Bedömning av intranasal glukagon på endogen glukosproduktion

Femton friska, magra, icke-diabetiska män och kvinnor kommer att genomgå två studier vardera (enkelblindad crossover), i slumpmässig ordning, med 4-6 veckors mellanrum.

Studie A. Intranasal placeboadministrering med mätning av endogen glukosproduktion under pankreatisk klämbetingelser.

Studie B. Intranasal glukagon (glukagon, Eli Lilly, Kanada) administrering med mätning av endogen glukosproduktion under pankreatisk klämförhållanden. Varje studiedeltagare kommer att läggas in på Metabolic Test Center på Toronto General Hospital dagen före studien kl. 12.00. De kommer att förses med en standardiserad middag (bestående av 7 Kcal/kg; 50 % kolhydrat, 30 % fett och 20 % protein) och kommer sedan att behöva fasta i 12 timmar över natten (kan ha vatten men ingen annan mat eller dryck ).

Klockan 07.00 (t=0) nästa dag kommer vi att påbörja en förberedd, konstant intravenös infusion av [6,6-2H2]glukos (D2-glukos; Cambridge Isotope Laboratories, MA; en stabil isotop av glukos, vars anrikning kan mätas med GC/MS, vilket gör att vi kan beräkna endogena glukosproduktionshastigheter). Infusionen fortsätter i 8 timmar.

Samtidigt (7 på morgonen) kommer en pankreasklämma att startas under 8 timmar för att undertrycka utsöndringen av pankreashormon med somatostatin samtidigt som basala infusioner av pankreashormoner och tillväxthormon tillhandahålls genom intravenös infusion. Denna metod kommer att tillåta oss att studera effekten av intranasalt glukagon på leverglukos och TRL-produktion utan de förvirrande effekter det kan ha på utsöndringen av pankreashormon. En samtidig infusion av somatostatin (Sandostatin, Novartis Pharma, Miss, ON 30mcg/timme), insulin (Humulin R, Eli Lilly, Scarborough, ON, 0,05mU/kg/min), glukagon (Eli Lilly, Miss, ON 0,325ng/ kg/min) och tillväxthormon (Humatrope, Eli Lilly, Mississauga, ON 3ng/kg/min) kommer att startas och fortsätta under hela studien. Alla hormoner späddes i 1 liter normal koksaltlösning och infunderades med en sprutpump (B. Braun Medical Inc., Bethlehem, PA). Autologt serum (3 ml), nyligen framställt från patientens blod, sattes till saltlösningen som bärare före hormonutspädning.

En studiesjuksköterska och/eller läkare kommer att finnas vid sängen under hela klämman och kommer att övervaka deltagarens blodsocker var 30:e minut efter klämmans början och var 10:e minut efter administrering av glukagon (om det är kliniskt indicerat kan provtagningen vara mer frekvent ) för att säkerställa att deltagarna inte utvecklar hypo/hyperglykemi. Blodprover kommer att analyseras med en glukosmeter för omedelbara blodsockeravläsningar. Om intranasalt glukagon minskar endogen glukosproduktion, är en minskning av plasmaglukos sannolikt. 20 % dextros kommer att administreras vid behov för att upprätthålla euglykemi. Klockan 9 (+120 minuter) kommer intranasal placebo eller glukagon att administreras. Glukagonet (Eli Lily, Kanada) och placebo (spädningsmedel) kommer att överföras till en mätt näsanordning (Pharmasystems, Markham, Ontario UPC: 063636 802721, artikel 10271) omedelbart före användning. Denna enhet dispenserar 0,1 ml (0,1 mg) per bloss. Maximalt 15 x 0,1 ml bloss/flaskor (7 i 1 näsborre och 8 i den andra näsborren) kommer att administreras med en hastighet av 2 (en i varje näsborre) var 60:e sekund. Denna dos kan titreras ned vid behov för att minska perifert spillover.

Blodprover tas var 30:e minut efter start av klämman och var 10:e minut efter administrering av intranasalt glukagon eller placebo (totalt 400 ml). Blodproverna kommer att samlas in i kylda sterila rör innehållande 0,1 % EDTA och konserveringsmedel (aprotinin, natriumazid) och bearbetas enligt nedan.

För att matcha perifera glukagonkoncentrationer mellan studiebesöken kommer en liten dos glukagon sannolikt att behöva administreras intravenöst kl. 09.00, under studiens placeboarm. Baserat på farmakokinetiken för glukagon, kommer vi sannolikt att administrera 0,00625mg-0,025mg, även om ytterligare dostitrering kan vara nödvändig (maximal dos 0,1 mg). Fria fettsyror, triglycerider, insulin, glukagon, C-peptid, glukagonliknande peptid-1 (GLP-1) och GIP, samt glukosisotopberikning kommer att mätas.