Karakterisering av mikrobielle, immune og epigenetiske biomarkører for alvorlig depressiv lidelse og ECT-behandling

Alle prosedyrer vil bli godkjent av ZIV Helsinkis etiske komité. Rekruttering og klinisk vurdering: 40 MDD-pasienter vil bli rekruttert til denne studien, samt 20 friske aldersmatchede deltakere (som kontrollgruppe). En psykiater som ikke er involvert i studien vil vurdere pasientenes kvalifikasjoner for å signere informert samtykke. Etter signering av informert samtykke, vil avførings- og blodprøver (20 ml) bli samlet inn fra alle deltakerne, for vurdering av mikrobiell sammensetning og blodmåling av betennelse og proteinekspresjon. Etter klinisk vurdering av de diagnostiserte MDD-pasientene vil psykiateren anbefale SSRI- eller ECT-behandling, og pasientene deles deretter inn i behandlingsgruppe. Klinisk status vil bli vurdert av Hamilton Depression Rating Scale (HAM-D) skåret av en psykiater ved startpunktet (før behandling), etter 4 ukers behandling (da pasienter i ECT-gruppe får 8-12 behandlinger i gjennomsnitt). En reduksjon i HAM-D-skåren vil betraktes som klinisk forbedring som kan tilskrives behandling. Etterforskerne forventer en behandlingssuksessrate på over 50 % for ECT i henhold til vår tidligere erfaring. Etterforskerne vil samle blod- og avføringsprøver fra MDD-pasienter etter 4 ukers behandling, gjenta inflammatoriske, proteinekspresjons- og mikrobielle målinger og sammenligne dem med de første resultatene. Ytterligere data registrert vil inkludere alder, BMI, etnisitet, tidligere medisinbruk og antall ECT-behandlinger eller nåværende medisinering.

Inklusjonskriterier: MDD-pasienter med stabil depresjon klinisk diagnostisert av en psykiater i henhold til Hamilton Depression Scale. Pasientalder kan variere mellom 18-80 år, da depresjon er mer vanlig hos eldre mennesker, representert ved en medianalder på over 55 i den behandlede befolkningen ved Ziv Medical Center.

Eksklusjonskriterier: Pasienter som har fått antibiotika de siste 3 månedene før prøvetaking, pasienter som lider av kroniske gastrointestinale sykdommer eller andre kroniske sykdommer som autoimmun eller kreft, pasienter med komorbiditeter som schizofreni.

Blodprøver: Fullblod vil bli sentrifugert og serumprøver holdes ved -80C frem til analyse for inflammatoriske målinger. I tillegg vil lymfocytter bli renset, RNA vil bli ekstrahert og qRT-PCR vil bli utført for å teste immunprotein og reseptorekspresjon (IL-1β, IL-1R1, IL-6, TNF-α, TNF1, TNF2) samt ytterligere proteiner relatert til MDD (f.eks. cannabinoidreseptor 1- CNR1, CD38, oksytocinreseptor-OXTR, hjerneavledet nevrotrofisk faktor – BDNF).

Inflammatoriske mål i serum: Vi vil måle nivåer av pro- og anti-inflammatoriske cytokiner ved multiplekse tester inkludert IL-1, IL-6, IL-8, IL-10 og TNFα ved hjelp av et Bio-Plex-sett (Bio-Rad) . Analyseplaten avleses på en MAGPIX multipleks-leser (Bio-Rad).

Avføringsprøver: avføringsprøver vil bli lagret innen 4 timer fra innsamling ved -80C til behandling.

Mikrobiell analyse: Mikrobiell DNA vil bli renset fra avføring og et strekkodet 16S rRNA-bibliotek fra hvert emne vil bli generert hvorfra vi vil oppnå ~300 000 avlesninger per prøve ved å bruke Illumina MiSeq-plattformen (NGS-sekvensering) ved Det medisinske fakultet, Bar Ilan University . Sekvenser vil bli analysert av QIIME. I tillegg vil mikrobiell RNA ekstraheres fra avføring for å teste mikrobiell genuttrykk via metatranskriptomikk (NGS-sekvensering).

Statistisk analyse: Alle analyser vil bli utført ved hjelp av statistisk programvare SPSS versjon 24 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA).