Отсроченная инфузия DCreg при трансплантации печени живого донора

Длительная иммуносупрессия после трансплантации паренхиматозных органов связана с опасными для жизни побочными эффектами, включая инфекции, злокачественные новообразования, диабет и повышенный риск сердечно-сосудистых заболеваний. Кроме того, применение ингибиторов кальциневрина (ИКН) вызывает нефротоксичность и значительную частоту развития хронической почечной недостаточности (ХПН) через 5 лет после ортотопической трансплантации печени (ОТП). Многие пациенты с ХПН после ОТП нуждаются в заместительной почечной терапии (диализ или трансплантация почки) и имеют повышенный риск смертности. Большое исследование, основанное на базе данных Научного реестра реципиентов трансплантатов (SRTR) и базы данных Центров услуг Medicare и Medicaid (CMMS) ESRD Program, показало частоту ESRD 15 на 1000 пациенто-лет, подразумевая, что через 20 лет ~ 30% пациентов требуют заместительной почечной терапии. Пациенты, демонстрирующие прогрессирующую потерю функциональной массы нефронов, также подвержены риску прогрессирования хронической болезни почек (ХБП), которая, как известно, приводит к более чем 4-кратному увеличению риска смертности. Отмена иммуносупрессии (CNI), особенно до того, как развилось значительное повреждение почек, может сохранить почечную функцию и предотвратить заболеваемость и смертность, связанные с ХБП/ХПН и заместительной почечной терапией. Отмена иммунодепрессантов может также снизить повышенный риск инфекций, злокачественных новообразований, диабета и сердечно-сосудистых заболеваний, непосредственно связанных с обычными иммунодепрессантами.

Наша цель — разработать новый, безопасный подход к клеточной терапии, который при использовании в трансплантации печени способствовал бы безопасному полному отмене иммуносупрессии без ущерба для функции аллотрансплантата или его гистологии. Недавние данные свидетельствуют о том, что, используя внутренние механизмы иммунной регуляции, можно достичь этой цели. Редкие природные регуляторные иммунные клетки, как врожденные, так и адаптивные, критически регулируют иммунитет, способствуют гипореактивности антиген-специфических Т-клеток и предотвращают неблагоприятные иммунные реакции в здоровом равновесном состоянии. В дополнение к Treg, оцениваемому для клеточной терапии при трансплантации органов, появилось убедительное обоснование для клинических испытаний регуляторных DC, модифицированных ex vivo для усиления их регуляторных свойств (DCreg). Таким образом, у грызунов введение донорских DCreg перед трансплантацией, в том числе в сочетании с традиционными ИС, способствует неопределенной (> 100 дней) выживаемости аллотрансплантатов органов. Имеются также данные о том, что инфузия DCreg, полученного от донора или реципиента, после трансплантации может способствовать неопределенно долгому выживанию аллотрансплантата. Что еще более важно и уникально, используя надежную, клинически значимую модель приматов, отличных от человека (NHP), с минимальным ИС, мы показали, что инфузия DCreg за одну неделю до трансплантации значительно и безопасно продлевает выживаемость почечного аллотрансплантата без каких-либо доказательств сенсибилизация хозяина. Столь же важным является наша демонстрация того, что увеличение выживаемости аллотрансплантата связано с избирательным ослаблением донор-реактивных ответов Tmem, что является важным препятствием для улучшения долгосрочной выживаемости трансплантата и достижения операционной толерантности.

Разработка безопасных и эффективных подходов, которые улучшают долгосрочную выживаемость трансплантатов при одновременном снижении нагрузки на обычные иммуносупрессивные препараты, окажет значительное влияние на здоровье, а также на затраты тысяч реципиентов органов. Обширные доклинические исследования, проведенные доктором Томсоном (спонсором IND) и другими на грызунах и гуманизированных моделях мышей, убедительно свидетельствуют о потенциале терапии регуляторными иммунными клетками для повышения долгосрочной выживаемости аллотрансплантата и во многих случаях для повышения донор-специфической толерантности. Случай оценки DCreg, генерируемого ex vivo, особенно убедителен. Во-первых, DC по своей природе являются толерогенными, уникально хорошо оборудованными профессиональными Ag-презентирующими клетками (APC), которые эффективно регулируют врожденный и адаптивный иммунитет. Во-вторых, во многих исследованиях на животных DCreg, адоптивно перенесенный реципиентам аллотрансплантата до или после трансплантации, индуцирует антиген-специфическую толерантность и способствует неопределенно долгому выживанию трансплантата. Более того, этот терапевтический эффект, по-видимому, не зависит от персистенции интактного DCreg in vivo. Независимость эффективности и основных регуляторных механизмов от персистенции интактного донорского DCreg может быть явным преимуществом по сравнению с другими подходами к клеточной терапии, где для достижения терапевтического эффекта может потребоваться дорогостоящая повторная инфузия большого количества клеток и их устойчивая жизнеспособность/стабильность/репликация. В-третьих, важным свойством DCreg является их способность регулировать предварительно сформированные ответы Tmem, которые из-за молекулярной мимикрии перекрестно реагируют с HLA-Ag [66], что представляет собой основной барьер для долгосрочного выживания трансплантата у людей. В-четвертых, у нормальных людей адоптивный перенос происходящих из моноцитов DCreg индуцирует Ag-специфическое ингибирование функции эффекторных Т-клеток. В-пятых, используя минимальный IS в надежной модели NHP, мы сообщили, что однократное введение 3,5-10,106/кг донорский DCreg перед трансплантацией безопасно продлевает выживаемость почечного аллотрансплантата без сенсибилизации хозяина. Важно отметить, что этот эффект связан с ослаблением донор-специфических аллореактивных ответов Tmem.

Подход DCreg может быть легко применен в клинике, поскольку однократной инфузии относительно небольшого количества DCreg (3,5-10,106/кг) в NHP достаточно для достижения благотворного терапевтического эффекта. Следовательно, нет необходимости ни в дорогостоящем увеличении количества клеточного продукта в течение нескольких недель (по сравнению с Treg), ни в повторной инфузии. Также вероятно, что DCreg будет иметь более широкое клиническое применение, чтобы охватить реципиентов трансплантатов органов от умерших доноров, поскольку исследования на грызунах показали, что отсрочка инфузии DCreg до 7 или 14 дней после трансплантации по-прежнему эффективна для продления выживаемости трансплантата и повышения толерантности, обеспечивая достаточную время для подготовки DCreg от умерших доноров.

Возможность того, что введение DCreg может способствовать ранней отмене иммуносупрессии (< 3 лет) после трансплантации печени, несет в себе потенциально большое преимущество, поскольку избавляет пациентов от сердечно-сосудистых, инфекционных, неопластических и почечных побочных эффектов длительной иммуносупрессии, особенно с CNI. Трансплантация печени предоставляет особую возможность для достижения этой цели, потому что трансплантаты печени лучше переносятся иммунной системой реципиента, чем трансплантаты других паренхиматозных органов, при этом отмена иммуносупрессии возможна примерно у 20% пациентов в целом (при отсутствии какой-либо экспериментальной иммуномодулирующей терапии) по сравнению с до <5% у реципиентов почечного трансплантата. Увеличение доли реципиентов печени, которые могут быть выведены из иммуносупрессии посредством введения DCreg примерно во время трансплантации, может принести значительную пользу для здоровья этой популяции пациентов.