내인성 포도당 생산에 대한 비강 내 글루카곤의 평가

15명의 건강하고 날씬하며 당뇨병이 없는 남성과 여성이 4-6주 간격으로 무작위 순서로 각각 두 가지 연구(단일 맹검 교차)를 받게 됩니다.

연구 A. 췌장 클램프 조건 하에서 내인성 글루코스 생산의 측정과 함께 비강내 위약 투여.

연구 B. 췌장 클램프 조건 하에서 내인성 포도당 생산의 측정과 함께 비강내 글루카곤(글루카곤, Eli Lilly, 캐나다) 투여 각 연구 참가자는 연구 전날 오후 12시에 토론토 종합 병원의 대사 시험 센터에 입원할 것입니다. 그들은 표준화된 저녁 식사(7Kcal/kg; 탄수화물 50%, 지방 30%, 단백질 20%로 구성)를 제공받은 다음 밤새 12시간 동안 금식해야 합니다(물은 가능하지만 다른 음식이나 음료는 허용되지 않음). ).

다음날 오전 7시(t=0)에 [6,6-2H2]글루코스(D2 글루코스; Cambridge Isotope Laboratories, MA; 글루코스의 안정한 동위원소, 풍부화는 GC/MS로 측정하여 내인성 포도당 생산 속도를 계산할 수 있습니다. 주입은 8시간 동안 계속됩니다.

동시에(오전 7시) 췌장 클램프를 8시간 동안 시작하여 소마토스타틴으로 췌장 호르몬 분비를 억제하는 동시에 정맥 주입으로 췌장 호르몬과 성장 호르몬의 기본 주입을 제공합니다. 이 방법을 사용하면 췌장 호르몬 분비에 미칠 수 있는 교란 효과 없이 비강 내 글루카곤이 간 포도당 및 TRL 생산에 미치는 영향을 연구할 수 있습니다. 소마토스타틴(Sandostatin, Novartis Pharma, Miss, ON 30mcg/hr), 인슐린(Humulin R, Eli Lilly, Scarborough, ON, 0.05mU/kg/min), 글루카곤(Eli Lilly, Miss, ON 0.325ng/hr) 동시 주입 kg/min) 및 성장 호르몬(Humatrope, Eli Lilly, Mississauga, ON 3ng/kg/min)을 시작하고 연구 내내 계속할 것입니다. 모든 호르몬은 생리 식염수 1리터에 희석하여 주사기 펌프(B. Braun Medical Inc., 베들레헴, PA). 피험자의 혈액에서 새로 준비한 자가 혈청(3mL)을 호르몬 희석 전에 담체로서 식염수에 첨가했습니다.

연구 간호사 및/또는 의사는 클램프 동안 침대 옆에 있을 것이며 클램프 시작 후 30분마다 및 글루카곤 투여 후 10분마다 참가자의 혈당을 모니터링할 것입니다(임상적으로 지시된 경우 샘플링을 더 자주 수행할 수 있음). ) 참가자가 저혈당증/고혈당증이 발생하지 않도록 합니다. 혈액 샘플은 즉각적인 혈당 수치를 위해 혈당계로 분석됩니다. 비강 내 글루카곤이 내인성 포도당 생성을 감소시키면 혈장 포도당이 감소할 가능성이 있습니다. 정상혈당증을 유지하기 위해 필요한 경우 20% 덱스트로스가 투여될 것이다. 오전 9시(+120분)에 비강내 위약 또는 글루카곤이 투여될 것이다. 글루카곤(Eli Lily, 캐나다) 및 위약(희석제)은 사용 직전에 계량 비강 장치(Pharmasystems, Markham, Ontario UPC: 063636 802721, 항목 10271)로 옮길 것입니다. 퍼프당 0.1ml(0.1mg)를 분사하는 장치입니다. 최대 15 X 0.1 ml 퍼프/바이알(한 쪽 콧구멍에 7개, 다른 쪽 콧구멍에 8개)을 매 60초마다 2회(각 콧구멍에 하나씩) 주입합니다. 주변 유출을 줄이기 위해 필요한 경우 이 용량을 낮출 수 있습니다.

혈액 샘플은 클램프 시작 후 30분마다 그리고 비강내 글루카곤 또는 위약(총 400ml) 투여 후 10분마다 수집됩니다. 혈액 샘플은 0.1% EDTA 및 방부제(아프로티닌, 아지드화나트륨)가 포함된 냉각된 멸균 튜브에 수집되고 아래 표시된 대로 처리됩니다.

연구 방문 사이에 말초 글루카곤 농도를 일치시키기 위해 연구의 위약군 동안 오전 9시에 소량의 글루카곤을 정맥 주사해야 할 가능성이 높습니다. 글루카곤의 약동학에 기초하여, 우리는 0.00625mg-0.025mg을 투여할 가능성이 있으며, 추가 용량 적정이 필요할 수 있지만(최대 용량 0.1mg). 유리 지방산, 트리글리세리드, 인슐린, 글루카곤, C-펩티드, 글루카곤 유사 펩티드-1(GLP-1) 및 GIP뿐만 아니라 포도당 동위원소 농축도 측정됩니다.