Karakterisering van microbiële, immuun- en epigenetische biomarkers voor depressieve stoornis en ECT-behandeling

Alle procedures worden goedgekeurd door de ethische commissie van ZIV Helsinki. Werving en klinische beoordeling: 40 MDD-patiënten zullen worden gerekruteerd voor deze studie, evenals 20 gezonde deelnemers van dezelfde leeftijd (als controlegroep). Een psychiater die niet bij het onderzoek betrokken is, zal de kwalificatie van de patiënten voor het ondertekenen van geïnformeerde toestemming beoordelen. Na ondertekening van de geïnformeerde toestemming zullen ontlastings- en bloedmonsters (20 ml) worden verzameld van alle deelnemers, voor beoordeling van de microbiële samenstelling en bloedmetingen van ontsteking en eiwitexpressie. Volgens de klinische beoordeling van de gediagnosticeerde MDD-patiënten zal de psychiater een SSRI- of ECT-behandeling aanbevelen, en de patiënten zullen dienovereenkomstig worden verdeeld in de behandelingsgroep. De klinische status zal worden beoordeeld door de Hamilton Depression Rating Scale (HAM-D), gescoord door een psychiater bij het beginpunt (vóór de behandeling), na 4 weken behandeling (aangezien patiënten uit de ECT-groep gemiddeld 8-12 behandelingen krijgen). Een verlaging van de HAM-D-score wordt beschouwd als een klinische verbetering die kan worden toegeschreven aan de behandeling. De onderzoekers verwachten een behandelingssuccespercentage van meer dan 50% voor ECT volgens onze ervaringen uit het verleden. De onderzoekers verzamelen bloed- en ontlastingsmonsters van MDD-patiënten na 4 weken behandeling, herhalen ontstekings-, eiwitexpressie- en microbiële metingen en vergelijken deze met de eerste resultaten. Aanvullende geregistreerde gegevens zijn leeftijd, BMI, etniciteit, eerder medicatiegebruik en aantal ECT-behandelingen of huidige medicatie.

Inclusiecriteria: MDD-patiënten met stabiele depressie klinisch gediagnosticeerd door een psychiater volgens de Hamilton Depression Scale. De leeftijd van de patiënt kan variëren van 18 tot 80 jaar, aangezien depressie vaker voorkomt bij oudere mensen, zoals vertegenwoordigd door een mediane leeftijd van boven de 55 in de behandelde populatie in het Ziv Medisch Centrum.

Uitsluitingscriteria: patiënten die antibiotica kregen in de afgelopen 3 maanden voorafgaand aan de monstername, patiënten die lijden aan chronische gastro-intestinale aandoeningen of andere chronische ziekten zoals auto-immuunziekten of kanker, patiënten met comorbiditeiten zoals schizofrenie.

Bloedmonsters: Volbloed wordt gecentrifugeerd en serummonsters worden bewaard bij -80C tot analyse voor ontstekingsmetingen. Bovendien zullen lymfocyten worden gezuiverd, zal RNA worden geëxtraheerd en zal qRT-PCR worden uitgevoerd om immuuneiwit- en receptorexpressie (IL-1β, IL-1R1, IL-6, TNF-α, TNF1, TNF2) te testen, evenals aanvullende eiwitten gerelateerd aan MDD (bijv. cannabinoïde receptor 1- CNR1, CD38, oxytocine receptor- OXTR, van de hersenen afgeleide neurotrofe factor - BDNF).

Inflammatoire maatregelen in het serum: we zullen niveaus van pro- en anti-inflammatoire cytokines meten door middel van multiplextesten, waaronder IL-1, IL-6, IL-8, IL-10 en TNFα met behulp van een Bio-Plex-kit (Bio-Rad) . De testplaat wordt gelezen op een MAGPIX multiplexlezer (Bio-Rad).

Ontlastingsmonsters: ontlastingsmonsters worden binnen 4 uur na afname bij -80C tot verwerking bewaard.

Microbiële analyse: microbieel DNA wordt gezuiverd uit ontlasting en er wordt een 16S rRNA-bibliotheek met streepjescode van elk onderwerp gegenereerd waaruit we ~ 300.000 metingen per monster zullen verkrijgen met behulp van het Illumina MiSeq-platform (NGS-sequencing) aan de faculteit Geneeskunde, Bar Ilan University . Sequenties zullen worden geanalyseerd door QIIME. Daarnaast zal microbieel RNA worden geëxtraheerd uit ontlasting om microbiële genexpressie te testen via metatranscriptomics (NGS-sequencing).

Statistische analyse: Alle assays worden uitgevoerd met behulp van statistische software SPSS versie 24 (SPSS Inc., Chicago, IL, VS).