tutti i pazienti con LDL-C = 190 mg/dL, pazienti di età compresa tra 40 e 75 anni con diabete e LDL-C 70-189 mg/dL e pazienti con una stima di 10 rischio CVD aterosclerotico a 1 anno = 7,5%. Per tutti questi pazienti, deve essere tracciato un pannello lipidico a digiuno prima dell'inizio della terapia con statine e durante il follow-up per valutare l'aderenza ai farmaci e allo stile di vita. Questi pannelli lipidici a digiuno sono ottenuti tramite flebotomia convenzionale tramite venopuntura in un ambiente di laboratorio ambulatoriale o ospedaliero.

La quantificazione delle proteine ​​di ricerca con la spettrometria di massa e il saggio di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) sono tecnologie che consentono la quantificazione sensibile di biomarcatori e bersagli proteici, comprese le lipoproteine. La cosa più importante è che la spettrometria di massa per il monitoraggio di reazioni multiple (MRM) è in grado di valutare i campioni da una macchia di sangue essiccato (DBS), i cui vantaggi includono requisiti di volume minimi, facilità di prelievo del campione con il polpastrello con una formazione minima richiesta, facilità di trasporto e prelievo del campione stabilità. Il campionamento DBS è stato utilizzato per studi clinici e preclinici, semplificando la raccolta e la manipolazione dei campioni. Tuttavia, la quantificazione delle proteine ​​di ricerca con spettrometria di massa ed ELISA non è stata confrontata con il campione di sangue convenzionale per valutare i cambiamenti nei livelli di colesterolo durante la terapia con statine.

Mentre il C-LDL è ben consolidato nel predire la riduzione degli eventi CVD, è stato dimostrato che altri biomarcatori lipidici, trombotici e infiammatori di laboratorio sono associati allo sviluppo della placca aterosclerotica o al rischio di CVD. Questi includono Apo AI, Apo B, Apo E, IgM, plasminogeno, TIMP-1, fattore Von Willebrand, antitrombina III, cistatina C, mesotelina, proteina C-reattiva, SAA, proteina legante LPS, lectina legante il mannosio, mieloperossidasi, fibrinogeno, alfa-1-glicoproteina acida, recettore solubile della transferrina, aptoglobina. Tutti questi biomarcatori proteici CVD possono essere misurati mediante tecniche di quantificazione delle proteine ​​di ricerca.

In uno studio pilota su 20 soggetti, miriamo a:

1. misurare i cambiamenti in un pannello di biomarcatori proteici CVD prima e dopo l'inizio della terapia con statine.
2. confrontare le misurazioni di laboratorio clinico di LDL-C e HDL-C in campioni di sangue di flebotomia convenzionali con la spettrometria di massa per la quantificazione delle proteine ​​di ricerca e le misurazioni ELISA delle proteine ​​LDL-C (Apo B) e HDL-C (Apo A-I) nella DBS e nel plasma.