Sangue Seco - Estudo Piloto Estatina (DBS)

Apesar das reduções na mortalidade por doenças cardiovasculares (DCV) nos últimos 20 anos, as DCV continuam sendo a principal causa de mortalidade nos Estados Unidos, representando cerca de 1 em cada 3 mortes. A DCV custa aos EUA mais de US$ 100 bilhões anualmente e é um campo importante para a prevenção primária e secundária direcionada. A dislipidemia, particularmente um alto nível de colesterol de lipoproteína de baixa densidade (LDL-C), é um fator de risco cardiovascular bem estabelecido e os painéis lipídicos em jejum (incluindo colesterol total, LDL-C, triglicerídeos e colesterol de lipoproteína de alta densidade [ HDL-C]) estão incluídos nas recentes Diretrizes de Avaliação de Risco ACC/AHA de 2013. Ensaios clínicos demonstraram que a redução do colesterol de lipoproteína de baixa densidade (LDL-C) com terapia com estatina prediz a redução de eventos cardiovasculares. Cerca de um quarto de todos os adultos com mais de 45 anos de idade estavam em terapia com estatina em 2008, e isso provavelmente aumentará devido às recentes diretrizes de gerenciamento de colesterol ACC/AHA de 2013. Essas diretrizes recomendam a terapia com estatina em todos os pacientes com DCV aterosclerótica clínica, todos os pacientes com LDL-C = 190 mg/dL, pacientes com idade entre 40-75 anos com diabetes e LDL-C 70-189 mg/dL e pacientes com uma estimativa de 10 -ano de risco de DCV aterosclerótica = 7,5%. Para todos esses pacientes, um perfil lipídico em jejum deve ser feito antes do início da estatina, bem como durante o acompanhamento para avaliar a adesão à medicação e ao estilo de vida. Esses painéis lipídicos em jejum são obtidos por meio de flebotomia convencional por meio de venopunção em um consultório ou laboratório hospitalar.

A quantificação de proteínas de pesquisa com espectrometria de massa e ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA) são tecnologias que permitem a quantificação sensível de biomarcadores e alvos de proteínas, incluindo lipoproteínas. Mais importante ainda, a espectrometria de massa de monitoramento de múltiplas reações (MRM) é capaz de avaliar amostras de uma mancha de sangue seco (DBS), cujas vantagens incluem requisitos mínimos de volume, facilidade de obtenção de amostra por picada no dedo com o mínimo de treinamento necessário, facilidade de transporte e amostra estabilidade. A amostragem DBS tem sido usada para estudos clínicos e pré-clínicos, simplificando a coleta e o manuseio de amostras. No entanto, a quantificação de proteínas de pesquisa com espectrometria de massa e ELISA não foi comparada com amostras de sangue convencionais para avaliar alterações nos níveis de colesterol durante a terapia com estatinas.

Embora o LDL-C esteja bem estabelecido na previsão da redução de eventos cardiovasculares, outros biomarcadores lipídicos, trombóticos e inflamatórios demonstraram estar associados ao desenvolvimento de placas ateroscleróticas ou ao risco de doenças cardiovasculares. Estes incluem Apo A-I, Apo B, Apo E, IgM, plasminogênio, TIMP-1, fator de Von Willebrand, antitrombina III, cistatina C, mesotelina, proteína C-reativa, SAA, proteína de ligação a LPS, lectina de ligação a manose, mieloperoxidase, fibrinogênio, alfa-1-glicoproteína ácida, receptor de transferrina solúvel, haptoglobina. Todos esses biomarcadores de proteínas CVD podem ser medidos por técnicas de pesquisa de quantificação de proteínas.

Em um estudo piloto de 20 indivíduos, pretendemos:

1. medir as mudanças em um painel de biomarcadores de proteínas CVD antes e depois do início da terapia com estatinas.
2. comparar as medições laboratoriais clínicas de LDL-C e HDL-C em amostras de sangue de flebotomia convencional com espectrometria de massa de quantificação de proteínas de pesquisa e medições ELISA de proteínas LDL-C (Apo B) e HDL-C (Apo A-I) em DBS e plasma.