鼻内胰高血糖素对内源性葡萄糖产生的评估

15 名健康、苗条、无糖尿病的男性和女性将分别接受两项研究（单盲交叉），随机顺序，相隔 4-6 周。

研究 A. 鼻内安慰剂给药，在胰腺钳夹条件下测量内源性葡萄糖的产生。

研究 B. 鼻内胰高血糖素（胰高血糖素，Eli Lilly，加拿大）给药并在胰腺钳夹条件下测量内源性葡萄糖产生 每个研究参与者将在研究前一天的中午 12 点入住多伦多总医院的代谢测试中心。 他们将获得标准化晚餐（包括 7 Kcal/kg；50% 的碳水化合物、30% 的脂肪和 20% 的蛋白质），然后将被要求隔夜禁食 12 小时（可以喝水，但不能喝其他食物或饮料） ).

第二天早上 7 点 (t=0)，我们将开始持续静脉输注 [6,6-2H2] 葡萄糖（D2 葡萄糖；剑桥同位素实验室，马萨诸塞州；一种稳定的葡萄糖同位素，其富集可以通过 GC/MS 测量，使我们能够计算内源性葡萄糖生产率）。 输液将持续 8 小时。

同时（早上 7 点）将开始胰钳夹 8 小时，以通过静脉输注提供胰腺激素和生长激素的基础输注，同时用生长抑素抑制胰腺激素分泌。 这种方法将使我们能够研究鼻内胰高血糖素对肝葡萄糖和 TRL 产生的影响，而不会对胰腺激素分泌产生混杂影响。 同时输注生长抑素（Sandostatin, Novartis Pharma, Miss, ON 30mcg/hr），胰岛素（Humulin R, Eli Lilly, Scarborough, ON, 0.05mU/kg/min），胰高血糖素（Eli Lilly, Miss, ON 0.325ng/ kg/min)和生长激素(Humatrope, Eli Lilly, Mississauga, ON 3ng/kg/min)将开始并在整个研究过程中持续。 所有激素都用 1 升生理盐水稀释并用注射器泵 (B. Braun Medical Inc.，宾夕法尼亚州伯利恒）。 在激素稀释之前，将受试者血液新鲜制备的自体血清 (3 mL) 添加到盐水中作为载体。

研究护士和/或医生将在整个钳夹期间在床边，并将在钳夹开始后每 30 分钟和胰高血糖素给药后每 10 分钟监测一次参与者的血糖（如果有临床指征，采样可能会更频繁) 以确保参与者不会出现低血糖/高血糖。 血液样本将用血糖仪进行分析，以获得即时血糖读数。 如果鼻内胰高血糖素减少内源性葡萄糖的产生，则可能会降低血浆葡萄糖。 如有必要，将给予 20% 葡萄糖以维持血糖正常 在上午 9 点（+120 分钟），将给予鼻内安慰剂或胰高血糖素。 在使用前立即将胰高血糖素（Eli Lily，加拿大）和安慰剂（稀释剂）转移到计量鼻腔装置（Pharmasystems，Markham，Ontario UPC：063636 802721，项目 10271）。 该装置每次喷出 0.1 毫升（0.1 毫克）。 每 60 秒将以 2 次（每个鼻孔一个）的速率施用最多 15 X0.1 ml 喷剂/小瓶（一个鼻孔中 7 个，另一个鼻孔中 8 个）。 如有必要，可以滴定该剂量以减少外周溢出。

血样将在夹钳开始后每 30 分钟收集一次，在给予鼻内胰高血糖素或安慰剂（总共 400 毫升）后每 10 分钟收集一次。 血液样本将被收集到含有 0.1% EDTA 和防腐剂（抑肽酶、叠氮化钠）的冷冻无菌试管中，并如下所示进行处理。

为了匹配两次研究访问之间的外周胰高血糖素浓度，在研究的安慰剂组期间，可能需要在上午 9 点静脉注射小剂量胰高血糖素。 根据胰高血糖素的药代动力学，我们可能会给予 0.00625mg-0.025mg， 尽管可能需要进一步调整剂量（最大剂量 0.1mg）。 将测量游离脂肪酸、甘油三酯、胰岛素、胰高血糖素、C 肽、胰高血糖素样肽-1 (GLP-1) 和 GIP，以及葡萄糖同位素富集。