Эндотелиальные микрочастицы и антитело-опосредованное отторжение и трансплантация почки: биомаркер антитело-опосредованного отторжения при трансплантации почки (MICROMARK RJ)

Контекст и обоснование:

Опосредованное антителами отторжение является основной причиной длительной потери почечного трансплантата. Это связано с выработкой реципиентом антител, направленных против антигенов (принадлежащих или не принадлежащих к системе HLA), присутствующих на поверхности донор-специфических эндотелиальных клеток (ДСК), связывание которых может активировать почечный эндотелий и быть ответственным за воспаление. приводит к фиброзу и разрушению трансплантата.

Основным препятствием в лечении гуморального отторжения является задержка диагностики и лечения для замедления развития фиброза. В начале процесса нет «кажущейся» дисфункции трансплантата (повышение сывороточного креатинина и/или протеинурии), а только воспаление почечной паренхимы: это называется «субклиническим» гуморальным отторжением. Дисфункция трансплантата возникает только тогда, когда воспаление является серьезным и вызывает необратимые повреждения фиброза.

Новые чувствительные методы детекции анти-HLA-антител позволяют обнаружить ДСА задолго до начала гуморального отторжения, но единственный способ поставить диагноз гуморального отторжения — выполнить биопсию трансплантата, инвазивный процесс с геморрагическим риском, который нельзя повторить. слишком часто.

Эндотелиальные микрочастицы (МПЭ) представляют собой небольшие мембранные везикулы, образующиеся в результате активации эндотелиальных клеток и/или процессов апоптоза. Повышение уровня в циркулирующей крови сегодня проявляется эндотелиальной дисфункцией при многих патологиях. Их роль в гуморальном отторжении, модели эндотелиальной дисфункции, никогда не изучалась.

Мы хотим проверить гипотезу о том, что эндотелиальные микрочастицы являются ранним диагностическим биомаркером гуморального отторжения при трансплантации почки, позволяющим выявлять его на «субклинической» стадии.

Основные и второстепенные цели:

Основная цель этого исследования - оценить эффективность концентрации МФЭ в плазме для диагностики гуморального отторжения у пациентов с почечным трансплантатом и ДСА. Вторичная цель состоит в том, чтобы исследовать с помощью масс-спектрометрии MPE, специфичные для эндотелия трансплантата, и оценить их диагностическую эффективность по отношению к неспецифическим MEP.

Методология:

Мы проведем поперечную оценку диагностического метода из коллекции биологических образцов. Золотым стандартом диагностики гуморального отторжения является гистологический диагноз при биопсии трансплантата. Новым изучаемым тестом будет проточный цитометрический анализ концентрации MPE, проводимый в плазме, взятой в день биопсии трансплантата.

Осуществимость:

По нашим оценкам, среди активного списка пациентов с трансплантацией почки, посещающих университетскую больницу Монпелье, мы можем включить необходимое количество субъектов (N = 250) в течение 18 месяцев. Эта работа будет проводиться в лаборатории со всеми используемыми инструментами и методами, в частности проточной цитометрией и масс-спектрометрией, в совершенстве освоенными и реализованными на специализированных технических платформах.

Преимущества/перспективы:

В то время, когда нехватка органов растет и становится реальной проблемой общественного здравоохранения, становится необходимым лучше контролировать лечение гуморального отторжения, основной причины длительной потери почечного трансплантата. Одним из ключевых шагов на этом этапе является поиск неинвазивного раннего диагностического биомаркера для выявления гуморального отторжения на «субклинической» стадии, чтобы как можно быстрее разработать адаптированное лечение.