Ocena donosowego glukagonu na endogenną produkcję glukozy

Piętnastu zdrowych, szczupłych, nie cierpiących na cukrzycę mężczyzn i kobiet zostanie poddanych po dwóm badaniom (naprzemiennie z pojedynczą ślepą próbą), w losowej kolejności, w odstępie 4-6 tygodni.

Badanie A. Donosowe podanie placebo z pomiarem endogennej produkcji glukozy w warunkach zacisku trzustkowego.

Badanie B. Donosowe podanie glukagonu (glukagon, Eli Lilly, Kanada) z pomiarem endogennej produkcji glukozy w warunkach zacisku trzustkowego Każdy uczestnik badania zostanie przyjęty do Metabolic Test Centre of Toronto General Hospital dzień przed badaniem o godzinie 12:00. Otrzymają standaryzowaną kolację (składającą się z 7 Kcal/kg; 50% węglowodanów, 30% tłuszczu i 20% białka), a następnie będą musieli pościć przez 12 godzin w ciągu nocy (może mieć wodę, ale nie inne jedzenie ani napoje) ).

O godzinie 7 rano (t=0) następnego dnia rozpoczniemy stały dożylny wlew [6,6-2H2]glukozy (glukoza D2; Cambridge Isotope Laboratories, MA; stabilny izotop glukozy, którego wzbogacenie może można zmierzyć za pomocą GC/MS, co pozwala nam obliczyć tempo endogennej produkcji glukozy). Infuzja będzie kontynuowana przez 8 godzin.

W tym samym czasie (7 rano) zostanie uruchomiony zacisk trzustkowy na 8 godzin w celu zahamowania wydzielania hormonu trzustkowego za pomocą somatostatyny, przy jednoczesnym zapewnieniu podstawowych wlewów hormonów trzustki i hormonu wzrostu we wlewie dożylnym. Ta metoda pozwoli nam zbadać wpływ glukagonu donosowego na wątrobową produkcję glukozy i TRL bez zakłócającego wpływu, jaki może mieć na wydzielanie hormonów trzustkowych. Jednoczesny wlew somatostatyny (Sandostatin, Novartis Pharma, Miss, ON 30mcg/h), insuliny (Humulin R, Eli Lilly, Scarborough, ON, 0,05 mU/kg/min), glukagonu (Eli Lilly, Miss, ON 0,325 ng/ kg/min) i hormonu wzrostu (Humatrope, Eli Lilly, Mississauga, ON 3 ng/kg/min) zostaną rozpoczęte i kontynuowane przez cały okres badania. Wszystkie hormony rozcieńczono w 1 litrze normalnej soli fizjologicznej i podano w infuzji za pomocą pompy strzykawkowej (B. Braun Medical Inc., Betlejem, Pensylwania). Autologiczną surowicę (3 ml), świeżo przygotowaną z krwi osobnika, dodano do soli fizjologicznej jako nośnik przed rozcieńczeniem hormonu.

Pielęgniarka badawcza i/lub lekarz będą przy łóżku pacjenta przez cały okres zacisku i będą monitorować poziom glukozy we krwi uczestnika co 30 minut po rozpoczęciu zacisku i co 10 minut po podaniu glukagonu (jeśli istnieją wskazania kliniczne, pobieranie próbek może być częstsze) ), aby upewnić się, że u uczestników nie wystąpi hipo/hiperglikemia. Próbki krwi będą analizowane za pomocą glukometru w celu uzyskania natychmiastowych odczytów poziomu glukozy we krwi. Jeśli glukagon donosowy zmniejsza endogenną produkcję glukozy, prawdopodobne jest zmniejszenie stężenia glukozy w osoczu. Jeśli będzie to konieczne do utrzymania euglikemii, zostanie podane 20% dekstrozy. O godzinie 9 rano (+120 minut) zostanie podane donosowo placebo lub glukagon. Glukagon (Eli Lily, Kanada) i placebo (rozcieńczalnik) zostaną przeniesione do odmierzanego urządzenia donosowego (Pharmasystems, Markham, Ontario UPC: 063636 802721, pozycja 10271) bezpośrednio przed użyciem. To urządzenie dozuje 0,1 ml (0,1 mg) na jedno zaciągnięcie. Maksymalnie 15 dawek/fiolek x0,1 ml (7 w 1 nozdrzu i 8 w drugim nozdrzu) zostanie podanych z szybkością 2 (po jednej do każdego nozdrza) co 60 sekund. W razie potrzeby dawkę tę można zmniejszyć, aby ograniczyć rozprzestrzenianie się leku obwodowego.

Próbki krwi będą pobierane co 30 minut po rozpoczęciu klamry i co 10 minut po podaniu donosowego glukagonu lub placebo (łącznie 400 ml). Próbki krwi zostaną pobrane do schłodzonych sterylnych probówek zawierających 0,1% EDTA i środek konserwujący (aprotyninę, azydek sodu) i przetworzone zgodnie z poniższym opisem.

W celu dopasowania obwodowych stężeń glukagonu między wizytami w badaniu, prawdopodobnie trzeba będzie podać dożylnie małą dawkę glukagonu o godzinie 9 rano, podczas ramienia placebo badania. Na podstawie farmakokinetyki glukagonu prawdopodobnie podamy 0,00625mg-0,025mg, chociaż może być konieczne dalsze dostosowywanie dawki (maksymalna dawka 0,1 mg). Zmierzone zostaną wolne kwasy tłuszczowe, trójglicerydy, insulina, glukagon, peptyd C, glukagonopodobny peptyd-1 (GLP-1) i GIP, a także wzbogacenie izotopowe glukozy.