Характеристика микробных, иммунных и эпигенетических биомаркеров большого депрессивного расстройства и лечения ЭСТ

Все процедуры будут одобрены Хельсинкским комитетом по этике ZIV. Набор и клиническая оценка: для этого исследования будут набраны 40 пациентов с БДР, а также 20 здоровых участников того же возраста (в качестве контрольной группы). Психиатр, не участвующий в исследовании, будет оценивать квалификацию пациентов для подписания информированного согласия. После подписания информированного согласия у всех участников будут взяты образцы стула и крови (20 мл) для оценки микробного состава, а также показателей воспаления и экспрессии белка в крови. В соответствии с клинической оценкой пациентов с диагнозом БДР психиатр порекомендует лечение СИОЗС или ЭСТ, и пациенты будут соответственно разделены на группы лечения. Клинический статус будет оцениваться по Шкале оценки депрессии Гамильтона (HAM-D), которую психиатр оценивает в начальной точке (до лечения), через 4 недели лечения (поскольку пациенты группы ЭСТ получают в среднем 8-12 процедур). Снижение балла по шкале HAM-D будет считаться клиническим улучшением, которое может быть связано с лечением. Согласно нашему прошлому опыту, исследователи ожидают, что эффективность лечения ЭСТ превысит 50%. Исследователи будут собирать образцы крови и стула у пациентов с БДР после 4 недель лечения, повторять измерения воспаления, экспрессии белка и микробов и сравнивать их с первоначальными результатами. Дополнительные зарегистрированные данные будут включать возраст, ИМТ, этническую принадлежность, предыдущее использование лекарств и количество процедур ЭСТ или текущих лекарств.

Критерии включения: больные БДР со стабильной депрессией, клинически диагностированной психиатром по шкале депрессии Гамильтона. Возраст пациентов может варьироваться от 18 до 80 лет, поскольку депрессия чаще встречается у пожилых людей, о чем свидетельствует средний возраст старше 55 лет среди пациентов, получающих лечение в медицинском центре Зив.

Критерии исключения: пациенты, получавшие антибиотики в течение последних 3 месяцев до отбора проб, пациенты, страдающие хроническими желудочно-кишечными заболеваниями или другими хроническими заболеваниями, такими как аутоиммунные или онкологические, пациенты с сопутствующими заболеваниями, такими как шизофрения.

Образцы крови: цельная кровь будет центрифугирована, а образцы сыворотки будут храниться при температуре -80°C до проведения анализа на предмет воспаления. Кроме того, будут очищены лимфоциты, выделена РНК и проведена qRT-PCR для тестирования экспрессии иммунных белков и рецепторов (IL-1β, IL-1R1, IL-6, TNF-α, TNF1, TNF2), а также дополнительных белки, связанные с MDD (например, каннабиноидный рецептор 1- CNR1, CD38, окситоциновый рецептор- OXTR, нейротрофический фактор головного мозга - BDNF).

Воспалительные показатели в сыворотке: мы будем измерять уровни про- и противовоспалительных цитокинов с помощью мультиплексных тестов, включая IL-1, IL-6, IL-8, IL-10 и TNFα, с использованием набора Bio-Plex (Bio-Rad). . Планшет для анализа будет прочитан на мультиплексном считывающем устройстве MAGPIX (Bio-Rad).

Образцы стула: образцы стула будут храниться в течение 4 часов с момента сбора при температуре -80°C до обработки.

Микробный анализ: микробная ДНК будет выделена из стула, и будет создана библиотека 16S рРНК со штрих-кодом от каждого субъекта, из которой мы получим ~ 300 000 прочтений на образец с использованием платформы Illumina MiSeq (секвенирование NGS) на медицинском факультете Университета Бар-Илан. . Последовательности будут проанализированы QIIME. Кроме того, микробная РНК будет извлечена из стула, чтобы проверить экспрессию микробного гена с помощью метатранскриптомики (секвенирование NGS).

Статистический анализ. Все анализы будут проводиться с использованием статистического программного обеспечения SPSS версии 24 (SPSS Inc., Чикаго, Иллинойс, США).