Microparticelle endoteliali e rigetto mediato da anticorpi e trapianto di rene: biomarcatore di rigetto mediato da anticorpi nel trapianto di rene (MICROMARK RJ)

Contesto e motivazione:

Il rigetto mediato da anticorpi è la principale causa di perdita del trapianto renale a lungo termine. È dovuta alla produzione da parte del ricevente di anticorpi diretti contro antigeni (appartenenti o meno al sistema HLA) presenti sulla superficie delle cellule endoteliali specifiche del donatore (DSA), il cui legame può attivare l'endotelio renale ed essere responsabile dell'infiammazione portando a fibrosi e distruzione dell'innesto.

L'ostacolo principale nella gestione del rigetto umorale è il ritardo della diagnosi e del trattamento per rallentare l'evoluzione verso la fibrosi. All'inizio del processo non vi è alcuna disfunzione "apparente" del graft (aumento della creatinina sierica e/o della proteinuria) ma solo infiammazione del parenchima renale: si parla di rigetto umorale "subclinico". La disfunzione del trapianto si verifica solo quando l'infiammazione è grave e responsabile di lesioni irreversibili della fibrosi.

Nuove tecniche di rilevamento sensibile per gli anticorpi anti-HLA consentono di rilevare il DSA ben prima dell'inizio del rigetto umorale, ma l'unico modo per fare la diagnosi di rigetto umorale è eseguire una biopsia del trapianto, un processo invasivo con un rischio emorragico che non può essere ripetuto troppo frequentemente.

Le microparticelle endoteliali (MPE) sono piccole vescicole di membrana generate dall'attivazione delle cellule endoteliali e/o dai processi di apoptosi. Un livello crescente di sangue circolante appare oggi come una disfunzione endoteliale in molte patologie. Il loro ruolo nel rigetto umorale, un modello di disfunzione endoteliale, non è mai stato esplorato.

Desideriamo testare l'ipotesi che le microparticelle endoteliali siano un biomarker diagnostico precoce del rigetto umorale nel trapianto renale permettendo di rilevarlo allo stadio "subclinico".

Obiettivi primari e secondari:

L'obiettivo principale di questo studio è stimare le prestazioni della concentrazione plasmatica di MPE per la diagnosi di rigetto umorale nei pazienti sottoposti a trapianto renale con DSA. L'obiettivo secondario è indagare mediante spettrometria di massa gli MPE specifici dell'endotelio dell'innesto e valutarne le prestazioni diagnostiche in relazione a MEP non specifici

Metodologia :

Condurremo una valutazione trasversale di un metodo diagnostico da una raccolta di campioni biologici. Il gold standard per la diagnosi di rigetto umorale è la diagnosi istologica sulla biopsia del trapianto. Il nuovo test oggetto di studio sarà il dosaggio citofluorimetrico della concentrazione di MPE effettuato sul plasma prelevato il giorno della biopsia del trapianto.

Fattibilità:

Tra l'elenco attivo di pazienti sottoposti a trapianto renale che frequentano l'Ospedale Universitario di Montpellier, stimiamo di poter includere il numero di soggetti richiesti (N = 250) in 18 mesi. Questo lavoro sarà svolto in un laboratorio con tutti gli strumenti e le tecniche utilizzate, in particolare la citometria a flusso e la spettrometria di massa, perfettamente padroneggiate e realizzate su piattaforme tecniche dedicate

Vantaggi / Prospettive:

In un momento in cui la carenza di organi cresce e diventa un vero e proprio problema di salute pubblica, diventa fondamentale controllare al meglio la gestione del rigetto umorale, principale causa di perdita del trapianto renale a lungo termine. Uno dei passaggi chiave in questo passaggio è trovare un biomarcatore diagnostico precoce non invasivo per rilevare il rigetto umorale dalla fase "subclinica" al fine di impostare un trattamento adattato il più rapidamente possibile.